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重症肌无力免疫学发病机理的研究

黄煜敏  
【摘要】:重症肌无力(MG)是由自身抗体-乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)介导、器官特异性自身免疫性疾病的原型。近几年的研究发现T细胞依赖机制在本病占有明显和重要的地位,特别是MG发病与胸腺异常(肿瘤或增生)关系密切,而胸腺又是T细胞发育、分化、成熟的场所。因此,细胞免疫应答在MG中的作用是当前研究的热点之一。需要解决的问题是:①既然AChRAb产生的全过程都是细胞依赖性的,那么在MG自身免疫应答启动和维持中,细胞免疫发生了什么变化?有无特异性?②如何通过干扰细胞免疫特异地抑制针对AChR的自身免疫应答? 本文利用多种单克隆抗体、采用双或单免疫荧光标记技术,经流式细胞仪分析,研究了健康对照组和MG患者组外周血中各种淋巴细胞(T、B和NK)表面分子表达状态;结合体外细胞培养方法动态观察了免疫治疗对它们的影响;使用酶释放试验和ELISA技术研究了细胞表面分子与其功能之间的关系;同时建立了逆转录(RT)—多聚酶链反应(PCR)和狭缝印迹杂交定量测定淋巴因子mRNA表达的方法;并检测了MG患者细胞免疫关键因子IL-2mRNA表达水平。 结果表明:①MG自然杀伤(NK)细胞的细胞杀伤活性和数量均明显低于对照组,尤其以数量低下更为明显;经免疫治疗的患者,NK细胞活性在正常水平,但是NK数量无明显改变;而且NK细胞功能和数量之间无明显相关性。此结果提示MG患者免疫防御第一防线有缺陷。②MG存在T细胞亚群表达异常:未经免疫治疗的患者,总T细胞(T-pan)和CD4/CD8比值高于对照;抑制性T细胞(Ts)明显低下;胸腺摘除(Tx)或肾上腺皮质激素(ACS)治疗可使T细胞表面分子表达发生改变:经Tx治疗的患者,T


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