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实验性氯丙嗪白内障的研究

张萍  
【摘要】:氯丙嗪(Chlorpromazine CPZ)属于光敏化合物,是治疗精神病的药物。大量临床观察和动物实验研究结果提示:近紫外辐射(UVA)在CPZ诱发白内障的过程中有重要作用。为了进一步探讨CPZ白内障的发生机制,本文采用体外大鼠晶体器官培养和兔晶体上皮细胞培养进行了以下四方面研究: 1.大鼠晶体器官培养:探讨CPZ与UVA对晶体的损伤,以晶体湿重、Na、K及Ca为指标,找到了CPZ和UVA协同损伤晶体的条件:晶体在含5×10~(-5)M CPZ的培养液中避光孵育1小时,再经1000μ W/cm~2照射1小时,然后更换新鲜培养液进行培养。在此条件下,24小时晶体皮质出现混浊,随着培养时间延长而加重,至72小时晶体完全混浊,此时湿重增加50%,Na含量增加6.7倍,K含量减少62%,Ca含量增加31.5倍,Na~+/K~+-ATPase活性降低43%,蛋白质巯基(PT)和非蛋白质巯基(NPT)均显著减少,在培养48小时后,水溶性蛋白(WS)减少,尿素溶性蛋白(US)增加,SDS-PAGE电泳图谱示31KD消失及二硫键参与尿素溶性蛋白交联。在UVA照射后培养的初期,谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)及谷胱甘肽还原酶(GR)活性开始升高约20%,可能是应激性生理现象,随之酶活性降低,以上结果提示CPZ与UVA协同诱发的晶体混浊可能是氧化损伤所致。 2.兔晶体上皮细胞培养:进一步从细胞水平及分子生物学水平,研究CPZ-UVA的损伤机制。当CPZ为10~(-6)M时,培养N/N1003A兔晶体上皮细胞,UVA 10000μ W/cm~2照射30分钟,细胞相对克隆形成率降低至61%,且随时间延长,降低更加显著,当CPZ为10~(-6)M时,UVA 100μ W/Cm~2照射晶体上皮细胞10分钟后,出现DNA单链段裂(SSB),其严重程度与UVA照射时间呈线性关系。当CPZ为10~(-6)M时,OVA 1000μ W/cm~2照射晶体上皮细胞1小时所造成的SSB损伤,在5分钟时可修复约50%,但随后修复缓慢,在120分钟时,仍有20%未修复,修复过程表现出先快后慢的动力学二相性,与文献报导一致,DNA损伤后的不完全和不及时修复,可能导致细胞的异常分化,以上结果从细胞水平及分子水平进一步提示CPZ-UVA的协


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