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超氧阴离子自由基促大鼠肝卵圆细胞株WB-F344恶性转化及其机理的研究

李芸  
【摘要】:肿瘤是一类严重危害人类健康及生命安全的常见病、多发病,肝癌在整个人类恶性肿瘤发病中占有非常重要的地位。许多研究表明化学因素与肝癌的发生密切相关,但对其致病机理并不十分清楚。有研究显示自由基、活性氧可能参与了肝癌的发生过程,但尚未有确切的证据,尤其是在体外细胞和分子水平的研究。 肝卵圆细胞株WB-F344来自正常成年同基因Fisher344雄性大鼠,是一种肝脏幼稚上皮细胞,具有肝脏干细胞的性质,体内、外的许多研究表明,它与肝癌的发生有一定的关系,具有肝癌前体细胞的作用。Tsao等曾观察到化学物质N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)多次作用导致其转化,但以活性氧直接作用导致其恶性转化的研究尚未见报导。活性氧主要包括O_2~(·-)、H_2O_2及~·OH等,与多种人类疾病的发生密切相关,癌症是其中极为重要的一类。O_2~(·-)是体内活性氧的主要来源,来自线粒体、微粒体、浆膜和胞浆等的酶系统和非酶系统反应,通过单电子还原产生。所有的需氧生物体内均可产生O_2~(·-),在体内可经进一步的岐化反应生成H_2O_2及经Fenton反应生成反应活性更高的~·OH。因O_2~(·-)寿命极短,对其研究相对困难。本室以往曾观察到O_2~(·-)对NIH3T3细胞的转化作用,初步证实了其致、促癌尤其是促癌作用。本文在前人工作的基础上进一步研究了O_2~(·-)多次作用对WB-F344细胞的促恶性转化作用,并首次从相关癌基因在转化过程中表达的动态变化、对胞内重要的信号分子cAMP浓度及胞内活性氧产生的影响方面研究其作用的分子机理,以期进一步了解活性氧在肝癌发生中的作用及其机理。


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