中华眼镜蛇毒组分抗白血病作用的实验及初步临床应用研究

【摘要】：近年来，国内外对蛇毒抗肿瘤作用的研究日趋重视。各类蛇毒中，眼镜蛇蛇毒的直接杀癌效应最强。研究表明，膜毒素是其抗肿瘤作用的主要有效成份。业已证明眼镜蛇蛇毒具有较为广谱的抗瘤活性，但目前研究多限于应用粗毒对细胞株或动物进行的实验，尚未见正式临床试验报告。此外，眼镜蛇毒的抗癌机制还不明了。为了探讨眼镜蛇毒对白血病细胞的直接作用、作用机制及临床疗效，本文对中华眼镜蛇毒组分进行了这方面的研究。 1．应用MTT法检测证明眼镜蛇毒组分对HL60等9株白血病细胞系均有明显的毒性作用，IC_(50)为0.0046-4.40μg／ml，且呈较好的量效关系(r为0.66～0.99；P＜0.2～0.001)。 2．眼镜蛇毒组分对K562／S、K562／AO2杀伤强度相近，IC_(50)分别为1.86和2.26μg／ml。 3．低浓度眼镜蛇毒组分能增强阿霉素对K562／S、K562／AO2的杀伤作用，表现为IC_(50)下降(分别为2.83→1.48μg／ml；196.55→120.98μg／ml；P均＜0.05)；低浓度阿霉素亦能增强眼镜蛇毒组分对白血病细胞株的抑制作用，说明二者对白血病细胞的杀伤有协同作用。 4．发现眼镜蛇毒组分能诱导HL60细胞发生凋亡形态学和生物化学变化；流式细胞仪分析发现眼镜蛇毒组分能使一定比例的J6-1、K562、HL60细胞及取自病人骨髓的白血病细胞发生凋亡，而且凋亡率随蛇毒浓度的增高而增加。 5．应用RT-PCR方法检测Bcl-2／Bax表达水平，发现眼镜蛇毒组分能使HL60细胞Bcl-2基因的表达下调：而Bax变化不明显。