系统性红斑狼疮中T细胞受体Vβ基因表达及p38MAPK活性的研究

【摘要】：系统性红斑狼疮(SLE)是一种病因未明的慢性、炎症性自身免疫病，其可累及皮肤、关节、肾脏、肺、神经系统、浆膜及其他重要脏器。SLE患者常发生明显的免疫异常，以自身抗体为典型特征。大量证据表明T细胞在驱动B细胞产生自身抗体方面发挥着重要作用。T细胞受体(TCR)是T细胞识别外来抗原的重要分子，TCR基因通过V(D) J重排、N核苷酸随机插入及α、β链的配对而形成有功能的TCR分子，αβT细胞的抗原特异性的基础就是TCRα、β链V区所编码的氨基酸序列。动物模型研究证实，在自身免疫病中，致病性T细胞可限制性取用TCR V基因片段，由于这种限制性取用对自身免疫病的特异性治疗有一定意义，因此，对TCR V基因表达的分析也受到极大关注。此外，抗原受体复合物或共刺激分子诱导的信号转导异常也是导致SLE患者免疫细胞功能异常的原因。 本研究着重分析了活动性SLE患者TCRVβ基因的表达及T细胞的克隆性，并测定了SLE患者外周血淋巴细胞中p38MAPK的水平。 一、运用RT-PCR及Southern印迹技术，对15例活动性SLE患者TCRVβ1-20基因亚家族的表达水平进行了半定量研究，结果显示与正常对照相比，SLE患者Vβ8、Vβ16基因亚家族表达水平明显增高，提示在自身抗原的刺激下TCRVβ基因存在着优势取用。 二、利用RT-PCR和GeneScan技术分析了6例SLE患者外周血淋巴细胞的T细胞克隆性，发现其中2例患者的Vβ产物来自多克隆T细胞，另4例患者的Vβ9、Vβ2、Vβ1、Vβ2产物均来自寡克隆T细胞，表明这种克隆性增殖的T细胞可能是特定的自身抗原所引起的一种特异性应答。 三、应用免疫印迹法检测了14例SLE患者外周血淋巴细胞中p38MAPK水平，其总p38MAPK水平与正常对照相当，但基本上检测不到磷酸化的p38MAPK。证实在SLE患者外周血淋巴细胞中p38MAPK存在功能缺陷。