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供者NK细胞同种反应性与GVHD & GVL的相关性以及CR1期AL自体和异基因造血干细胞移植疗效的比较

王荷花  
【摘要】:【目的】 长期以来,如何在保留GVL,效应的同时尽量减少GVHD的发生以提高白血病患者移植的疗效,一直是异基因造血细胞移植(allo-HSCT)领域的研究重点。最近发现在临床广泛去T细胞HLA单倍体相合亲缘allo-HCT中,GVH方向供者同种反应性NK细胞在发挥GVL效应的同时能够阻止GVHD的发生。本课题进行了以下三方面的研究:第一,检测NK细胞HLA-Ⅰ类分子特异抑制性受体在正常健康供者和白血病患者外周血NK细胞的表达;第二,研究HSCT后重建NK细胞受体的表达和重建NK细胞的杀伤功能;第三,HLA单倍体相合亲缘allo-HSCT中,GVH方向KIR表位不相合组供者NK细胞同种反应性与GVHD GVL的相关性。 【方法】 1.流式细胞仪分析NK细胞HLA-Ⅰ类分子特异性抑制性受体的表达。 2.NK细胞体外培养研究体外NK细胞HLA-Ⅰ类分子特异性抑制性受体的表达。 3.4小时~(51)Cr NK细胞毒性实验。 4.采用特异性序列引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法进行HLA-A、-B、-C和-DR分型。 5.在HLA单倍体相合亲缘allo-HSCT中,采用G-CSF动员供者的外周血或者骨髓干细胞,主要预处理方案为全身照射+环磷酰胺+阿糖胞苷(TBICyAra-c),预防移植物抗宿主病(GVHD)方案为环胞素(CsA)或他克莫司(FK506)联合短疗程甲氨蝶呤(MTX)和IL-2受体单克隆抗体CD25,部分患者加用骁悉(MMF)。 【结果】 1.NK细胞受体KIR2DL1、KIR2DL2/L3、KIR3DL1和CD94/NKG2A在正常健康供者和白血病患者外周血NK细胞表达。 2.allo-HSCT后NK细胞重建迅速,重建NK细胞受体库为供者型,早期KIR


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