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沙利度胺等非经典抗炎药物作用机制研究

王雨娟  
【摘要】:目的 针对皮肤炎症时白细胞与内皮及角质形成细胞间的粘附反应和血管生成过程中几个最基本、最重要的病理生理环节,通过体外模拟,建立相应的药效检测方法,并对已知的“非经典抗炎药物”及线索化合物进行相关药理活性筛选,同时对有关方法进行考核,为进一步探索抗粘附和抗血管生成有关的药效学评价方法及开展该领域新药的研究打下基础。 方法 本研究选择了ICAM-1、VCAM-1、选择素E、IFN-γ、MMP-9和VEGF这几个病理生理环节,采用体外细胞培养、诱导剂诱导、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Northern Blot、双抗夹心ELISA等方法建立实验模型,并应用所建模型检测药物对上述因子表达的影响。所检测的药物包括临床上已知的具有抗炎和抗血管生成活性的代表药物,如沙利度胺(Thd)、氨苯砜(DDS)、消炎痛(IND)、丙酸氯倍他索(CP),以及临床具有抗炎疗效、但药理作用还未弄清的线索化合物雷公藤内酯醇(T_0)和专利化合物ABC。 结果 Ⅰ.RT-PCR结果表明,ECV304细胞中有ICAM-1 mRNA的基础表达,TNF-α或PMA均可上调ECV304细胞中ICAM-1 mRNA的表达,其中PMA的诱导作用呈剂量依赖性,但LPS对ECV304细胞中ICAM-1 mRNA的表达无影响,Northern Blot结果也支持这一结论;Thd作用24h后可以剂量依赖性方式显著抑制TNF-α诱导的ECV304细胞中ICAM-1 mRNA的表达,IC_(50)值为1.572μg/ml,但对PMA诱导者无效;DDS作用48h后可以剂量依赖性方式抑制PMA诱导的ECV304细胞中ICAM-1 mRNA的表达,IC_(50)值为165.959μg/ml,但对TNF-α诱导者无效;IND可以剂量依赖性方式显著上调TNF-α或PMA诱导的ECV304细胞中ICAM-1 mRNA的表达;T_0和CP对TNF-α或PMA诱导的ECV304细胞中ICAM-1 mRNA的表达均无影响;专利化合物ABC对PMA诱导的ECV304细胞中ICAM-1 mRNA的表达无影响。


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