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人肝癌血管内皮细胞相关基因的筛选及功能的初步研究

钟星  
【摘要】:肿瘤血管内皮细胞是肿瘤血管形成的物质基础,也是抗血管治疗最关键的靶细胞。筛选、分离人肿瘤血管内皮细胞的相关基因,研究它们的功能和作用,不仅有利于阐明肿瘤血管形成的机制,而且也将为抗血管治疗肿瘤提供重要的靶位。 肝癌是一种富含血管的肿瘤,选择性抑制或直接杀伤肝癌血管内皮细胞,将为肝癌病人提供一种较现有治疗更为有效、低毒的新的治疗手段。本文采用经鉴定的从新鲜的人肝癌组织中分离、纯化和培养的人肝癌血管内皮细胞,建立了库容为2×10~6pfu的cDNA表达文库。并采用本室改进的异种血清SEREX技术筛选该文库,在国内外首次分离得到18个人肝癌血管内皮细胞相关基因。生物信息学分析表明,其中3个基因是尚未登记的新基因;9个是与肿瘤血管内皮细胞迁移和成管等相关的功能性基因;其余6个基因可能与基因转录、蛋白转运及细胞分裂功能有关。这些结果表明,采用异种功能性抗肿瘤血管内皮细胞的免疫血清筛选肿瘤血管内皮细胞cDNA表达文库,可以获得功能性的血管内皮细胞相关基因。 本文采用RT-PCR、免疫组化和流式细胞技术对本室分离、鉴定的人肝癌血管内皮细胞相关基因HEC252进行了细胞及组织表达谱的研究发现,HEC252基因在人肝癌血管内皮细胞、食管癌血管内皮细胞以及活化的人血管内皮细胞中高表达,在人肝海绵状血管瘤、人皮肤海绵血管瘤、人皮肤蔓状血管瘤等良性血管瘤内皮细胞及多种人正常血管


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