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胰腺癌细胞耐放射性的实验研究

江华  
【摘要】:胰腺癌近年来发病率逐渐增加,目前根治性手术切除仍是其唯一可能治愈的手段,但胰腺癌总手术切除率仅有20%左右,且总体预后不佳;放射治疗是胰腺癌的重要辅助治疗方法,单独或配合化疗有可能提高切除率及改善预后,但是胰腺癌放疗效果的个体差异很大,而且临床实践中也发现其在放疗过程中有耐放射性改变;已经发表的文献和我们实验室的前期实验结果均表明肿瘤细胞内某些基因的表达调控与放射敏感性改变有关;然而,相关文献报道的结果并不明确和一致,甚至对某一基因调控细胞功能的作用认识完全相反,而且对一些相关基因的表达情况与胰腺癌放射敏感性的关系也不十分明确。 随着人类基因组计划全部核苷酸测序的完成,基因芯片技术已经可以对大量的人类遗传信息进行高效、快速的检测。而离体培养胰腺癌细胞株的放射生物学实验,可以获得胰腺癌细胞体外放射生物学参数,比较不同胰腺癌细胞株之间的放射敏感性差异,了解胰腺癌细胞在放射线照射前后生长状态的改变,并进行细胞分子生物学水平的分析研究,有助于我们进一步阐明放射线作用于胰腺癌细胞造成细胞功能改变的机制,从而为胰腺癌临床放射治疗的个体化方案提供实验基础,因此本研究进行了以下几方面的工作。 1.为了阐明胰腺癌放疗过程中放射敏感性改变的机制,模拟临床对病人的放射治疗过程,应用直线加速器对SW1990、Cap、ASPC、MIA、PAN-1及P3等六株人胰腺癌细胞株进行反复的X线照射,剂量辅以个体化的梯度增加,放射诱导初始剂量从单次照射2~4Gy开始,逐渐分别增加至单次剂量5~15Gy,总剂量39~297Gy,诱导时间6~24月,诱导并建立人胰腺癌耐放射细胞株,并在诱导末期进行相关的放射生物学检测。 2.应用U133芯片对接受放射剂量最多,诱导时间最长的人胰腺癌耐放射株SW1990-R进行差异表达基因的研究,初步筛选出放射诱导前后有明显差异表达的耐放射相关基因;分析筛选的结果,我们发现金属硫蛋白(metallothionein MT)基因的表达水平可能与胰腺癌细胞的耐放射性密切相关。为验证其结果,采用外源性锌离


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