收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

ASH2L及其相互作用蛋白DPY-30-like的功能研究

彭勇  
【摘要】:TrxG家族和PcG家族是染色质水平调控中起重要作用的基因家族。该两个家族多个成员通过对组蛋白进行共价修饰,打开或者关闭某些区域染色质结构,从而在染色质水平上进行表达调控,此为表观遗传调控(Epigenetic developmental control)的重要内容。在前期研究中,本研究组鉴定得到一个新的具有PHD结构域的TrxG家族基因ASH2L(Absem small homeotic 2 like)。研究发现,该基因在造血组织及多种白血病来源的细胞系中高表达,并在K562所代表的白细胞分化阶段起重要作用。但目前尚不清楚人ASH2L功能的具体机制及细节。 我们拟通过酵母双杂交技术寻找与ASH2L相互作用蛋白,以提示其功能线索。通过酵母双杂筛选HeLa细胞cDNA文库,得到与ASH2L相互作用蛋白的基因,即低等生物X染色体剂量补偿机制(X Chromosome dosage compensation)中DPY-30的同源基因,DPY-30-like。进一步通过蛋白质体外亲和实验(Pulldown)、免疫共沉淀(CoIP)和哺乳细胞免疫荧光共聚焦实验(Confocal)对ASH2L/DPY-30-like之间的相互作用进行了验证。结果确证了二者之间的相互作用是真实存在的。 为了解ASH2L/DPY-30-like相互作用的细节,我们对ASH2L基因以及DPY-30-like基因进行了分段原核表达。主要针对ASH2L上两个结构域(PHD和SPRY)以及DPY-30-1ike上的Dpy-30 motif对其进行划分。用分段表达的蛋白进行体外亲和实验表明,其相互作用均发生于两种蛋白的C-端区域,且与ASH2L上的PHD结构域无关。 低等生物如酵母的SET1蛋白复合体中,有两个成员分别包含了PHD和SPRY结构域,而在高等生物如果蝇中,该两个基因融合成一个基因即Ash2,而ASH2L正是Ash2的同源基因。同时研究已经明确了人SET1复合体的三个重要成员,其中均包括ASH2L。由于ASH2L和DPY-30-like的相互作用,由此可推测DPY-30-like可能是该复合体的一个新成员。为证明ASH2L所在复合体的甲基化酶活性能,我们通过免疫沉淀捕获核抽提物中的ASH2L及其相互作用蛋白,并检测了其H3-K4甲基化酶活性,结果证明ASH2L所在复合体确实存在该酶活性。为进一步证明ASH2L/DPY-30-like复合体在体内的活性,我们同时实施了ChIP实验,证明该ASH2L/DPY-30-like所在复合体确实能对靶基因进行H3-κ4的甲基化修饰。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 樊勇;;应用PCR-RFLP鉴别印度的主要传疟媒介库态按蚊复合体[J];国外医学.寄生虫病分册;2005年06期
2 雍世鹏;;西辽河南部植被複合体分类的原则[J];内蒙古大学学报(自然科学版);1964年01期
3 祝廷成;赵毓棠;;东北草原上的植被复合体[J];植物生态学与地植物学丛刊;1963年Z1期
4 王维光,赵贤端,孙炳荣;一个具有光系统Ⅱ活力的色素——蛋白人工复合体[J];自然杂志;1979年03期
5 汤凤林;复合体基本知识 第一讲 复合体的应用及其性能[J];煤田地质与勘探;1983年05期
6 郭崇洁;杨进;韩秀兰;;几种哺乳动物神经胰岛复合体的组织学观察[J];首都医科大学学报;1986年03期
7 何忠效;DNA甲基化作用和基因功能[J];微生物学通报;1985年02期
8 霍妍丽;线粒体呼吸链膜蛋白复合体Ⅱ的三维结构解析[J];中国基础科学;2005年04期
9 曹天君;尹素英;许敖敖;;耀斑活动区的“准复合体”分布[J];天文学报;1980年04期
10 林治焕,叶京京;线粒体H~+—ATP酶复合体中脂对F_1结构和功能的作用[J];科学通报;1985年16期
11 卢汀;孟延发;刘倩;;蛋白-蛋白相互作用——复合体与共享组成物[J];生命科学研究;2007年S1期
12 张丽;戴勇;;组蛋白赖氨酸甲基化与去甲基化[J];医学分子生物学杂志;2008年03期
13 郑杰;;组蛋白赖氨酸甲基化修饰与肿瘤[J];生命科学;2008年03期
14 戴鸿佐 ,淳于娳娟;豚鼠下脚复合体传入纤维的研究[J];复旦学报(自然科学版);1983年02期
15 郭尧君,林治焕,张瑛,刘一奾;不同醇对猪心线粒体F_1-ATPase和H~+-ATPase复合体构象的影响——圆二色性光谱研究[J];光谱学与光谱分析;1985年06期
16 楼永明;顾秉林;熊家炯;高乃飞;;Fe中杂质-空位复合体的研究[J];金属学报;1987年03期
17 陈鹏;叶辉;;橘小实蝇复合体分类学研究进展[J];昆虫知识;2007年01期
18 刘成汉;四川鱼类区系的研究[J];四川大学学报(自然科学版);1964年02期
19 汪策;;不依赖C3的免疫溶血:攻膜复合体形成机制[J];医学分子生物学杂志;1987年05期
20 金京波;;拟南芥植物特异性组蛋白H3K4去甲基化酶抑制开花[J];农业生物技术学报;2010年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吴文慧;彭伟;李晶晶;;Dyractflow流动复合体窝沟釉质成形封闭术后随访3年临床效果评价[A];河北省煤炭工业科学技术工作会议论文集[C];2006年
2 朱孝峰;刘宗潮;潘启超;谢冰芬;冯公侃;;绿茶提取物对肿瘤细胞DNA引物酶-多聚酶α复合体活性的影响[A];'98上海茶与抗癌学术研讨会论文集[C];1998年
3 李明;徐荣明;冯建翔;阮永平;马维虎;;骶髂复合体及髂螺钉内固定的生物力学研究进展[A];2004年浙江省骨科学术会议论文汇编[C];2004年
4 陈维善;徐建桥;;后柱韧带复合损伤等级评价研究[A];2005年浙江省骨科学术会议论文汇编[C];2005年
5 李明;徐荣明;校佰平;毛伟民;王国平;周龙;夏华杰;;骶髂复合体损伤内固定的后路手术策略[A];浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十二次学术年会、杭州市中医药协会骨伤科专业委员会第一次学术年会暨继续教育学习班论文汇编[C];2006年
6 付宏刚;;一维TiO_2组装染料敏化太阳能电池光阳极的光电化学特性[A];中国化学会第27届学术年会第05分会场摘要集[C];2010年
7 甘海华;范秀丹;;不同肥力红壤复合无定形氧化铁铝特征及其对磷的吸附(摘要)[A];中国地壤学会第十次全国会员代表大会暨第五届海峡两岸土壤肥料学术交流研讨会文集(面向农业与环境的土壤科学专题篇)[C];2004年
8 隋春;燕照玲;张彦威;范在丰;李怀方;;烟草放氧复合体亚基蛋白基因的克隆和序列分析[A];中国植物病理学会2005年学术年会暨植物病理学报创刊50周年纪念会论文摘要集[C];2005年
9 徐荣明;李明;;骶髂关节复合体外科稳定方式进展[A];2007年浙江省医学会骨科学学术会议暨浙江省抗癌协会骨软肿瘤学术会议论文汇编[C];2007年
10 任龙喜;王渊;;重建颈后方韧带复合体单、双开门颈椎板成形术后生物力学的比较研究[A];第八届全国脊柱脊髓损伤学术会议论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 彭勇;ASH2L及其相互作用蛋白DPY-30-like的功能研究[D];中国协和医科大学;2005年
2 王波;低剂量镉对肝脏组织远期影响的实验研究[D];吉林大学;2012年
3 宋玉光;启动子DNA甲基化在调控拟南芥离体苗再生中的作用研究[D];山东大学;2012年
4 李静;H3K4二甲基化修饰结合蛋白的鉴定及其功能研究[D];华东师范大学;2011年
5 胡鑫;LSD1表观遗传修饰对TAL1功能和机体造血调控机制的研究[D];吉林大学;2009年
6 孟春风;胃癌细胞系中组蛋白修饰与肿瘤相关基因沉默的关系[D];中国医科大学;2008年
7 周永宁;E-cadherin-catenin复合体表达与胃癌生物学行为的相关研究[D];第三军医大学;2003年
8 陈振萍;DNA甲基化在ITP发病机制中的初步研究[D];中国协和医科大学;2008年
9 丁滪;人红细胞膜上以带3蛋白为核心的蛋白质复合体研究[D];复旦大学;2005年
10 邱湘宁;DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷和5-氮杂-2'-脱氧胞苷对编码和非编码RNA表达的影响[D];中南大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 关文月;细胞特异性的DNMT1甲基化修饰对其稳定性的调控[D];华东师范大学;2012年
2 苏婧;基于金纳米颗粒和发夹型核酸探针电化学检测DNA甲基化酶[D];湖南大学;2012年
3 潘海韵;玉米尿卟啉原甲基化酶的不同片段表达、纯化及性质的初步研究[D];安徽农业大学;2004年
4 王研;纺锤体相关蛋白spindlin1与甲基化组蛋白复合物的结构研究[D];内蒙古农业大学;2011年
5 刘恩东;军工复合体与冷战后美国的外交政策[D];中共中央党校;2003年
6 高平挥;白念珠菌野生型CYP51及H310D、T311A突变型CYP51的克隆、表达及活性初步测定[D];第二军医大学;2001年
7 孔帅;城市化背景下的商住复合体研究[D];昆明理工大学;2010年
8 朱伟江;重掺锑直拉硅单晶的氧沉淀行为[D];浙江大学;2010年
9 刘泽言;去甲基化酶FBXL10通过抑制FOXC1促进乳腺癌增殖[D];东北师范大学;2010年
10 闻建军;超高层筒中筒结构上下部共同作用分析研究[D];西安理工大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 东台市三仓镇小学 崔小春;“80后”教师,优缺点共存的复合体[N];成才导报.教育周刊;2007年
2 记者 刘晓娟;万晟·现代城打造新型城市复合体[N];吉林日报;2008年
3 贾燕飞;如何发现和治疗骶髂关节复合体损伤?[N];内蒙古日报(汉);2006年
4 见习记者 陈玺撼;校社携手力推“复合体”创业[N];解放日报;2008年
5 杨晴川;恶狱似镜,照得美国自负的脸上疤痕闪烁[N];新华每日电讯;2004年
6 朱深银;G蛋白偶联受体信号体的组装 Modular Assembly of G-protein Couple Receptor Signalosome[N];中国医药报;2006年
7 陆志城;美卡舍明-林菲培注射剂:治疗严重原发性IGF-1缺乏患儿[N];医药经济报;2006年
8 田学科;以科学家缉拿到致癌“从犯”[N];科技日报;2005年
9 记者 王光荣;我科学家解析出与呼吸相关的膜蛋白复合体三维结构[N];光明日报;2005年
10 刘晓娟;万晟·现代城构筑超值空间[N];吉林日报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978