收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

固有免疫系统在铜绿假单胞菌肺部感染中的作用

王丹丹  
【摘要】: 背景与目的: 铜绿假单胞菌肺部感染是医院感染死亡的主要原因之一。作为机会致病菌,铜绿假单胞菌可以根据环境改变自身基因表达,具有极强的适应能力和适时多变的毒力,通过与宿主免疫系统相互作用、相互调节共同决定着感染的结局。肺固有免疫系统在铜绿假单胞菌感染中起着重要作用,对其机制的深入研究对临床工作有指导意义。为此,本文拟从分子水平、细胞水平、器官水平研究不同状态下同一株铜绿假单胞菌引起感染时宿主固有免疫系统(TLRs和NOD2)的变化和功能,为临床诊断和治疗提供理论依据。 方法: 1、本研究采用铜绿假单胞菌ATCC 27853通过LB液体培养基培养法和体外改良平板培养法分别建立浮游菌和生物被膜菌。分别用这两种状态下的菌株作用于人呼吸道上皮细胞株A549、HBE,构建体外感染模型。采用RT-PCR和Western blot方法检测TLR2、TLR4、TLR5和NOD2的表达、ELISA法检测细胞上清中IL-6、IL-8水平,应用Western blot方法测定浮游菌感染模型中TRAF6、NF-κB蛋白表达量。 2、采用分别处于上述两种状态的菌株建立大鼠铜绿假单胞菌肺部感染模型,按随机原则将66只SD大鼠分为对照组、浮游菌感染组、生物被膜菌感染组。分别于浮游菌感染组建模后4h、1d、3d,生物被膜菌感染组建模后4h、7d、14d采集标本,进行肺组织病理形态学观察,采用RT-PCR、Western blot法检测肺组织TLR2、TLR4、TLR5和NOD2的表达。 3、浮游菌作用A549细胞4h后,提取细胞上清中的分泌蛋白进行双向凝胶电泳,寻找表达差异显著的蛋白点进行质谱鉴定。 结果: 1、体外感染模型中,TLR2的表达无明显差异(P>0.05);TLR4在浮游菌和被膜菌感染4h组表达上调(P<0.05),TLR5mRNA水平在浮游菌作用的15min即发生明显上调,至作用30min组升至最高点,随后有下降趋势(P<0.05);TRAF6和NF-κB与TLR5的表达情况基本一致。IL-6、IL-8水平随着作用时间的延长逐渐上调(P<0.05)。 2、动物感染模型中,浮游菌感染组和被膜菌感染组的病理变化差异明显。浮游菌感染组中,TLR2的表达无明显差异(P>0.05);TLR4的表达在3d组中上调(P<0.05);TLR5水平在4h组显著增高以后逐渐下调(P<0.05);NOD2的表达在4h组上调后恢复正常(P<0.05)。生物被膜菌感染组中,TLR2、TLR5、NOD2的表达逐渐增高(P<0.05),TLR4的表达在d14组明显增高(P<0.05)。 3、获得了分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,取对照组和浮游菌处理组中表达差异显著的蛋白质点进行肽质指纹分析,经数据库查询,表达差异显著的蛋白可能为Notchless protein homolog 1,其功能尚未阐明。 结论: 1、处于不同状态下的同一菌株引起感染的病程和结局不同,铜绿假单胞菌根据外环境调节自身状态在机会感染中有重要意义 2、不是TLR2/TLR4而是鞭毛蛋白结合TLR5介导的MyD88/TRAF6/NF-κB信号通路在铜绿假单胞菌感染初始阶段起主要作用 3、在铜绿假单胞菌慢性感染中肺固有免疫系统被充分激活


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 李红星;李东东;陈颖;杜浩淼;赵东敏;;艾滋病合并肺部感染病例实验室结果分析[J];中国卫生检验杂志;2011年08期
2 史会平;张勇;何东初;;26例肾移植术后并发肺部感染的治疗体会[J];中外医疗;2011年18期
3 刘菁菁;李旭波;张弦;田琼;许建中;;中药治疗肺部耐药菌感染的新方法——附2例报道[J];中国病案;2011年08期
4 齐玉琴;伏杭江;陈雪松;张兴虎;万文辉;刘玉亭;;高龄患者肺部感染致多器官功能不全综合征的临床分析[J];中华保健医学杂志;2011年03期
5 谭秦湘;周明强;;80例肺癌患者伴肺部感染的痰培养与药敏试验结果分析[J];中国当代医药;2011年21期
6 孙洪义;;老年煤工尘肺肺心病肺部感染及对空腹血糖影响106例临床分析[J];中国医药指南;2011年22期
7 洪攀;陆明钢;;恶性血液病并发肺部感染的病原菌构成及耐药性变迁[J];中国药房;2011年30期
8 刘康海;;老年人肺部感染痰培养结果及病原菌药敏分析[J];临床和实验医学杂志;2011年13期
9 李宇;吴柳青;黄日胜;;老年患者全身麻醉腹部手术后并发肺部感染的临床研究[J];中华医院感染学杂志;2011年12期
10 王赛;曾亚;;肝硬化合并肺部感染的危险因素病例对照分析[J];实用预防医学;2011年06期
11 刘福;李岸英;;36株铜绿假单胞菌耐药状况分析[J];中国医疗前沿;2011年11期
12 刘易林;许浩;罗运山;;雾化吸入妥布霉素联合静脉使用抗生素治疗多重耐药菌肺炎的研究[J];中国现代药物应用;2011年10期
13 王子玲;刘新;李慧娟;;肺结核合并院内肺部细菌感染的临床特征[J];临床肺科杂志;2011年08期
14 王晋舜;;肺结核合并肺部感染270例病原学分类及分析[J];中国误诊学杂志;2011年24期
15 刘爱华;;体外振动排痰机在神经外科重症患者预防肺部感染中的应用[J];中国实用神经疾病杂志;2011年14期
16 王海燕;;气管切开术后并发肺部感染的护理[J];内蒙古中医药;2011年16期
17 李莉;;72例老年性肺部感染临床分析[J];吉林医学;2011年22期
18 杨玺;;糖尿病合并肺部感染的病因及临床表现[J];中国社区医师;2011年26期
19 高烨平;;糖尿病合并肺部感染的治疗[J];中国社区医师;2011年26期
20 姚骏;;老年慢阻肺肺部感染115例临床分析[J];贵州医药;2011年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 殷少军;何礼贤;瞿介明;欧周罗;胡必杰;王葆青;陈雪华;;免疫受损宿主铜绿假单胞菌肺部感染时趋化因子基因表达研究[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
2 罗莉;张明周;刘双林;杨丽;李琦;王长征;;呼吸重症监护病房铜绿假单胞菌肺部感染对治疗及预后的影响研究[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
3 周天恩;何志捷;邓义军;黄子通;蒋龙元;;ICU铜绿假单胞菌感染的药物敏感监测[A];中华医学会急诊医学分会第十次全国复苏中毒学术论文交流会论文汇编[C];2004年
4 孔晋亮;王恒壮;陈海荣;蔡双启;宋志军;刘晓岚;陈一强;王立赞;;铜绿假单胞菌QS系统缺陷对生物膜形成及大鼠肺部慢性感染的影响[A];中华医学会第11届全国内科学术会议论文汇编[C];2007年
5 陈亚红;姚婉贞;刘振英;张晓伟;;2000至2005年耐亚胺培南铜绿假单胞菌的变迁及耐药性[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年
6 张丽霞;张立;杜佰风;冯爽;;162株铜绿假单胞菌的耐药性分析[A];中华医学会第11届全国内科学术会议论文汇编[C];2007年
7 唐爱琴;王小娜;范玲玲;;86株铜绿假单胞菌耐药性分析[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
8 沈继录;朱德妹;;耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌多药外排泵机制研究[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
9 何晓锋;曹晋桂;张虎;马文杰;吴镝;焦力群;王敏;方鉴;;铜绿假单胞菌的耐药性变化及其DNA多态性分析[A];中国医院协会第十五届全国医院感染管理学术年会资料汇编[C];2008年
10 窦懿;;烧伤病房11年抗菌药物使用与铜绿假单胞菌耐药率变化[A];全国烧伤早期处理专题研讨会论文集[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐西琳;表达IL-17的正义质粒对小鼠铜绿假单胞菌肺部感染防御机制的研究[D];华中科技大学;2011年
2 王炜芳;密度感知信号系统在铜绿假单胞菌致大鼠肺部感染中的作用[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
3 陈林;铜绿假单胞菌内在耐药性相关基因的筛选及研究[D];西北大学;2010年
4 陈一强;绿原酸对铜绿假单胞菌生物膜抑制作用及其机制的体内外研究[D];广西医科大学;2010年
5 王杰;中国部分地区碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌耐药机制及分子流行病学研究[D];浙江大学;2011年
6 俞莺;常压低温等离子体对小鼠伤口定植绿脓杆菌的作用研究[D];华中科技大学;2011年
7 陈媛媛;粘附分子MAdCAM-1/VCAM-1在奶牛乳腺炎作用中的初步研究[D];吉林大学;2012年
8 王丹丹;固有免疫系统在铜绿假单胞菌肺部感染中的作用[D];中国协和医科大学;2007年
9 王平;铜绿假单胞菌临床分离株致病特征及Quorum Sensing系统调控机制研究[D];华中科技大学;2010年
10 魏殿军;临床分离菌株耐药性分析及铜绿假单胞菌耐药机制的探讨[D];天津医科大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 魏志华;多药耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM主动外排系统的耐药作用及其调控基因mexR的突变情况[D];安徽医科大学;2010年
2 李良;铜绿假单胞菌主动外排系统MexAB-OprM与碳青霉烯类药物耐药的关系研究[D];山西医科大学;2011年
3 刘加彤;ICU耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性及危险因素分析[D];南京医科大学;2011年
4 林丽华;大蒜素对铜绿假单胞菌生物被膜的干预作用及机制初步研究[D];重庆医科大学;2009年
5 段佳丽;铜绿假单胞菌中影响RsmA调节基因的筛选及调节途径研究[D];西北大学;2011年
6 汪浙炯;PhoQ/PhoP与外膜蛋白OprH在铜绿假单胞菌对氨基糖甙类抗生素耐药性中的相互关系和作用机制[D];浙江大学;2011年
7 曾祥萍;AL-1单用及联合用药对铜绿假单胞菌生物膜形成的抑制作用及其作用机理研究[D];暨南大学;2011年
8 郭生玉;铜绿假单胞菌生物被膜肺感染模型的建立及抗生素干预的研究[D];中国医科大学;2002年
9 闫萍;大鼠铜绿假单胞菌慢性肺部感染生物膜的致病作用研究[D];广西医科大学;2004年
10 吴雷;医院感染铜绿假单胞菌肺炎细菌耐药性及预后分析[D];南方医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李曙平;铜绿假单胞菌 老年病房的主要致病菌[N];中国中医药报;2003年
2 谢欣;肺部感染已成祸害[N];大众卫生报;2002年
3 记者 孙昌林 通讯员 项振雄;肺部感染早日康复[N];健康报;2001年
4 ;老人中风为何易并发肺部感染[N];医药养生保健报;2006年
5 特约记者 崔玉艳;天冷老年人要防肺部感染[N];卫生与生活报;2008年
6 宁在兰;中年人为何易患肺部感染[N];保健时报;2004年
7 南京日报记者 倪秀萍;六成艾滋病人死于肺部感染[N];南京日报;2005年
8 王振岭;铜绿假单胞菌耐药问题严重[N];中国医药报;2002年
9 湖北省监利县第二人民医院副主任医师 吴秋方;诊病不妨用点儿哲学思维[N];健康报;2009年
10 魏开敏;术后预防肺部感染[N];大众卫生报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978