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重组人瘦素对慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者骨髓巨核细胞的影响

王晓燕  
【摘要】: 第一部分重组人瘦素对慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者骨髓巨核细胞的影响 研究背景及目的ITP(Idiopathic Thrombocytopenic Purpura)是一种慢性获得性自身免疫性疾病,其特点是患者体内产生抗血小板抗体,导致网状内皮系统破坏自身血小板。ITP的发病机制复杂,一般认为其发病机理主要为免疫因素导致血小板破坏过多,但血小板生成还与巨核细胞的正常凋亡密切相关,对于疾病过程中巨核细胞及其造血功能改变的研究尚不足。瘦素是一种对造血及免疫细胞发挥重要作用的因子,CITP患者血清瘦素水平升高,与血小板计数呈负相关,与血小板相关抗体IgG呈正相关,本研究旨在明确瘦素对CITP骨髓巨核细胞是否有影响。 方法以急性巨核细胞白血病细胞株MO7e和CITP骨髓CD34~+细胞经诱导分化的巨核细胞为研究对象。运用RT-PCR检测MO7e细胞瘦素受体mRNA表达,运用Brdu-ELISA法检测瘦素对MO7e细胞的增殖作用,运用Annexin V/PI双标流式检测瘦素对MO7e细胞的凋亡作用。经TPO、SCF诱导磁珠分选后获得的CITP骨髓CD34~+细胞分化为巨核细胞,运用流式测定瘦素对其分化过程中CD41a~+、CD61~+的表达以及CD41a~+细胞的凋亡是否有影响。 结果瘦素受体长型Ob-RL和短型Ob-RS在MO7e细胞均有mRNA表达。瘦素对MO7e细胞的增殖有促进作用,并呈现一定的剂量依赖性,浓度为5ng/ml即显示出促增殖效应(p=0.037),但浓度在5、10、25ng/ml之间无明显统计学差异,浓度为100ng/ml时其增殖效应最大。在时间依赖效应上,瘦素作用48h,其细胞增殖明显高于24h,而作用72h其细胞增殖介于两者之间(p=0.000)。瘦素对MO7e细胞具有抑制凋亡作用(p=0.001),而且在作用72小时后凋亡率最高。瘦素对骨髓CD34~+细胞分化为巨核细胞过程中CD41~+'、CD61~+表达的影响,与不加瘦素组相比无明显统计学差异(p>0.05)。对CD41a~+细胞凋亡的影响与不加瘦素组相比亦无明显统计学差异(p>0.05)。 结论瘦素通过促进MO7e细胞的增殖,抑制其凋亡来参与巨核细胞白血病的发生、发展。瘦素在TPO+SCF诱导CITP骨髓巨核细胞分化中无明显协同作用,对分化产生CD41a~+巨核细胞的凋亡亦无明显作用。 第二部分出血分级在特发性血小板减少性紫癜患者中的临床意义 目的探讨出血分级在特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的临床意义。 方法@采用自拟ITP出血分级标准对225例ITP患者进行出血分级,采用双变量分析出血分级与PLT计数及疗效的关系。 结果ITP最常见的出血部位为皮肤,致命性内出血少见。出血分级与PLT计数呈负相关,与疗效呈正相关,但相关关系不密切。 结论ITP患者的出血危险与PLT计数不成绝对反比,临床出血程度较PLT计数更重要:对ITP患者进行出血分级有助于监测出血,选择治疗策略,预测疗效。


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