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新的卵巢上皮性癌蛋白标志物的初步研究

姚洪文  
【摘要】: 背景与目的:卵巢上皮性癌死亡率位居女性恶性生殖道肿瘤第一位。由于卵巢位置深在盆腔,该疾病早期症状不典型或无明显症状,这就使得卵巢上皮性癌的早期诊断率不高,预后较差,因此需要寻找新的卵巢上皮性癌生物标志物以辅助诊断。 材料和方法:收集6例卵巢上皮性癌患者的肿瘤组织和正常卵巢组织,采用上皮细胞专用无血清培养基进行体外原代培养,收集其条件培养基。条件培养基所含总蛋白经过透析浓缩除盐后,以10%聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,随后进行质谱分析,以此构建卵巢癌上皮性癌相关游离蛋白数据库。对数据库中蛋白利用DAVID Bioinformatics Resources(http://david.abcc.ncifcrf.gov/home.jsp)进行生物信息学分析。 结果:共鉴定出1413个非冗余蛋白,其中仅在正常卵巢组织条件培养基鉴定出的蛋白358个,仅在卵巢癌组织特异鉴定出的蛋白555个。通过对蛋白数据库进行生物信息学分析发现:条件培养基中分泌和/或细胞外基质蛋白占20%以上。进一步对差异蛋白的基因功能聚类研究表明,在正常卵巢组织条件培养基中鉴定出的蛋白以分泌蛋白为主,主要参与丝氨酸蛋白酶抑制剂和免疫应答等功能过程。而在卵巢上皮性癌组织条件培养基中鉴定出的蛋白则主要以细胞质和细胞骨架蛋白为主,参与细胞粘附、疾病相关以及分子伴侣的功能。 结论:此体外原代培养体系的条件培养基中富集到了细胞分泌蛋白,为寻找血液中新的卵巢癌蛋白标志物、协助卵巢癌早期诊断和治疗提供了新的研究线索。


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