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血片法中孕期唐氏综合症筛查的初步研究

刘娜  
【摘要】:目的 1.探讨血片法唐氏综合征(DS)筛查的可行性,并对其行方法学的初步评价。 2.比较血片法及血清法检测的精确度和相关性,选择合适的中孕期DS筛查方案以开展血片法的大规模临床应用。 3.获取实验人群生化指标的孕周特异性血片法中位数值,并初步探讨血片法中孕期DS筛查风险的计算及筛查体系的建立。 方法 (1)2008年12月至2009年4月间,分别在北京协和医院产科门诊及海淀妇幼保健院产前筛查中心,收集符合入组及排除条件的孕妇末梢血及血清样本共503例,登记相关临床信息。 (2)血片法技术路线的探索。研究血片洗脱、打孔及温度稳定性等。 (3)选取其中的106例标本,分别行血清学与血片法AFP、Total HCG、uE3FreeβHCG检测,对血片法进行方法学评价的同时,比较血片法与血清学方法的相关性。 (4)临床应用研究部分,在孕妇临床进行血清学DS三联筛查的同时,应用血片法AFP+FreeβHCG筛查方案完成对全部503份末梢血样本的检测,并获取实验人群生化指标的孕周特异性血片法中位数值。将检测值和孕妇信息输入风险计算软件得孕妇MoM值和风险值,将筛查结果与血清学方法对比,初步探讨血片法中孕期DS筛查的有效性。 (5)妊娠结局的随访。 结果 1.血片慢速震荡洗脱1h、2h、4h及16h时,AFP及FreeβHCG测量值与4℃过夜洗脱测量值无显著差异。 2.血片中心及中心-边缘交界处AFP测量值无显著差异,而边缘处AFP测量值高于前两者,差异有统计学意义。血片中心、中心-边缘交界处及边缘处FreeβHCG测量值均有显著差异,其中边缘处FreeβHCG测量值最高,血片中心处最低。 3.AFP血片4℃、室温(约25℃)及-20℃下均可保存28天,差异无统计学意义,而在35℃下最长可以保存12天。Free-βHCG血片室温下可保存6天,35℃下最长可以保存3天,差异无统计学意义。 4.血片法方法学初步评价中,AFP、Total HCG、uE3及FreeβHCG检测的组内差异分别为6.35-7.71%、6.2-12.4%、9.29-16.35%及6.4-9.99%;组间差异分别为13.51-22.6%、6.38-37.88%、26.28-32.6%及9.44-15.23%。四种标记物检测的重吸收率分别为85.82-104.39、74.47-104.11%、70.15-143.1%、87.6-113.51%。 5.AFP、Total HCG、uE3及FreeβHCG血片法检测与血清法比较研究,AFP检测相关系数R=0.93,线性回归方程为Y=0.024+0.492X;Total HCG检测相关系数R=0.691,线性回归方程Y=5.17+0.688X;uE3检测相关系数R=0.863,线性回归方程Y=1.471+0.844X;FreeβHCG检测相关系数R=0.974,线性回归方程为Y=3.804+0.931X。 6.末梢血片及静脉血片AFP测量值密切相关,相关系数为0.877;FreeβHCG的末梢血片及静脉血片测量值相关系数为0.901。两者末梢血片及静脉血片测量值经T检验差异均无统计学意义(P>0.05)。 7.血片法和血清法共用L ifecycle软件的两个方案:血片法测量值的直接拟合转换为血清学测量值,通过Lifecycle软件计算风险值,共筛查出DS高危者10例;或根据各孕周病例血片法测量值直接获得各孕周中位数值,校正后通过Lifecycle软件界和孕妇临床信息计算风险值,共筛查出DS高危者42例。 结论 1.血片慢速震荡洗脱1h与4℃过夜洗脱效果无显著差异。 2.打孔位置不同对血片测量值有影响,边缘处高于血片中心。 3.AFP+FreeβHCG血片在室温下最长可保存6天,而在35℃保存不超过3天为宜。 4.血片法AFP及FreeβHCG检测在精密度、准确性、与血清学方法相关性等方面均优于血片法Total HCG和uE3检测。 5.血片法AFP、Total HCG、uE3及FreeβHCG检测均与血清学方法有较好相关性。 6.AFP+FreeβHCG血片TRAFIA检测的灵敏度分别为1.51u/ml、0.65ng/ml。 7.静脉血片及末梢血片测量值无显著差异。 8.利用血片法测量值的直接拟合转换为血清学测量值模型,共筛查出DS高危者10例;利用本研究获得的各孕周血片法中位数值,通过Lifecycle软件共筛查出DS高危者42例。


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