收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

人4-1BBL/抗CD20融合蛋白增强抗CD3/抗CD20双功能抗体的细胞毒作用及其机制研究

刘荣  
【摘要】: 目前,①常规的放、化疗方案选择性较差;②肿瘤细胞产生耐药性;③肿瘤发生微小转移是困扰肿瘤的临床治疗三大难题,双功能抗体或融合蛋白因其具有同时与肿瘤相关抗原和免疫效应细胞表面分子标记结合,并能有效地使效应细胞靶向杀灭肿瘤细胞的作用而倍受关注,最有希望成为解决这些问题的一条新途径。 在抗肿瘤免疫反应中,细胞介导的免疫反应起着重要作用。肿瘤免疫治疗的目标就是产生肿瘤特异性的具有长期持续性杀伤活性的激活的CD8+T细胞。初始T细胞的完全激活需要双重信号刺激,即T细胞受体与抗原肽-MHC分子复合物结合的第一信号,又必须有T细胞和抗原提呈细胞表面多种共刺激分子相互作用提供的共刺激信号即第二信号。T细胞激活诱导阶段若缺乏共刺激信号,会引起T细胞通过活化诱导的细胞死亡途径凋亡和克隆特异性无反应性,进而导致抗肿瘤免疫功能低下,而通过低表达共刺激分子降低免疫原性,使得识别它的抗原提呈细胞或淋巴细胞得不到充分的活化信号,是肿瘤细胞免疫逃逸的重要机制之一,临床实践中,这类肿瘤的治疗效果和预后不佳。共刺激信号途径在T细胞的活化和增殖过程中起着重要作用。CD28/B7分子是研究最多的协同刺激分子,认为是初始T细胞激活发生最主要的机制,然而,近来研究的4-1BB/4-1BBL是TNFR/TNF配体家族的成员,它们分别表达在T细胞和抗原提呈细胞上,被确定有助于扩增和多元化T细胞反应,深入增强和延伸T细胞激活的功能,许多动物实验表明干预4-1BB/4-1BBL共刺激途径可调节T细胞和抗原呈递细胞的功能产生抗肿瘤免疫作用,为肿瘤的免疫治疗提供了新的靶点。 CD20主要表达在前B细胞和成熟B细胞及95%以上的NHL淋巴瘤细胞,是可以用来作为肿瘤定向免疫治疗的抗原。为了特异性定向肿瘤细胞和激活肿瘤特异性T细胞,抗肿瘤免疫性能够被诱导和恢复,利用双特异抗体针对肿瘤相关抗原与效应细胞相连,共同作用于肿瘤细胞,实现肿瘤的靶向治疗,我们已成功构建了抗CD3/抗CD20的diabody表达载体和人4-1BBL胞外区基因表达载体pAYZ4-1BBL并进行了体内外生物活性测定,前者有的抑制肿瘤生长的活性而后者则能抑制激活的T细胞凋亡,增强基于PBL的抗肿瘤效应。然而全身性的T细胞激活将导致不需要的临床副作用,应用4-1BBL和CD3单克隆抗体可代替专职抗原提呈细胞的刺激能力,因此基于4-1BBL和CD3双信号所必须严格定位在肿瘤位点,本实验在此基础上构建了人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白,获得可溶性表达在2-3mg/l,流式间接免疫荧光实验及玫瑰花环实验均证实了人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白具有与CD20+的Raji细胞和4-1BB+的Jurkat细胞结合活性。研究结果表明人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白能增强抗CD3/抗CD20 diabody介导PBLs对靶细胞Raji细胞的杀伤作用,其机制是上调抗凋亡相关基因bcl-xL和bfl-1mRNA的表达,促进淋巴细胞增殖,减少细胞死亡,促进IL-2分泌及上调穿孔素和颗粒酶mRNA表达,更有效导致PBLs杀伤肿瘤细胞。应用裸鼠移植瘤模型也表明联合应用人4-1BBL/CD20融合蛋白和抗CD20diabody能明显抑制肿瘤生长,这充分说明基于4-1BBL和CD3双信号作用能更有效地激发PBLs的活性,从而清除肿瘤。 因此,人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白作为一种靶向性免疫调节融合蛋白,能够调节PBL的活化程度,进而增强基于PBL的靶向性的抗肿瘤治疗的效果,是一个有望用于B细胞恶性肿瘤临床治疗的特异性融合蛋白。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 柳刚,赵彤,周新华,朱梅刚;B细胞特异性激活蛋白与CD20在淋巴组织增生性疾病中的表达[J];临床与实验病理学杂志;2003年01期
2 刘银星,杨纯正;CD20分子与靶向治疗[J];生命的化学;2003年01期
3 孙大柠;;靶向CD20的单克隆抗体——Ofatumumab[J];药学进展;2008年03期
4 何慧清,许晓军,任志娟,林淑华,郭子文,古滔华,邱大发;CD20单克隆抗体联合自体干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤1例[J];实用医学杂志;2005年09期
5 任今敬;单克隆抗体在血液系统恶性肿瘤治疗中的应用[J];临床和实验医学杂志;2003年02期
6 杨志豪;周晓峰;;CD20单克隆抗体在肾移植中的应用[J];国际移植与血液净化杂志;2006年03期
7 王建娥;刘琳;;抗CD20单克隆抗体治疗自身免疫病研究进展[J];中国社区医师(医学专业);2010年02期
8 任丹;周小鸽;;美罗华治疗后CD20阴性的弥漫性大B细胞性淋巴瘤1例[J];诊断病理学杂志;2011年03期
9 运晨霞;CD200在C57BL/6小鼠白血病肿瘤细胞免疫排斥调节中的作用[J];国外医学.免疫学分册;2002年06期
10 刘银星,熊冬生,范冬梅,邵晓枫,许元富,朱祯平,杨纯正;抗CD20嵌合抗体片段Fab′突变体的表达和活性研究[J];生物工程学报;2003年03期
11 许晓军,何慧清,郭子文,李孝红,李海容,余元龙,季明芳;抗CD20单克隆抗体和化疗预处理及自体外周血造血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤一例[J];中国实验血液学杂志;2005年04期
12 王迪;常艳;吴育晶;魏伟;;B淋巴细胞表面分子靶向治疗类风湿关节炎的研究进展[J];生理科学进展;2011年03期
13 张峰,侯明;美罗华治疗慢性难治性ITP[J];血栓与止血学;2004年01期
14 于晓宁,陈学良;利妥昔单抗治疗非霍奇金淋巴瘤9例[J];肿瘤学杂志;2005年01期
15 宁铂涛;汤永民;陈英虎;沈红强;钱柏芹;;急性白血病细胞CD19和CD20表达比较(英文)[J];中国实验血液学杂志;2005年06期
16 刘影;唐军民;唐岩;常昕莹;李枫;;人早期胚中CD20阳性细胞的免疫组织化学定位[J];解剖学报;2007年02期
17 熊冬生,许元富,杨纯正,彭晖,邵晓枫,赖增祖,范冬梅,杨铭,朱祯平;微型双功能抗体抗CD3/抗CD20的构建和表达[J];中国免疫学杂志;2001年07期
18 钟亚华,谢丛华;抗CD20单克隆抗体美罗华治疗B细胞淋巴瘤的研究进展[J];国外医学.输血及血液学分册;2002年01期
19 陈英虎,汤永民,沈红强,宋华,杨世隆,石淑文,钱柏芹,徐卫群,宁铂涛;急性白血病患者白血病细胞CD19和CD20反应谱分析[J];浙江医学;2003年08期
20 包红霞;吴春铃;李淑珍;唐晓波;褚晓杰;王爽;张家宁;朱大岭;;鼠抗人CD20单克隆抗体的制备与鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘荣;姜文国;刘芳;张砚君;范冬梅;杨铭;邵晓枫;王金宏;熊冬生;杨纯正;;人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白的构建和表达[A];天津市生物医学工程学会第29届学术年会暨首届生物医学工程前沿科学研讨会论文集[C];2009年
2 方成;徐卫;范磊;董华洁;朱丹霞;李建勇;;CD20基因分子水平异常与慢性淋巴细胞白血病细胞CD20低表达的相关性研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
3 杨宏宇;孙顺涛;余术宜;唐王景;汪海燕;;转人4-1BBL基因肿瘤细胞的制备及体外抗肿瘤作用的研究[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
4 ;4-1BBL Expresses on the Human Monocytic Cell Line U937 and Mediates its Proliferation via NF- KB[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
5 杜军;印洪林;陆珍凤;周航波;周晓军;;CD20在胸腺瘤中的表达及其临床意义[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
6 吴俣;向兵;季杰;;抗CD20单抗诱发的间质性肺疾病(Ritaximab-induced lung interstitial lung disease,R-ILD)病例报告和文献复习[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
7 彭洪薇;袁向飞;熊冬生;;CD20启动子活性检测载体的构建及其B细胞特异性的鉴定[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
8 陈琪;平宝红;周淑芸;林榕;;CD20嵌合型单抗美罗华治疗自身免疫性溶血性贫血[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
9 方成;徐卫;范磊;朱丹霞;董华洁;李建勇;;HDAC抑制剂对B淋巴肿瘤细胞CD20的影响[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
10 付晓红;王树森;黄岩;汪波;黄慧强;张力;孙晓非;徐瑞华;林桐榆;;CD20在经典型霍奇金淋巴瘤HRS细胞的表达和预后意义[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘荣;人4-1BBL/抗CD20融合蛋白增强抗CD3/抗CD20双功能抗体的细胞毒作用及其机制研究[D];中国协和医科大学;2010年
2 匡幼林;PSMA和4-1BBL基因修饰的树突状细胞疫苗对前列腺癌的免疫效应研究[D];武汉大学;2012年
3 耿树生;抗CD20抗体的改造及其生物活性研究[D];河北大学;2007年
4 胡建敏;CD20阳性淋巴细胞在慢性移植物肾病组织浸润的意义[D];南方医科大学;2010年
5 谈珉;抗CD20抗体/Flt3L双功能融合蛋白的抗肿瘤作用机理研究[D];第二军医大学;2011年
6 王辉丽;抗体修饰肿瘤细胞疫苗实验研究[D];中国协和医科大学;2008年
7 许元生;抗CD20嵌合抗体突变体HI47F(ab')_2的构建及活性研究[D];中国协和医科大学;2004年
8 郑梦杰;抗CD20嵌和抗体片段F(ab')_2的研究[D];中国协和医科大学;2002年
9 赖增祖;嵌合抗CD20基因工程抗体的构建表达及其功能研究[D];中国协和医科大学;2000年
10 汪茜;免疫性坏死性肌病的临床、病理与免疫学研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 柴青;鼠抗人4-1BBL单克隆抗体制备及其生物学功能的研究[D];苏州大学;2010年
2 高元元;4-1BBL/4-1BB信号与系统性红斑狼疮发病关系的研究[D];蚌埠医学院;2011年
3 张淼;Tca8113-4-1BBL细胞联合CD28单抗在口腔鳞癌免疫中的作用[D];汕头大学;2010年
4 顾德学;4-1BBL逆向信号对肺癌细胞及Treg细胞生物学行为的影响[D];苏州大学;2010年
5 肖建伟;携带4-1BBL基因的胃癌细胞总RNA转染树突状细胞疫苗的体内实验研究[D];河北医科大学;2010年
6 郭宸君;4-1BBL转基因胃癌细胞总RNA转染树突状细胞疫苗的研究[D];河北医科大学;2011年
7 钟丹娜;BBL化妆品公司自创品牌的案例研究[D];华南理工大学;2011年
8 陈超;CD20阳性B淋巴细胞在移植肾组织中浸润的意义[D];吉林大学;2013年
9 宋歌;抗CD20单克隆抗体在预防小鼠皮肤移植急性体液性排异反应中的作用[D];吉林大学;2012年
10 林栋;CD20、Ki-67在胸腺瘤的表达及其临床意义[D];新乡医学院;2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;国务院批准公告通过审核的国家级高新技术产业开发区名单[N];中国高新技术产业导报;2005年
2 文玲菲;索尼数码相机展现新面孔[N];计算机世界;2001年
3 ;你的产品有可用性吗[N];中国质量报;2003年
4 张永军;澳大利亚铝企业—科马尔科[N];中国有色金属报;2003年
5 陈虎;2001年最有创意产品[N];计算机世界;2002年
6 涛鸣;小荷才露尖尖角[N];医药经济报;2002年
7 张荔子;靶向治疗:抗肿瘤药物新视点[N];健康报;2004年
8 广东省消委会;三个牌子榨汁机有安全隐患[N];中国电子报;2001年
9 ;寻找水晶球[N];电脑报;2005年
10 黑晓青;做全球邮政服务的领先者[N];中国邮政报;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978