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姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用

王蓬文  
【摘要】:阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)是一种与年龄相关的以进行性记忆和认知功能障碍为特征的神经变性病。特征性病理变化表现为胆碱能神经元功能障碍、神经元和突触丢失、细胞外β-淀粉样肽(Amyloid beta, Aβ)聚集形成老年斑(senile plaques, SPs)和细胞内高度磷酸化的tau蛋白形成神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles, NFTs)。AD主要的神经分子病理改变是蛋白质的异常表达和加工。分子生物学的进展为揭示脑内这些蛋白质合成、运输和聚集机制提供了所需工具。 本研究旨在通过姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ42/Aβ40的比例及ADDLs含量的影响,并进一步研究ADDLs和胰岛素信号转导通路的关系,探讨姜黄素神经元保护的作用机制,客观评价其疗效,为开发AD的中药防治提供理论依据。 材料和方法 1.采用APP/PS1双转基因小鼠及同月龄同背景的正常小鼠作为实验对象,每组12-15只。中药大、中、小剂量治疗组于3月龄对小鼠实施姜黄素灌胃治疗,罗格列酮组给予罗格列酮灌胃,1次/日,连续治疗3个月 2.应用Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,评价姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠认知功能的影响。 3.运用免疫组织化学方法观察治疗前后APP/PS1双转基因小鼠海马CA1区Shank1和PSD95的变化,运用电子显微镜观察各组小鼠海马CA1区神经元和突触的改变,评价姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠突触结构和功能的影响。 4.运用免疫组织化学和Western-blot方法观察APP/PS1双转基因小鼠治疗前后IDE、PS2、Aβ42、Aβ40和ADDLs的变化,判断姜黄素对Aβ级联反应的影响。 5.运用免疫组织化学、Western-blot和RT-PCR方法观察APP/PS1双转基因小鼠InR、IRS-1等胰岛素信号转导通路相关蛋白的变化,判断姜黄素对胰岛素信号转导通路的影响。 实验结果 1.姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠行为学和学习记忆的影响 在Morris水迷宫实验中,与正常对照组相比模型组小鼠的逃避潜伏期和游泳距离分别明显延长和延长(P0.01和P0.05);与模型组小鼠相比,罗格列酮组和姜黄素中剂量组小鼠的逃避潜伏期明显缩短(P0.01),姜黄素大剂量组小鼠的逃避潜伏期缩短(P0.05),尽管如此,姜黄素大剂量组和姜黄素小剂量组与阳性药物组相比逃避潜伏期长(P0.05);与模型组小鼠相比,罗格列酮组、姜黄素中剂量和姜黄素大剂量组的小鼠游泳距离缩短(P0.01和P0.05)。 2.姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠神经元以及突触相关蛋白表达的影响 超微结构:电镜观察正常对照组海马CA1区神经元和神经毡内结构均正常。模型组小鼠海马CA1区神经元出现程度不等的退行性变。细胞核形态不规则,部分核内染色质浓集;胞浆内脂褐素、脂滴增多,高尔基体囊泡扩张,粗面内质网离散,多聚核糖体解聚,部分线粒体变性。神经毡内可见髓鞘变性,突触数量减少、结构异常,突触小泡聚集增多。姜黄素可使突触增加,并使上述变化有不同程度的改善。 免疫组织化学染色结果:模型组海马CA1区PSD-95和Shank1阳性细胞数较正常对照组明显减少(P0.01),罗格列酮组和姜黄素阳性细胞数较模型组增加(P0.05)。 Western blot结果:与正常对照组相比模型组PSD-95蛋白表达明显减少(P0.01);而与模型组相比罗格列酮组和姜黄素组蛋白表达增多(P0.05)。 3.姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠Aβ的影响 免疫组织化学染色结果:模型组小鼠海马CA1区Aβ生成酶PS2阳性细胞较正常对照组明显增加(P0.01);罗格列酮组,姜黄素大、中、小剂量组小鼠海马CA1区PS2阳性细胞明显减少(P0.01)。模型组小鼠海马CA1区Aβ降解酶IDE和NEP阳性细胞较正常对照组明显减少(P0.01),与模型组相比,姜黄素中剂量组小鼠海马CA1区IDE阳性细胞增加(P0.05);姜黄素大、中、小剂量组小鼠海马CA1区NEP阳性细胞增加(P0.05)。免疫组织化学染色的Aβ40和Aβ42阳性细胞计数模型组均较正常对照组小鼠阳性细胞表达明显增加,其中Aβ42阳性细胞计数增加更加明显;与模型组小鼠相比罗格列酮组和姜黄素治疗各组小鼠阳性细胞表达明显减低。模型组小鼠海马CA1区Aβ40、Aβ42、ADDLs阳性细胞平均灰度值较正常对照组明显降低(P0.01),姜黄素中剂量组、姜黄素小剂量组阳性细胞平均灰度值同模型组相比增加(P0.05)。 Western blot结果:各蛋白表达结果与免疫组化相符。 4.姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠胰岛素信号转导通路的影响 免疫组织化学染色结果:与正常对照组相比,模型组小鼠海马InR、IRS-1阳性细胞计数明显增加(P0.05和P0.01);与模型组相比罗格列酮组和姜黄素中剂量组InR、IRS-1阳性细胞计数增加得到改善(P0.05和P0.01)。与正常对照组相比,模型组小鼠海马CA1区p-IRS-1、PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT蛋白表达均有不同程度的降低(P0.05或P0.01),与模型组相比罗格列酮组和姜黄素中剂量组p-IRS-1、PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT蛋白阳性细胞计数增加(P0.05或P0.01)。 Western blot结果:各蛋白表达结果与免疫组化相符。 RT-PCR结果:与正常对照组相比模型组小鼠海马InR mRNA和IRS-1 mRNA表达明显增加,罗格列酮组和姜黄素大、中、小剂量组可使其表达有不同程度的恢复。 结论 姜黄素保护神经元的机制是通过改善胰岛素信号转导障碍,减少Aβ42和ADDLs生成并增加其降解,影响Ap级联反应起作用的。


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1 李侠!150001,宋其林,陈炳卿!150001;姜黄素抑制苯并(a)芘诱导小鼠前胃癌作用的实验研究[J];中华预防医学杂志;1999年04期
2 王建舜,容维祺,康九红;姜黄素对超氧阴离子的清除作用[J];西北国防医学杂志;1999年03期
3 梁华茂,姜洁,孔北华,马道新,江森;γ-干扰素对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株3AO增殖的影响[J];山东大学学报(医学版);2002年04期
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7 蔡九妹;廖伟;;姜黄素在心血管疾病中应用的研究进展[J];陕西医学杂志;2009年12期
8 吴桂碧;薄层扫描法测定姜黄中姜黄素的含量[J];华西药学杂志;1995年03期
9 何静,陈燕,吴裕丹,陈文娟;姜黄素对原代急性髓性白血病细胞凋亡及调控蛋白Mcl-1、Bax、Bak表达的影响[J];同济医科大学学报;2001年04期
10 吴勇,陈元仲,许建华,吕联煌;姜黄素对人类Burkitt淋巴瘤抗癌作用的研究[J];中华肿瘤杂志;2002年04期
11 黄俊琼,孙万邦;姜黄素对白血病耐药细胞HL_(60)/ADR的抑制作用[J];中国免疫学杂志;2002年05期
12 高承贤,丁志山,梁冰冰,陈铌铍,程东庆;姜黄素对血管生成影响的实验研究[J];中药材;2003年07期
13 鲍华英,陈荣华,郭梅,黄松明,张爱华,费莉,潘晓勤;姜黄素对肾毒血清肾炎大鼠肾组织超微结构及细胞增殖的影响[J];江苏医药;2004年02期
14 孙春艳,刘新月,陈燕,刘芳,王妍;姜黄素对Raji细胞体外抗癌作用的实验研究[J];中国中西医结合杂志;2004年11期
15 刘加军,黄仁魏,林东军,林曲,李铭权,吴祥元,潘祥林,彭军;姜黄素对NB4细胞的增殖抑制作用及其作用机制[J];中国新药与临床杂志;2005年03期
16 沃兴德,丁志山,袁巍,高承贤,洪行球;姜黄素及其衍生物抑制肿瘤作用的实验研究[J];浙江中医学院学报;2005年02期
17 陈朝晖,赵军,肖亚军,肖传国;姜黄素诱导人前列腺癌细胞株PC-3凋亡的研究[J];中华实验外科杂志;2005年04期
18 陈小芬,汤为学,李龙江;姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV_3的抗增殖作用[J];重庆医科大学学报;2005年02期
19 陈宏;张振书;周京旭;陈宇英;丁云霞;张亚历;;姜黄素抗大肠癌和肝癌的基础研究[J];医学研究通讯;2005年12期
20 王青虎,白玉霞,布仁图雅;薄层比色法测定沙日嘎-4汤中姜黄素的含量[J];中国实验方剂学杂志;1998年05期
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1 王虹;李瑞晟;任映;朱志慧;孙海芸;杨金铎;王蓬文;;姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠脑能量代谢的影响[A];中国药理学会第十一次全国学术会议专刊[C];2011年
2 刘建国;张彬;王全胜;朱锐;汪永辉;张丽哓;徐敏;;姜黄素对单侧输尿管梗阻后肾间质纤维化的调节作用的研究[A];中华中医药学会第二十一届全国中医肾病学术会议论文汇编(下)[C];2008年
3 于长安;温见燕;廖福龙;;剪应力与姜黄素联合作用对人脐静脉内皮细胞功能的影响[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
4 陈秀;李作孝;佟琳;陈忠伦;张琳;彭建一;;姜黄素对实验性脑出血肿周边含水量影响的研究[A];第五次全国中西医结合神经科学术会议论文集[C];2004年
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8 廖华;孙爱军;张红旗;;姜黄素对大鼠肺微血管平滑肌细胞周期和增殖能力的影响[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
9 曹健美;胡义扬;刘成海;王晓柠;;姜黄素对LPS诱导KC炎症细胞因子分泌的抑制作用及其对肝细胞损伤的影响[A];第十三次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2004年
10 吴敏;许建华;;姜黄素衍生物FM0809的抗癌活性研究[A];2011医学科学前沿论坛第十二届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2011年
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1 王蓬文;姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用[D];北京中医药大学;2011年
2 郑斌;姜黄素及其类似物L3的抗氧化活性和对小鼠糖尿病模型及血管并发症影响的研究[D];福建医科大学;2010年
3 任玥欣;姜黄素对胆盐诱导的急性胰腺炎防治作用的应用基础研究[D];第一军医大学;2004年
4 吴雪梅;姜黄素新剂型:自乳化和亚微乳给药系统的研究[D];福建医科大学;2010年
5 鲍华英;姜黄素对增殖性肾炎防治作用的实验研究及其机制探讨[D];南京医科大学;2003年
6 刘红军;姜黄素对膀胱癌细胞株T24 miRNA表达谱的影响及其机制的探讨[D];广西医科大学;2011年
7 张文俊;(I)姜黄素半互穿式羟丙甲纤维素—明胶微球给药系统的研究(II)OX26-NGF-融合蛋白的基因克隆及其表达纯化[D];天津大学;2010年
8 崔群力;姜黄素对多巴胺能细胞的保护作用及其机制的实验研究[D];华中科技大学;2010年
9 周京旭;姜黄素对亚硝胺诱导的大鼠肝癌的化学防护作用研究[D];第一军医大学;2001年
10 韩月恒;抗肿瘤中药成分的筛选及作用机理研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
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1 王虹;姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠脑能量代谢的影响[D];北京中医药大学;2011年
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3 张秀红;依那普利联合姜黄素对防治小鼠肝纤维化效果及机制研究[D];河北医科大学;2010年
4 李瑞晟;姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠AD7C-NTP、IGF1R及ChAT表达的影响[D];北京中医药大学;2011年
5 魏小娣;姜黄素对新生大鼠坏死性小肠结肠炎模型的疗效评价及其机制的研究[D];重庆医科大学;2010年
6 安伟;姜黄素对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤保护作用的实验研究[D];山东大学;2010年
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9 王超伟;姜黄素联用吲哚美辛治疗AD大鼠的实验研究[D];山西医科大学;2010年
10 陈朝青;姜黄素抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化作用的实验研究[D];北京中医药大学;2011年
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1 ;姜黄素对肾脏有保护作用[N];中国中医药报;2004年
2 记者 高原;研究发现姜黄素能延长动物寿命[N];新华每日电讯;2010年
3 张骁束 梅英;姜黄素抗癌作用研究进展[N];中国医药报;2003年
4 肖瑶;姜黄素有明显抗肿瘤作用[N];健康报;2008年
5 ;食用天然色素简介——姜黄素[N];中国食品质量报;2004年
6 ;姜黄素有可能预防阿尔茨海默病[N];医药经济报;2005年
7 印高乐;吃姜黄素食物有助预防口腔癌[N];中国中医药报;2003年
8 记者 冯磊 通讯员 毛平;中国中西医结合学会 科技奖颁发[N];中国中医药报;2010年
9 乃卫 冷文 刘国应;国际医药动态[N];中国医药报;2000年
10 程书权 姜黄素;中药及其活性成分治疗肝病的现代研究[N];中国中医药报;2004年
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