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扶正解郁方对抑郁障碍型乳腺癌所诱导的髓系抑制细胞的干预作用研究

张玉人  
【摘要】:立题依据:抑郁障碍是促进乳腺癌侵袭进展的重要因素与常见证型,其作用机制与导致机体免疫抑制密切相关。近年的研究显示:髓系抑制细胞(MDSC)是一群在肿瘤和炎症过程中大量增殖的异质群体,可明显抑制T细胞免疫应答,其中诱导髓系抑制细胞大幅扩增可能是抑郁障碍状态下荷瘤宿主免疫抑制的主要机制。扶正解郁法是抗抑郁焦虑的常用治疗法则之一。扶正解郁方(SFJPF)是我科采用扶正解郁法治疗乳腺癌的经验方。既往研究显示:该方具有一定调控髓系抑制细胞增殖的作用。深入探讨扶正解郁方对抑郁障碍型乳腺癌所诱导的髓系抑制细胞的干预作用,将为中医肿瘤从扶正解郁法的角度防治乳腺癌转移复发提供新的科学依据。 研究方法:临床研究:通过汉密尔顿抑郁量表(HAM-D)观察中国中医科学院广安门医院肿瘤科门诊40例乳腺癌患者患病前后抑郁障碍情况及其程度。实验研究:通过观察SFJPF对抑郁障碍型炎性乳腺癌所诱导的髓系抑制细胞的干预作用,从调控抑郁焦虑状态及炎症反应重塑荷瘤机体免疫机能角度,揭示扶正解郁法防治乳腺癌转移新的科学内涵。 将112只BALB/c小鼠中80只,随机分组进行抑郁障碍模型的造模实验,经动物行为学评价证明造模完成后进行4T1乳腺癌炎性细胞接种并分组进行药物干预:包括单纯抑郁模型组(第一组)、无药物干预的抑郁荷瘤组(第二组,抑郁荷瘤组)、吉西他滨化疗干预的抑郁荷瘤组(第三组,抑郁化疗组)、中药SFJPF干预的抑郁荷瘤组(第四组,抑郁中药干预组)、中药加化疗干预的抑郁荷瘤组(第五组,抑郁化疗+中药干预组)、单纯荷瘤组(第六组)及正常对照组(第七组)。每周测量各组体重及各荷瘤组瘤径2次。接种及用药干预28天后,测取各组小鼠瘤重和脾重,计算抑瘤率;并通过流式细胞术检测各组小鼠脾细胞悬液中髓系抑制细胞含量比例及其亚型、CD3/CD8、CD3/CD4,和CD8+T细胞凋亡水平。通过ELISA(?)检测各组小鼠外周血IL-6、IFNγ水平;硝酸还原酶法检测小鼠脾脏内NO含量。最后观察各组小鼠不同干预措施下生存期的差异。 研究结果:临床观察:乳腺癌患者患病前获得抑郁障碍表现的发生率为72.5%,肯定患抑郁症的乳腺癌患者为2.5%,抑郁障碍的估计病例数总比例为75%;患乳腺癌后,患者保持、或新获抑郁障碍表现的概率为60%,肯定抑郁症所占比例为7.5%,患有抑郁障碍的估计病例数总比例为67.5%。动物实验:第9、13、17、21、25、28天抑郁化疗+中药干预组瘤径(第五组)均最小,而无药物干预抑郁荷瘤组(第二组)最大,抑郁荷瘤组单纯荷瘤组抑郁中药干预组抑郁化疗组抑郁化疗+中药干预组。第28及33天时各荷瘤组瘤重统计结果显示,抑郁荷瘤组单纯荷瘤组抑郁中药组抑郁化疗组抑郁化疗+中药干预组;第38天时:抑郁荷瘤组抑郁中药组单纯荷瘤组抑郁化疗组抑郁化疗+中药干预组。抑郁化疗+中药干预组(第五组)抑制瘤重效果更加显著,而无药物干预抑郁荷瘤组(第二组)具有最大瘤重值。抑郁化疗+中药干预组(第五组)抑瘤率最高,且生存期实验中,此组荷瘤小鼠生存期最长,可以认为疗效最佳,而抑郁荷瘤组(第二组)生存期最短,可以认为抑郁障碍促进乳腺癌进展,缩短生存期。 各组小鼠脾重值抑郁荷瘤组(第二组)最大,单纯抑郁模型组(第一组)最小。脾脏内GR1dimCD11bbright含量比例比较,正常对照组单纯抑郁模型组抑郁化疗+中药干预组抑郁化疗组单纯荷瘤组抑郁中药干预组抑郁荷瘤组。抑郁荷瘤组、化疗组、中药组、化疗+中药干预组的MDSC(GR1dimCD11bbright及CD8+T细胞含量分别为25.05%,15.27%,21.06%,11.78%,和4.86%,6.5%,6.35%,7.47%。抑郁荷瘤组脾脏中MDSC (GR1dimCD11bbright)含量最高,以CD11b+LY6G+LY6Clow亚型为主。CD3/CD4含量抑郁荷瘤组(第二组)为最少,正常对照组最多。 各组凋亡结果显示:阴性对照组抑郁荷瘤组(第二组)具有最高的CD8+T细胞凋亡水平;正常组(第七组)CD8+T细胞凋亡水平最低;抑郁化疗+中药组(第五组)CD8+T细胞凋亡水平相比抑郁化疗组(第三组)、单纯荷瘤组(第六组)及无药物干预抑郁荷瘤组(第二组)降低。而且抑郁荷瘤组(第二组)外周血IL-6水平最高。 结论:临床研究显示抑郁障碍与乳腺癌发生、进展密切相关。实验研究表明:抑郁干预会抑制正常小鼠的免疫功能,合并肿瘤会促进肿瘤的进展,其中促进MDSC增殖、诱导CD8+T细胞凋亡从而抑制T细胞免疫应答是重要的作用机制。扶正解郁方单纯应用、配合化疗具有抑制小鼠炎性乳腺癌生长、延长生存期的作用,其作用机制在于单纯应用具有一定抑制MDSC增殖,降低IL-6及NO水平,减缓CD8+T细胞凋亡作用,配合化疗可以提高抑制小鼠炎性乳腺癌生长、抑制MDSC增殖,降低IL-6及NO水平,减缓CD8+T细胞凋亡作用强度。


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