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固本止咳中药对COPD呼吸道黏膜免疫保护作用机制的研究

来薛  
【摘要】:目的:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)是一种常见的慢性呼吸系统疾病,以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征,可以导致气流受限不完全可逆。该病程呈进行性发展,与肺部对香烟烟雾等有害气体或颗粒的异常炎症反应有关。气道的慢性炎症持续存在导致气道壁损伤和修复过程反复发生。目前全世界COPD死亡率居所有死因的第四位,其致死率呈逐年上升的趋势。对患者个体来说,临床表现除肺部症状外,常常伴有全身系统的严重疾病表现,严重影响着患者的劳动能力和生活质量。由于本病患病人数多,死亡率高,社会经济负担较重,COPD现已成为一个重要的公共卫生问题。 中医药治疗COPD具有丰富的临床经验,尤其是针对COPD稳定期的治疗,本着“治未病”的中医理论思想,从预防复发角度出发,采用扶正固本类中药,不仅可以减轻患者的临床症状、提高机体免疫力,还可以减少急性发作次数,从而延缓COPD的病程进展速度。 固本止咳中药,从COPD本虚标实的病机特点入手,采用补益肺、脾、肾三脏之气,兼顾痰热、血瘀的特点达到扶正以祛邪的功效。前期临床研究显示,采用固本止咳中药观察30例患者取得了较好的临床疗效。其中改善患者咳嗽、咳痰的总效率达100%,改善喘息有效率达85.71%,综合疗效评定总有效率96.67%,在改善患者肺功能、调节机体免疫等方面有较好效果。探讨固本止咳中药治疗COPD的作用机理,研究固本止咳中药对呼吸道黏膜免疫系统的影响机制,阐述呼吸道黏膜免疫首道防线作用与中医正气“卫外”功能的关系,提出中医“治未病”理论在COPD防治应用中的优越性。 方法:本实验采用鼻腔滴入脂多糖(LPS)加熏香烟的方法建立COPD小鼠动物模型,实验分为空白对照组、模型对照组、固本止咳中药组;运用HE染色、电镜对形态学进行观察,评价COPD模型小鼠的病理改变,及固本止咳中药对COPD模型小鼠病理改变的影响;使用动物肺功能仪分析系统检测实验小鼠的呼吸生理变化,分析固本止咳中药对COPD模型小鼠肺功能的影响;应用ELISA方法检测小鼠气道slgA分泌水平,应用免疫组织化学方法检测实验小鼠肺组织中NE含量表达情况,探讨固本止咳中药对COPD模型小鼠气道及肺组织炎症状态的影响。 结果:1.采用鼻腔滴入LPS加熏香烟的方法建立的COPD小鼠模型,可使小鼠气道管腔变窄,管腔内分泌物增加,支气管黏膜上皮脱落,气管微绒毛倒伏,粘缩成团;肺组织间质内炎性细胞浸润增加,肺泡壁结构破坏、溶解破裂,呈囊状扩张,肺泡孔增大,肺毛细血管床明显减少,形成肺大泡,多为生理无效腔等均符合COPD病理学改变。经固本止咳中药治疗后小鼠气道黏膜及肺组织炎性浸润有所改善,肺毛细血管床相对丰富,但仍存在肺大泡改变;微结构变化显示,气道黏膜结构改善明显,肺泡上皮细胞结构仍存在病理改变。2.反应小鼠气道阻塞程度的FEVO.1、PEVO.2,及小气道功能状态的FEF25-75、PEF等指标显示,模型对照组较空白对照组降低(P0.05),固本止咳中药组较模型对照组增高(P0.05)。3.BALF中sIgA的含量检测可反应小鼠气道炎症状态,结果显示模型对照组较空白对照组sIgA明显升高(P0.05);固本止咳中药组较模型对照组sIgA分泌量明显降低(P0.05);固本止咳中药组较空白对照组略有升高(P0.05)。4.NE作为中性粒细胞活化后释放的一种毒性分子,可破坏肺组织弹性纤维,促使形成肺大泡。空白对照组显示NE分泌含量极少,模型对照组小鼠NE阳性表达显著增多,其阳性面积显著高于空白对照组与固本止咳中药组(P0.01),空白对照组与固本止咳中药组比较无统计学差异(P0.05)。 结论:采用鼻腔滴入LPS加熏香烟的方法可成功复制COPD动物模型。固本止咳中药可明显改善COPD模型小鼠的气流受限程度,其中以改善小气道功能更为明显;可使呼吸道sIgA分泌含量明显降低,使COPD模型小鼠气道慢性炎症得到有效控制,减轻了sIgA的过度免疫应答,从而起到调节呼吸道黏膜局部免疫功能的保护作用;同时使肺组织中NE含量显著减少,肺部炎性浸润得到有效控制。其中sIgA分泌含量与NE含量表达呈正相关性。固本止咳中药通过减轻COPD模型小鼠的气道黏膜及肺组织炎症浸润程度,从而调整呼吸道黏膜免疫状态,对局部气道炎症的控制可减轻气道壁的损伤和修复过程的发生,起到改善小鼠气道通气功能障碍的作用。我们推测,固本止咳中药通过抑制COPD模型小鼠的慢性炎症状态,降低气道黏膜的过度免疫应答,促进气道黏膜的损伤修复,使黏膜免疫达到平衡状态,起到类似中医“正气”卫外的防御功能作用。从而达到控制疾病进程,预防急性发作的目的,体现中医“治未病”理论“既病防变,瘥后防复”的思想。


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