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绝经综合征心肾不交型与血脂的相关性及交通心肾法对老龄雌鼠的干预效应研究

辛明蔚  
【摘要】:绝经综合征(menopause syndrome,MS)是严重影响绝经前后女性生活质量的一类疾病,其近期症状主要为潮热、出汗、心悸、头晕、失眠、健忘、心烦易怒等血管舒缩症状、自主神经失调症状及精神神经失调症状,远期症状主要表现为血脂代谢异常、动脉硬化、冠心病的发病风险增加。内皮功能损害是动脉粥样硬化发病的首要和最早环节,血脂异常又是动脉粥样硬化的病理基础,是心血管疾病发病的危险因素。文章紧密围绕与心血管疾病发病密切相关的血管危险因素进行讨论。课题通过近年来文献资料检索,探讨了绝经期心血管疾病的研究进展及交通心肾法治疗绝经综合征和绝经期心血管疾病的近况,并从临床研究和实验研究两个方面对绝经综合征进行探讨。临床研究对绝经综合征患者中医证型与雌激素、血脂水平之间的相关性进行了系统分析,发现绝经综合征患者不同中医证型之间血脂水平存在明显差异,其中尤以心肾不交型患者血脂异常最为明显,提示心肾不交型绝经综合征可能更容易发生心血管疾病。实验研究应用老龄雌性大鼠模拟自然绝经状态,使用交通心肾中药干预老龄雌鼠,观察其对老龄雌鼠性激素水平,下丘脑、垂体、卵巢组织雌激素受体(ER)雌激素受体基因(ERmRNA)表达水平以及血管内皮L-Arg/NOS/NO通路的影响,探讨交通心肾法对老龄雌鼠的干预效应,为交通心肾法防治绝经综合征及绝经期心血管疾病提供实验基础。临床研究目的筛查绝经综合征患者不同中医证型之间血脂、雌激素水平的相关性。方法根据绝经综合征患者临床表现,并参考相关文献,拟定中医证候调查表,对符合纳入标准的MS患者进行问卷调查,记录患者一般情况、月经史及全身症状、舌脉等进行中医辨证分型,并进行改良kupperman评分。用全自动化学发光免疫分析法测定患者卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2),全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C).低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A1 (ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)、脂蛋白a(Lp(a))。利用Microsoft Excel收集数据,数据录入采用双录入方式进行。采用SPSS 19.0对研究数据进行统计分析。计量资料采用均值士标准差的形式进行描述,计数资料采用频数(百分比)进行描述。计量资料组间比较采用独立样本t检验或单因素方差分析(one-way ANOVA)进行,不符合正态分布的计量资料组间比较采用非参数检验进行,计数资料组间比较采用X2检验、秩和检验(Kruskal-WamsH)进行。所有检验以双侧P0.05为差异有统计学意义。结果1.中医证型与心血管疾病危险因素的相关性符合纳入标准的122例MS患者依据中医证型辨证标准分为肝肾阴虚型43例,肾阴阳两虚型27例,肾虚肝郁型23例,心肾不交型29例。本次研究中医证型出现频率由高到低依次是:肝肾阴虚型(35.25%)心肾不交型(23.77%)肾阴阳两虚型(22.13%)肾虚肝郁型(18.85%)。MS患者中医证型分布与患者的年龄、绝经情况、文化程度、血压、血糖、运动、饮酒、吸烟均无显著相关性。2.中医证型与血脂指标的相关性绝经综合征患者不同中医证型间血清TG、TC/HDL-C间差异有统计学意义(P0.05)。两两比较显示,心肾不交型与肝肾阴虚型、肾虚肝郁型、肾阴阳两虚型比较TG.TC/HDL-C升高,且有显著性差异(P0.05); LDL-C、ApoB、Lp(a)、LDL-C/HDL-C、TG/HDL-C、 ApoB/ApoA1ApoB/HDL-C、non-HDL-C有升高趋势但无显著性差异(P0.05),HDL-C、 ApoAl有降低趋势但无显著性差异(P0.05)。3.MS严重程度和血脂指标的相关性依据改良kupperman评分,将绝经综合征患者分为轻度、中度和重度,经单因素方差分析,三组患者间TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA、ApoB、Lp(a)、 ApoB/ApoA1 LDL-C/HDL-C TG/HDL-C、TC/HDL-C、ApoB/HDL-C、non-HDL-C均无显著性差异(P0.05)。结论1.绝经综合征患者中医证型分布与患者的年龄、绝经情况、文化程度、血压、血糖、运动、饮酒、吸烟均无显著相关性。在绝经综合征人群中,中医辨证为心肾不交型患者,与其他三个证型相比,血脂异常更明显,可能更容易发生绝经期心血管疾病。2.绝经综合征严重程度与血脂相关指标无相关性。实验研究目的观察交通心肾法中药宁更丹对老龄雌鼠性激素水平,下丘脑、垂体、卵巢组织雌激素受体(ER)、雌激素受体基因表达水平(ERmRNA)以及血管内皮L-Arg/NOS/NO通路的影响,探讨交通心肾法对老龄雌鼠的干预效应,为交通心肾法防治绝经综合征及绝经期心血管疾病提供实验基础。方法1.通过构建老龄雌性大鼠模型模拟自然绝经状态,采用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO),比色法测定一氧化氮合酶(NOS),甲萘酚—双乙酰法定量测定L-精氨酸(L-Arg),放免法检测血清FSH、E2、LH含量,酶免法检测动物模型下丘脑、垂体、卵巢中ER的含量,用荧光免疫PCR分析ERa mRNA和ERβ mRNA表达水平,观察老龄雌鼠FSH、E2、LH及下丘脑、垂体、卵巢组织ER表达水平和血管内皮L-Arg/NOS/NO通路的变化情况;2.运用交通心肾法中药宁更丹、戊酸雌二醇、更年安片对模型动物进行干预,通过测定模型大鼠血清FSH、E2、LH,下丘脑、垂体、卵巢中ER和RmRNA含量,以及L-Arg/NOS/NO通路相关分子的表达情况,探讨交通心肾法对大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴及血管内皮细胞内信号转导通路的影响。结果1.E2、FSH和LH结果与治疗前比较,中药治疗组和西药对照组E2升高,有显著性差异(P0.05),中药对照组结果略有升高,无显著性差异;中药治疗组、西药对照组、中药对照组的FSH均降低,有显著性差异(P0.05);LH结果:五组间无差异。2.ER结果与老龄模型组相比,下丘脑中ER中药治疗组、西药对照组和中药对照组水平升高,有显著性差异(P0.05);垂体中ER中药治疗组升高,有显著性差异(P0.05),中药对照组下降,有显著性差异(P0.05);卵巢中ER中药治疗组升高,有显著性差异(P0.05)。ERαmRNA及ERβml RNA结果与老龄模型组相比,下丘脑RαmRNA水平各组无显著性差异(P0.05);垂体ERαmRNA水平中药治疗组升高,有显著性差异(P0.01),中药对照组和西药对照组稍有升高,但无显著性差异(P0.05);中药治疗组、中药对照组、西药对照组水平均降低,有显著性差异(P0.05)。与老龄模型组相比,中药治疗组、西药对照组和中药对照组下丘脑ERβmRNA水平均明显升高,但可能是标准误过大无显著性差异;中药治疗组垂体ERβmRNA水平升高,有显著性差异(P0.01),中药对照组和西药对照组ERβ mRNA略有升高,无显著性差异(P0.05);中药治疗组、西药对照组和中药对照组卵巢ERβmRNA水平均升高,有显著性差异(P0.01)。3.L-Arg、NOS、NO结果与老龄模型组相比,中药治疗组和西药对照组L-Arg升高但无显著性差异(P0.05);中药对照组NOS下降,有显著性差异(P0.05),中药治疗组NOS下降但无显著性差异(P0.05);中药治疗组、西药对照组NO水平均升高,有显著性差异(P0.05),中药对照组NO升高,但无显著性差异(P0.05)。结论交通心肾法中药宁更丹不仅显著提高老龄雌性大鼠血清E2和下丘脑、垂体和卵巢ER蛋白表达水平,促进下丘脑、垂体、卵巢ERβmRNA和垂体ERαmRNA表达、抑制卵巢ERαmRNA表达,同时能够显著促进大鼠血管内皮NO表达水平,推测其可能通过影响下丘脑-垂体-卵巢生殖轴和调节血管内皮L-Arg/NOS/NO通路发挥防治绝经综合征及绝经期心血管疾病的效应。


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