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帕金森病的肠道菌群特征及升清降浊方治疗便秘的疗效观察

张天清  
【摘要】:目的:提取帕金森病(PD)便秘的中医证候特征,观察升清降浊方治疗PD便秘的临床疗效;分析PD的肠道菌群特征及其与中医证候的相关性,为中医药治疗PD提供参考。方法:研究一:采用横断面研究的方法,收集来自于东直门医院、北京医院和北京大学第三医院的共239名受试者,其中PD便秘组120人,PD非便秘组49人,正常对照(NC)组70人。对三组进行中医证候量表评估,比较三组的中医证候积分及证候出现频率的差异,提取PD便秘的中医证候特征;对PD便秘组进行统一帕金森病评分量表(UPDRS)、便秘严重度评估(CSI)、HOEHNYAHR分级(H-Y分级)的评估,分析PD便秘的中医证候与各观测量表的相关性。研究二:采取随机、双盲、安慰剂对照多中心临床试验,评估升清降浊方治疗63例PD患者便秘的有效性,试验组43人,对照组20人,试验组在常规治疗基础上加用升清降浊中药颗粒,对照组在常规治疗基础上加用安慰剂颗粒,疗程12周。使用意向性(ITT-LOCF)分析和符合方案集(PPS)分析比较两组间疗效差异,主要疗效指标CSI,次要疗效指标UPDRS、帕金森疲劳量表(PFS-16)和中医证候量表评分的改善情况。研究三:采用横断面研究的方法,收集来自于东直门医院、北京医院和北京大学第三医院的共53名受试者,其中PD组38人,NC组15人。收集受试者的粪便样本,应用DNA提取、PCR扩增和16S rDNA高通量测序技术,比较两组的肠道菌群差异,归纳PD患者的肠道菌群特征;对PD组进行UPDRS、CSI、H-Y分级、中医证候量表评估,分析PD的肠道菌群与各观测量表的相关性。结果:1.PD便秘组最常见的中医证候依次为肝风(98.33%)、髓减(90.00%)、阴虚(76.67%)、气虚(74.17%)。PD便秘组相对较重的中医证候依次为肝风(20.35±6.523)、髓减(13.27±5.302)、气虚(9.25±5.030)、阴虚(7.86±3.347)。经相关性分析,结果显示PD便秘患者的H-Y分级与肾虚(r=0.479,p=0.000)、脾虚(r=0.248,p=0.006)、气虚(r=0.183,p=0.045)、血虚(r=0.264,p=0.004)、阳亢(r=0.519,p=0.000)、内热(r=0.194,p=0.034)呈正相关;UPDRS积分与阳虚(r=0.183,p=0.045)、髓减(r=0.264,p=0.004)、阳亢(r=0.189,p=0.039)、血瘀(r=0.220,p=0.016)呈正相关。据此建立使用中医证候积分评价PD便秘患者H-Y分级、UPDRS积分的模型,其中使用中医证候积分评价PD便秘患者H-Y分级的模型方程为yH-Y分级=-2.070+9.017x肾虚+0.824阳亢;使用中医证候积分评价PD便秘患者UPDRS积分的模型方程为yUPDRs=18.163+0.685x髓减+0.359x阳亢。2.升清降浊方治疗PD便秘疗效观察结果显示,CSI总分的两组间比较显示,试验组CSI12周得分改善情况优于对照组(p=0.021),CSI积分治疗后较治疗前下降了6.72±8.850。CSI中各症状的两组间比较显示,试验组Ⅲ(正常排便次数)8周得分改善情况优于对照组(p=0.007);试验组Ⅳ(便次减少的频率)各随访点得分改善情况优于对照组(p0.05);试验组Ⅵ(疼痛及便血)4周得分改善情况优于对照组(p=0.038)。CSI试验组内两两比较结果显示,各随访点CSI得分较0周得分均有所下降(p0.05)。试验组PFS-16的ITT-LOCF分析显示8周、12周的改善情况优于对照组(p0.05),PPS分析显示12周试验组PFS-16的改善情况优于对照组(p=0.008)。试验组在ITT-LOCF分析中治疗后各随访点的PFS-16得分均较治疗前有改善(p0.05),12周得分较4周得分有改善(p=0.022),在PPS分析中治疗后8周、12周的PFS-16得分均较治疗前有改善(p0.01),12周得分较4周得分有改善(p=0.015)。中医证候积分方面,试验组阴虚在8周、12周的改善情况优于对照组(p0.05)。试验组各随访点的髓减得分逐渐降低(p0.05)。两组间的不良事件比较无显著差异。3.PD患者肠道菌群变化分析结果显示,PD组与NC组,PD便秘组与NC组多样性指数未见明显差异(p0.05)。PD组和NC组肠道菌群种类在门、纲、目、科、种、属分类水平上均有一定的重叠。在门水平上,PD组Tenericutes丰度较NC组显著升高(p=0.005)。在纲水平上,PD组Mollicutes丰度较NC组显著升高(p=0.005)。在科水平上,PD组Peptococcaceae,Lactobacillaceae丰度较NC组显著升高(p=0.002,p=0.005);PD组Burkholderiaceae丰度较NC组显著降低(p=0.005)。在属水平上,PD组Lautropia丰度较NC组显著降低(p=0.005)。PD患者肠道菌群多样性与临床指标的的相关性分析,结果显示,OTU number、chao指数、ace指数、shannon指数与痰浊(rOTu=0.364,poTU=0.025;rchao=0.385,pchao=0.017;race=0.374,Pace=0.021;rshannon=0.389,pshannon=0.016)呈正相关,与UPDRS(rOOTU=-0.364,pOTU=0.025;rchao=-0.383,pchao=0.018;race=-0.350,pace=O.031;rshannon=-0.330,pshannon=0.043)呈负相关;shannon指数与肾虚和阳虚(r肾虚=0.421,P肾虚=0.008;r阳虚=0.391,p阳虚=0.015)呈正相关;simpson指数与肾虚(r=-0.463,p=0.003)呈负相关。PD便秘患者肠道菌群多样性与临床指标的的相关性分析,结果显示,OTU number、chao指数、ace指数、shannon指数与痰浊(rOTU=0.379,pOTU=0.030;rcihao=0.411,pchao=0.017;race=0.382,pace=0.028;rshannon=0.388,pshannon=0.026)呈正相关,与UPDRS(rOOTu=-0.407,pOTU=0.019;rchao=-0.398,pchao=0.022;race=-0.392,pace=0.024;rshannon=-0.366,pshannon=0.036)呈负相关;shannon指数与肾虚(r=0.357,p=0.042)呈正相关;simpson指数与肾虚(r=-0.387,p=0.026)呈负相关。结论:1.PD组较NC组在Tenericutes(柔膜菌门)、Mollicutes(柔膜菌纲)、Peptococcaceae(球菌科)、Lactobacillaceae(乳杆菌科)、Burkholderiaceae(伯克氏菌科)、Lautropia(劳特罗普菌属)菌群中有较大差异,这些差异可能与PD的发生有关,如便秘;2.PD和PD便秘患者肾虚、痰浊可能与肠道菌群多样性存在相关性;3.PD便秘典型的中医证候是肝风、髓减、阴虚、气虚;4.升清降浊方可能具有改善PD阴虚便秘的作用,且安全性较好。


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