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类风湿性关节炎从“络”辨治及寒热方剂作用机理研究

李梢  
【摘要】: 对于类风湿性关节炎(RA)等临床常见病、疑难病,中医药辨证施治(分证论 治)是具有优势的治疗手段。但目前仍缺乏符合RA发病学和病理学特征的中医理 论认识,对RA证候发生、方剂作用的机理仍缺乏适宜的解释途径,“分证论治机 理”已成为中医学病证结合、理法方药体系中的关键问题。 1.目的 探讨RA从“络”辨治的中医学理论构架;并以RA为疾病的代表,从病证结 合、寒热方证偏性关联的角度,以寒热方剂作用途径、时相特征切入探讨RA寒、 热方证复杂系统的部分生物学基础。 工作假说:疾病、证候、方剂为复杂系统。分证论治的不同方剂(如寒、热 方剂)可使机体(如RA疾病,CIA模型)的状态发生不同的改变,和/或其变化可 体现不同的时相特征。通过典型化设计、多环节、多层次观察、节律特征分析, 将有助于探寻RA寒、热分证论治及寒、热方证复杂系统的部分机理。 2.方法 2.1理论方法:采用文献学、流行病学调查(纵向研究和横断面调查)、逻辑分析 等方法,对RA从“络”辨治的规律,RA方证偏性关联,以及痛痹、热痹疼痛的 起病/发作年节律调查结果进行分析,对RA方证复杂系统的研究切入点进行探讨。 2.2实验方法:以Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)雄性Wistar大鼠为对象,以寒、 热方剂“清络饮”、“温络饮”进行干预,雷公藤多甙片为治疗对照。在对各组动 物分别进行:(1)CII免疫1,7,21,33天时的疼痛试验(21℃、5-8℃、42-45℃), 关节肿胀程度,肛温,膝、踝关节肤温,体重等体征评价。(2)CII免疫8,33天 双侧膝踝关节、肾上腺病理形态学观察;Cll免疫33天滑膜细胞透射电镜观察、 滑膜MMP_3mRNA原位杂交、TIMP-1免疫组化等检测,以及各项图象分析。(3)CII 免疫33天放射性免疫法测定6:00,12:00,18:90,0:00时血中ACTH、皮质醇、 TNF-α、IL-6、IL-1β水平,并对束状带厚度、ACTH水平进行线性相关分析, 对各因子昼夜水平进行余弦节律拟合分析。 3.结果 3.1理论研究结果 根据导师王永炎院士的学术思想,认为RA是“新病入络”的代表病证,病变 核心在于“病络”。进而首次提出并阐释RA从“络”辨治的初步理论构架:“外邪 入络,邪伏肢节脉络”的发病学特点、“毒损肢节脉络,络道亢变,络脉虚滞”的 病因病机特点、“分证论治(譬如散寒、清热),(?)毒防变(强调早期治疗),通畅络 脉(强调矫正病理)”的治则治法特点。 3.2实验研究结果 3.2.1CIA的体征与可能的证候特点 慢性病(P<0.001)、踝关节肿胀(宽度P<0.001,厚度P<0.01)、膝踝关节肤 2 类 枉关节炎从“纽”辨治及寒热方剂作用 研究 温增高O删.001,P硼.01)为*A的主要体征特点之一。CIA在特定发展阶段可能 具有热证的倾向,但免疫7天后在寒、热刺激下的疼痛积分接近(P>口.05),肛温 帜列.05厂体重(P叩,3)无异常;故尚难肯定,这也说明了以A症、征的复杂性。 同时,相关研究综合表明CIA具有随之复加因素的变化而体现出不同证候倾向, 发生相应的免疫、神经、内分泌等改变的潜质、提示CIA对寒、热方药的干预有 可能出现不同的反应. 3.2.ZRA、CIA“病络 的部分病理生理基础 。病络”是R几CI^病变的主要渠遣和枢纽.研究发现,导致“病络”形成 的“毒邪”为综合的病因病理,可能表现为(1)部分细胞因子分泌量的变化、分泌 节律的紊乱:0A 大鼠0:00 时血清m卜二(k0。仍)水平,以及6:00、 18:00(P<0.05)、0:00(P<0.口1)时血清几一6明显增高.同时*F一a分泌节律(峰、 谷值*.01)紊乱,近乎相位倒歪;几仔体现出o:co为峰值、6j 为谷值(峰、 谷值k0.的*周期延长的异常节律变化.Q)病理上呈“络道亢变”之征象:膝 踝关节明显的滑膜血管另、新生血管形成,炎细胞浸润,关节软骨与骨组织侵蚀 和破坏;趋征结构观炙发现C*滑膜细胞分泌功能亢进,代谢活性憎强.oK 膝滑膜组织中新生血管诱导剂、组织损伤酶皿0雌HA表达的面积x显著增高 (P<口.o二);其抑制物TI肥-1水平明显降低(P<o.os),旧”八*肥一1比例破坏. CIA也继之有“络脉虚滞”的整体失调:*)有关讼未、CK分泌节律的改变, 以及特定时段分泌水平的改变为其重要表现形式.O北IA见有束状带显著增厚侣 天,左P<0.01,右P<0.001)、细胞变性,转而萎绪(33天,P<0.05)、细胞灶状 坏死和结节状增生的趋势.o)免疫33天时见有血中砒m分泌失同步,18:co时 皮质醇水平降低O叩.01)而 6:00时增高O<0.05*皮质醇分泌节律丧失(峰、 谷值比较P1.269)、周期廷长(正常组:24.gb儿IA:46.7hX相位倒置等肥A轴 同步机制紊乱,说明HPA轴-免疫系统对炎症刺激的反应出现缺陷. 3上j寒、热方剂的作用相关性 清络饮、温络饮对CIA在“截断毒邪”、防治“络道亢变”的以下作用上具 有相关性:*)改善CIA免疫侧、继发侧疼痛洱功.01卜踝关节肿胀o叩.01*降 低关节炎指数r叩01L Q)抗炎、减少滑膜毛细血管新生、防止血管


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