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类风湿性关节炎从“脾”论治的理论、临床及实验研究

刘健  
【摘要】: 1 目的 以中医理论为指导,总结中医学对类风湿性关节炎(RA)的认识和治疗经验,提出RA的中医学病机、治疗原则和治法,观察健脾益气、化湿通络法治疗RA的临床疗效,探讨RA从脾论治的作用机制。 2 方法 2.1 理论研究:以文献研究法,总结历代对RA相关病证的认识;提出RA的中医学病机,总结导师治疗RA的经验,拟定RA从脾论治的方药新风胶囊(XFC)。 2.2 临床研究:40例RA患者随机分为2组,治疗组20例应用新风胶囊,对照组20例应用雷公藤多甙片,2组均以3个月为一疗程,治疗一个疗程,观察临床疗效(晨僵、关节疼痛、肿胀及关节功能)、治疗前后CRP、RF、Ig、OKT_4、OKT_8、OKT_4/OKT_8、细胞因子(IL-1、TNF-α、IL-4、IL-10)及血管内皮生长因子等指标的变化及不良反应。 2.3 实验研究 (1)实验一:将60只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、新风胶囊(XFC)组和雷公藤多甙片(TPT)组,每组15只,制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外的其余动物右后足跖皮内注射0.1ml制成佐剂性关节炎(AA)模型。观察各组大鼠的足跖肿胀度,电镜观察滑膜细胞、脾脏、胸腺、胃粘膜细胞超微结构的变化(包括线粒体肿胀、空泡变、嵴突病变等),计算各组线粒体病变率。 (2)实验二:将50只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、新风胶囊(XFC)组、雷公藤多甙片(TPT)组和甲氨喋呤(MTX)组,每组10只,制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外的其余动物右后足跖皮内注射0.5ml致炎,观察动物体重、关节炎指数及血清细胞因子(IL-1、TNF-α、IL-4、IL-10)及血管内皮生长因子(VEGF)含量的变化。 (3)实验三:采用弗氏完全佐剂造模,设立正常组、模型组、甲氨喋呤(MTX)组、雷公藤(TPT)组和新风胶囊(XFC)组各10只,以电子显微镜观察各组大鼠滑膜、胸腺细胞凋亡情况;以免疫组化法检测各组大鼠滑膜、胸腺fas、fasL、bcl-2的表达;应用流式细胞仪(FCM)分别以线粒体膜电位(MMP)标记法、TUNEL法、Annexin V/PI法检测各组大鼠滑膜、胸腺、胃粘膜细胞凋亡率。 3 结果 3.1 理论研究结果:RA的中医学病机为脾胃虚弱,湿浊内生;气血不足,营卫失调;痰瘀互结,脉络阻滞。脾虚在RA的发病中起关键性作用;RA中医治疗原则是顾护脾胃,调补后天;扶助正气,益气养血;祛痰化湿,佐以通经活络,透达关窍。RA从脾论治的治法为健脾益气,化湿通络,治疗方药为新风胶囊(XFC)。 3.2 临床研究结果:XFC治疗RA在总有效率、改善RA关节症状(晨僵、疼痛、肿胀、关节功能)及部分实验室指标方面(ESR、CRP、RF、ESR、IgG、IgA、IgM)与TPT作用相似,但在改善全身整体症状(倦怠乏力、少气懒言)、脾虚湿盛(关节重着、大便稀溏)、瘀血症状(皮下硬节、局部发热),调节OKT_4/OKT_8,调整细胞因子平衡(下调IL-1、TNF-α,上调IL-4、IL-10)及降低VEGF方面显著优于TPT;而且XFC组药物不良反应(如食欲减退、食后腹胀、大便稀溏)的积分值显著低于TPT。 中文摘要5 3.3实验研究结果: *)实验一:与模型组相比,XF C组和h T组治疗后足路肿胀度显著降低(<0.05*关 节滑膜细胞线粒体的病变率显著降低广<0.05卜肝C组脾脏、胸腺淋巴细胞及胃粘膜细胞线 粒体病变率显著降低(<0刀5入而h T组上述指标差异无显著性仁>0.05L与**T组比较, 地C组滑膜细胞、脾脏、胸腺淋巴细胞、胃粘膜细胞线粒体病变率显著降低o<0刀5人 胆)实验二:与模型组相比,汀C组、h T组及*TX组治疗后AA大鼠的关节炎指数 (AI)显著降低尸<0.05或P<0.of人XFC组治疗后体重增加值与正常组比较差异无显著性 (>0.05人 TIT组及 MTX组给药前后体重增加值显著低于正常组和 XFC组仁<0.01人与模型 组比较,XF C组I卜1、’’l’--。显著降低,1**、1卜10显著升高o<0刀1L并与**T、MTX 组无显著差异厂>0刀5hXF C组VE GF显著低于模型组、*PT组及MTX组。 (3)实验三: 电镜观察结果显示:正常组滑膜、胸腺细胞皱缩、核染色质分布不均,呈早期凋亡趋势; 模型组则无凋亡改变;新风胶囊组滑膜细胞和胸腺淋巴细胞核染色质呈凝块状、边聚呈月芽 状、胞浆内及胞膜外可见凋亡小体或核膜皱缩,呈凋亡早期改变;TIT组及Mh组虽也有 核膜的皱缩、染色质分布不均,但凋亡表现没有XFC组明显。 免疫组织化学检测结果显示:与模型组比较,XFC组滑膜fsL表达显著增加(P<刀习、bcl-2 表达减少,且与 11,7’组、NTIX组比较差异无显著性(Pt.05h与模型组比较,XFC组胸腺 fsL 表达显著增加,bclZ的表达显著减少,NlX组及TIT组上述指标的表达无显著性差异po.05人 与L厂口【组和h T组比较,XF C组胸腺bd2表达显著减少、fsL表达显著增加叶卜0刀5人 流式细胞仪检测结果显示:以MMP法、TUNEL法和Anni Vrpl法分别检测结果表 明,模型组与正常组比较,滑膜细胞、胸腺淋巴细胞凋亡率显著降低,而胃粘膜细胞凋亡率 显著升高o<0.05h 肝C组与模型组相比,滑膜细胞、胸腺淋巴细胞凋亡率显著升高,胃粘 膜细胞凋亡率显著降低广<O.OS);且地C组滑膜细胞、胸腺淋


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