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朱砂根总皂苷抗癌作用及作用机理研究

沈欣  
【摘要】: 朱砂根总皂苷抗癌作用及作用机理研究 恶性肿瘤(malignant tumor)是目前危害人类健康的主要疾病之一,其特征为异常细胞的失控生长,并由原发部位向它处播散,这种播散如无法控制,将侵犯要害器官和引起衰竭,最后导致死亡。其死亡率之高,已成为人类死亡原因的第一位或第二位,为此,癌症的防治和研究正成为全世界日益关注的课题。 现阶段中医防治肿瘤工作已有很大进展,不仅表现在临床疗效的提高,诊治手段的多样化,还体现在理论实验研究的深入,从而挖掘了中医药所蕴藏的科学内涵,用现代理论阐明了中医药治疗机理,使中医药抗癌步入了一个新的阶段。 从中草药中提取有效成分进行抗癌研究,是近年来中医药研究的又一个切入点,并取得了很多成绩。通过和现代医学理论的结合,中药有效成分低毒高效、多途径、多样性的特点得到了进一步的论述。如何挖掘中医药宝库并对中药有效成分进行机理性的研究,以利于开发和临床是科研人员的当务之急。 中药朱砂根(紫金牛科朱砂根Ardisia crenata Sims)始载于《本草纲目》,分布于我国浙江、江西、贵州等地区,被当地多种药志所收载,是一个资源丰富,分布广泛,有临床特效的中草药,八十年代,我研究所抗肿瘤小组在总结民间用药经验的基础上,进行了全面筛选,从中发现朱砂根提取物有明显的抗肿瘤活性,经过多年的研究,已取得了大量的科研成果。 本课题是我所多年来的所进行的朱砂根抗肿瘤活性成分研究课题中一部分,我们通过从朱砂根中提取分离出多种成分,包括皂苷类、香豆素类:矮地茶素(岩白菜素)、去甲矮地茶素、11—O—丁香酰矮地茶素以及密花醌、B-谷甾醇、胡萝卜苷等进行筛选试验。经药理学研究证明朱砂根皂苷 A(Ardisiacrispin A)、朱砂根皂苷 B( Ardisiacrispin B)、朱砂根新苷A(Ardiscrenoside A)、朱砂根新苷B(Ardiscrenoside B),具有较强的抑制肿瘤生长活性,因此将其皂苷类成分提取成为一个新的抗癌药物是我们主要研究目的,而本课题的主要内容是对朱砂根有效成分进行了部分药效学研究和机理探讨。本课题的实验工作包括抑瘤实 WP=5 验和机理研究两部分,抑瘤实验主要是在裸鼠模型上观察朱砂根总皂苷对移植性肺癌和结肠癌的影响作用,以及对体外培养的人肺巨细胞癌(PG)、人肝癌(Bel-7402)、人鼻咽癌(KB)、人结肠癌(HCT)、人宫颈癌(HELA)、人白血病(HL-60)等六种瘤株细胞的生长的抑制作用;机理研究包括对人肺巨细胞癌(PG)、人肝癌(Bel-7402)、人白血病(HL-60)细胞进行体外细胞学研究实验和对小鼠细胞免疫的影响实验。 1、朱砂根总皂苷对荷瘤裸鼠的影响 实验采用裸鼠,接种肺癌和结肠癌瘤株,建立荷瘤模型,以瘤体重量为指标分别观察受试药对两种瘤株的抑制作用,并通过检测动物血相及生化指标观察受试药物的毒性反应。结果表明40mg/kg 朱砂根总皂苷的抑瘤作用显著(P0.05),其抑瘤率为达53-65%,并呈现正相剂量依类型药-效关系。另外朱砂根总皂苷 40mg/kg虽对小鼠体重增长有一定的影响,但经血液及部分血生化指标检查,并无明显异常。 2、朱砂根总皂苷对瘤细胞生长增殖的影响 实验采用体外培养的人肺巨细胞癌(PG)、人肝癌(Bel-7402)、人鼻咽癌(KB)、人结肠癌(HCT)、人宫颈癌(HELA)、人白血病(HL-60)等六种瘤株细胞,观察加入受试药物后对瘤细胞的生长增殖以及细胞形成的影响。结果表明朱砂根总皂苷对六种人体肿瘤细胞的增殖有明显的抑制作用,并随药物浓度的增加其作用逐渐增强, IC50 在7-15ug/ml范围内,镜下观察可见,细胞形态随着药物浓度加大,胞浆内脂滴增多,细胞形态变小,核固缩,给药后48小时,可见细胞死亡,并随作用时间延长和浓度增高,细胞死亡数量增多。 3、朱砂根总皂苷抑瘤作用的机理研究实验 实验采用体外培养的人肺巨细胞癌(PG)、人肝癌(Bel-7402)、人白血病(HL-60)等三种瘤株细胞,观察加入受试药物后对瘤细胞的分裂增殖、细胞存活数量、克隆形成能力、细胞周期、凋亡细胞的影响,结果表明朱砂根总皂苷能明显抑制癌细胞增殖、降低克隆形成能力、明显抑制癌细胞活力、直接杀伤癌细胞、干扰肿瘤细胞周期、诱导其癌细胞凋亡。 4、朱砂根总皂苷对动物细胞免疫水平的影响 实验采用MTT法,通过小鼠淋巴细胞转化实验,观察受试药物对T淋巴细胞 WP=6 和B淋巴细胞增殖的影响作用,结果表明受试药物对动物的细胞免疫水平尚未显现出有升高或抑制作用。 通过以上实验证明,朱砂根总皂苷有明显的抑制动物移植肿瘤生长的药理作用,对体外培养的癌细胞生长也有一定的抑制作用,其抑瘤作用机制和对癌细胞直接的杀伤,以及通过干扰其细胞生长周期、诱导细胞凋亡有着紧密的联系。


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