收藏本站
收藏 | 论文排版

腰痛舒胶囊对骨关节炎软骨保护机理的研究

李平  
【摘要】:骨关节炎(Osteoarthritis,OA)又称退行性关节炎,是关节软骨发生变性,继之邻 近软骨增生、骨化而形成的关节病变,是最常见的老年病。已有的研究重在软骨基质, 随着对其机制研究的深入,逐步认识到软骨细胞损伤,特别是软骨细胞凋亡与增殖平衡 紊乱是其主要机制,因此,对骨关节炎的研究应从软骨细胞着手。本研究即探讨腰痛舒 胶囊骨关节炎软骨保护作用及其机理。 研究目的 1 理论研究:探讨骨关节炎的病机特点 2 实验研究:腰痛舒胶囊对骨关节炎软骨的保护作用以及从软骨细胞凋亡与增殖的角度 探讨机制。 研究方法 1 分析骨关节炎的证候特征,结合历代医家对关节痛的认识,提出骨关节炎的病机特点。 2 按 Hulth 法造模 2 月与 5 月,造成大鼠膝骨关节炎早期与中期模型,分别用高、中、 低剂量的腰痛舒胶囊灌胃治疗 2 月,取材,进行肉眼大体观察与 X 线摄片后,分别取胫 骨平台内侧、股骨髁处软骨,利用光镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞仪、免疫组化, 对软骨组织积分、凋亡率、软骨表面超微结构、以及Ⅱ型胶原的分布进行观察,并通过 对软骨表达的P53、Bcl-2、PCNA、 TGF-β1以及血清NO、IL-1、TNF-α检测,探讨其作 用机理。 3 通过建立软骨细胞体外培养体系,探讨腰痛舒胶囊对软骨细胞凋亡/增殖及其合成代 谢功能的影响。 3.1 利用硝普钠(SNP)、TNF-α诱导软骨细胞凋亡,观察腰痛舒含药血清对软骨细胞凋 亡的影响,采用 Annexin v/PI 双参数法及透射电镜对软骨细胞凋亡进行定量、定性检 测。 3.2 用 MTT 法观察腰痛舒胶囊对正常培养的软骨细胞增殖的影响 3.3 采用同位素标记 3H-TdR、3H-Pro、35S-Na2SO4掺入法测定软骨细胞 DNA 含量、以及 合成胶原、蛋白多糖的功能,观察腰痛舒胶囊对凋亡状态下软骨细胞合成代谢功能的情 况。 研究结果 1 肾虚络阻是骨关节炎的主要病机特点。 2 以补肾通络法组方的腰痛舒胶囊对骨关节炎软骨退变有保护作用。利用 Hulth 法造成 骨关节炎模型,通过比较腰痛舒不同剂量组以及壮骨关节丸对模型关节软骨的外观、X 线影象、组织学评分、软骨表面结构、胶原分布的变化,观察到造模 2 月后模型组大鼠 关节软骨明显失去原有光泽,发黄,可见少量糜烂点,软骨面周围有滑膜增生。5 月后 关节明显粗大,软骨明显失去原有光泽,发黄,色泽变暗淡,软骨表面不规则,周围滑 WP=5 2 腰痛舒胶囊对骨关节炎软骨保护机理的研究 膜明显增生。腰痛舒高、中剂量组关节软骨颜色、光滑度、滑膜增生等均好于模型组。 造模5月X线可见侵蚀性软骨损害、软骨丢失和结构破坏,符合中期骨关节炎的影象 特征,用药组在X线影象上与模型组有明显差异,特别是腰痛舒高、中剂量组均未见明显 的侵蚀性软骨缺损,提示腰痛舒胶囊能明显延缓膝骨关节炎模型中的软骨退变,以高、 中剂量组尤为显著。 HE 染色造模 2 月软骨表层软骨变薄、粗糙,移行层细胞排列不规则,有簇集样增生 现象;5 月后软骨表面有明显凹陷,结构难以分辨,严重的表层消失。按照软骨损伤的 Mankin 法评分,造模 2 月模型组积分显著升高,腰痛舒中、高剂量组较模型组相比明显 下降(P0.01),较壮骨关节丸组相比也明显下降(P0.01),腰痛舒中、高剂量组之间无 显著差异,提示对早期骨关节炎中、高剂量的腰痛舒胶囊对软骨损伤有明显疗效。造模 5 月后模型组软骨损伤积分较造模 2 月明显升高(P0.01),而用腰痛舒高、中、低剂量 的大鼠软骨损伤积分均较模型组明显下降(P0.01-0.05),腰痛舒中、高剂量组且明显 优于对照药壮骨关节丸组。 Masson 染色显示,模型组软骨层胶原着色明显变淡,有的甚至不着色,潮线消失, 有的软骨表层有紊乱的胶原附着。腰痛舒高、中剂量组胶原着色较模型组明显加深,腰 痛舒低剂量组、对照组与模型组胶原着色在镜下无明显差异。 透射电镜观察到造模二月的模型组软骨细胞有凋亡现象,胶原纤维部分增粗, 排列 紊乱,但用药组间在透射电镜的表现上难以区分差异。 扫描电镜观察到正常组软骨表面光滑,似覆盖一层无定形物质,垄形结构完整,无胶 原暴露。造模5 月,软骨表面暴露胶原纤维,排列较不规则,形成流水冲蚀样改变。有的胶 原纤维网增粗、断裂、剥脱甚则翻起,软骨表面可见散在凹塌。腰痛舒的中、高剂量组 软骨表面的损伤较模型组明显减轻。 模型组软骨切片经Ⅱ型胶原免疫组化染色发现:软骨浅层区域染色加深,为深褐色, 着色区颜色不均匀,还可见到一圈淡染区。腰痛舒高、中剂量组均见浅层细胞数增加, 着色加深。提示腰痛舒能促进胶原的合成。 3 通过流式细胞仪和细胞凋亡的检测,模型组软骨凋亡率明显高于正常组,腰痛舒各组 凋亡率明显下降,表明腰痛舒对软骨的保护作用与抑制软骨凋亡有关。同时对造模后大 鼠血清NO、IL-1α、TNF-α进行检测,发现造模后一周的各组大鼠血清NO、IL-1α、TNF- α均浓度较正常对照组显著升高(P0.01),用药二月后,各组大鼠血清 NO、IL-1α、 TNF-α浓度较刚造模后时明显降低(P0.01),提示腰痛舒对软骨凋亡的影响可能与降低 NO、IL-1α、TNF-α有关; 4 造模后在软骨移行层见到 P53、Bcl-2 的表达增加;用腰痛舒后 Bcl-2 的表达有逐渐 增强的趋势,其中以腰痛舒高剂量组表达尤


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 韩祖斌,林华;有关骨关节炎的一些新认识[J];中国矫形外科杂志;1996年03期
2 曹月龙,张戈,石印玉;软骨Ⅱ号方对兔骨关节炎软骨承受压缩载荷的影响[J];医用生物力学;2001年02期
3 吴志宏;骨关节炎的关节软骨细胞外基质的变化[J];实用骨科杂志;1996年04期
4 李茂强,史晨辉,王永明,李宽新;骨关节炎的实验研究现况与进展[J];农垦医学;2004年01期
5 于顺禄,李德达,李世民,刘长明,王毅,王介民;骨性关节炎研究进展[J];中国骨伤;2002年10期
6 何小俊;邱波;刘世清;陶海鹰;方洪松;;透明质酸钠对兔创伤性骨关节炎软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的干预(英文)[J];中国临床康复;2006年44期
7 曾庆馀;骨关节炎的诊断和治疗[J];中华风湿病学杂志;1997年01期
8 朱天缘;早期骨关节炎关节软骨改变的MR成像[J];国外医学.临床放射学分册;2003年04期
9 K.M.Friedrich;T.Shepard;J.S.Babb M.Schweitzer;郭丽君;;膝关节骨性关节炎病人关节对线是否影响软骨T_2值[J];国际医学放射学杂志;2010年04期
10 刘西纺,许鹏,杨富国,白海侠;杜灵注射液治疗骨性关节炎的实验研究[J];陕西中医学院学报;2005年06期
11 郑清波,施杞;蛋白酶在骨关节炎软骨退变中的作用[J];中医正骨;1995年04期
12 彭丹!410011长沙,孙材江!410011长沙,周江南;一氧化氮在实验性骨关节炎软骨细胞凋亡中的作用[J];中华风湿病学杂志;2000年04期
13 蓝旭,刘雪梅,葛宝丰,许建中;豚鼠原发性骨关节炎的生化研究[J];中国骨伤;2001年04期
14 张静,张为;骨关节炎的诊断与治疗进展[J];现代康复;2001年06期
15 ;骨关节炎——痛在关节 病在软骨[J];养生大世界;2004年S1期
16 褚大由;骨关节炎治疗的现状[J];中国矫形外科杂志;2000年07期
17 曹月龙,冯伟,李宗举,唐静芬,石印玉,沈培芝,徐宇;软骨Ⅱ号对骨关节炎兔不同部位PGE_2选择性抑制作用的实验研究[J];中国骨伤;2001年10期
18 吴海山,钱齐荣,顾其胜;关节内注射透明质酸钠预防兔骨关节炎的实验研究[J];中华骨科杂志;1996年01期
19 王万春,王跃,孙材江;骨关节炎滑膜中尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体蛋白的表达[J];湖南医科大学学报;2001年03期
20 邵俊杰;细胞因子与骨关节炎[J];国外医学.骨科学分册;2001年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 董刚;周辉;;金属蛋白酶在骨关节炎软骨内环境中的表达与调控[A];浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十四次学术年会暨省级继续教育学习班论文汇编[C];2008年
2 陈朝蔚;孙剑;李玉梅;陈永强;;阳和汤干预兔骨关节炎软骨中金属蛋白酶-1及基质金属蛋白酶抑制剂-1变化[A];2009第十七届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2009年
3 夏冰;;膝关节镜在骨性关节炎中的应用[A];全国中西医结合学会骨伤科专业委员会第十二次学术年会浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十次学术年会论文汇编[C];2004年
4 周辉;董刚;夏志敏;诸力;彭亮;;MMP-1、MMP-9 mRNA在兔创伤性骨关节炎软骨中的表达[A];2008年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2008年
5 于秀娟;;玻璃酸钠关节腔内注射治疗骨关节炎[A];中华医学会疼痛学分会第七届年会论文摘要集[C];2007年
6 潘浩;胡庆丰;章煜铭;李雄峰;边红光;;补肾壮筋汤对兔早期实验性骨关节炎软骨细胞凋亡及PCNA表达的影响[A];全国中西医结合学会骨伤科专业委员会第十二次学术年会浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十次学术年会论文汇编[C];2004年
7 李凡;马英梅;;骨关节炎关节镜下清理术的围手术期护理[A];全国神经内外科专科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2004年
8 尚桂莲;刘建华;;骨关节炎与心理障碍关系的分析[A];首届全国中青年风湿病学学术大会论文汇编[C];2004年
9 李秀兰;张杨;王云峰;冯俊奇;;改良Hulth模型造成骨关节炎及其机制研究[A];2009第十七届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2009年
10 马生友;;骨关节炎的临床管理[A];中国畜牧兽医学会养犬学分会第十二次全国养犬学术研讨会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李平;腰痛舒胶囊对骨关节炎软骨保护机理的研究[D];北京中医药大学;2004年
2 陈飞雁;威灵仙注射液对骨关节炎软骨表型、IL-1β和组织学影响的实验研究[D];复旦大学;2004年
3 姚振宇;CILP在骨关节炎和类风湿性关节炎中自身免疫作用的研究[D];中国医科大学;2002年
4 张军锋;山西省农村地区症状性OA流行状况调查及影响OA临床疗效的因素分析[D];山西医科大学;2012年
5 张梅;马钱子对骨关节炎中软骨细胞凋亡与增殖的影响[D];北京中医药大学;2003年
6 赵大庆;活性软骨体外长期保存及其应用的研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
7 朱丹;魟鱼软骨多糖的研究[D];辽宁中医学院;2004年
8 欧云生;高选择性NSAIDs对大鼠实验性骨关节炎关节软骨代谢影响的研究[D];重庆医科大学;2004年
9 段圆慧;脂肪因子-visfatin及脂联素在骨关节炎中的作用机制研究[D];北京协和医学院;2011年
10 韩清民;膝骨关节炎软骨病理改变的分子生物学机制及中药干预研究[D];广州中医药大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王晶;骨关节炎和卵巢切除对兔膝关节软骨甲状旁腺激素相关肽表达的影响[D];暨南大学;2001年
2 张铁峰;p53,caspase-3,bcl-2在大鼠骨关节炎中的表达[D];中国医科大学;2004年
3 吴冬;艾灸治疗骨关节炎的实验研究[D];四川大学;2004年
4 余华晨;脱氢表雄酮对兔骨关节炎影响的实验研究[D];浙江大学;2006年
5 曾凯斌;骨关节炎关节滑液中骨桥蛋白与肿瘤坏死因子-α的含量检测及其意义[D];中南大学;2007年
6 陈霞光;VIP在骨关节炎关节软骨中的表达及意义[D];中南大学;2008年
7 王晓蓉;表现有赫伯登结节的未分化脊柱关节病25例临床分析[D];山西医科大学;2009年
8 杨海青;腰椎小关节骨关节炎影像学改变和腰椎间盘退变的相关性研究[D];昆明医学院;2010年
9 金合;膝关节半月板径向移位的MRI观察及临床意义[D];山东中医药大学;2005年
10 刘传芳;一氧化氮对骨关节炎滑膜细胞因子表达的影响及相关关系[D];第一军医大学;2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 郁汉明 (主任医师);如何远离骨关节炎[N];上海中医药报;2003年
2 郑定劲;挽救关节[N];中国医药报;2003年
3 本报记者 王峰;向骨关节炎宣战[N];中国消费者报;2002年
4 娄晓芬 远文 娄思权 翁习生;骨关节炎患者如何自我调整[N];中国消费者报;2002年
5 邱吉芬;患关节炎也应运动[N];中国石油报;2002年
6 陆维巧;骨关节炎不必用消炎药[N];大众卫生报;2004年
7 健康时报特约记者  詹建 何世桢;骨关节炎:早治疗辅以收缩锻炼[N];健康时报;2006年
8 本报记者 王海蕴;骨关节炎药物治疗透视[N];中国消费者报;2002年
9 中南大学湘雅二医院骨科 李桔元;骨关节炎病人的保健处方[N];大众卫生报;2001年
10 刘冬娥;膝部 骨关节炎发病“重灾区”[N];卫生与生活报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978