大柴胡汤加减冲剂防治豚鼠胆红素结石模型的实验研究

【摘要】：胆石病是世界性的常见病、多发病，随着人类年龄及饮食结构的变化，其发病率越来越高，对人类身心健康构成严重的威胁。胆结石临床分胆固醇结石、胆色素结石和混合型结石。我国人群中以胆固醇结石为主。胆色素结石只占10％。近二十年来，治疗胆石病的现代研究日趋丰富，但仍存在许多缺陷：①胆红素结石多为肝内胆管结石，往往位于肝脏深在部位，并多合并有胆管狭窄，手术难度很大。②胆石病术后，肝内胆管结石易残留、复发率高、易致胆道感染。③胆管溶石治疗正在深入研究，常用胆色素结石的灌注溶解药物有二甲基亚砜和其他解聚剂以及离子络合剂，但目前没有发现理想的溶解胆色素钙的药物。中医药非手术疗法的研究有重要意义。 本文研究的大柴胡汤加减冲剂为中药制剂，多年临床证实具有溶排石作用。实验研究已经证明本方药具有显著预防和治疗胆固醇结石的作用。为了进一步观察其对胆红素结石的疗效，探讨其对胆石防治的作用与机理，本课题进行了实验研究。 本文分为文献篇和实验篇两部分。在文献综述部分，就胆石病的发病现状、发病因素及治疗缺陷作了流行病学全面概述。并从中医角度针对历代医家对胆腑生理及病理的认识，作了一个历史性回顾。探讨了胆红素结石成石的现代研究机理。对十年来中医药非手术疗法进行了简要梳理。最后对胆石病与糖尿病等相关疾病的关系作了综述。 在实验研究部分，首先根据国外文献，采用豚鼠经皮下连续注射盐酸洁霉素的方法，成功的建立了豚鼠胆红素结石模型。本模型方法在国内并不多见，尚属先进。其次，本实验设计了大柴胡汤加减冲剂针对豚鼠胆红素结石模型的预防和治疗实验。将本方药按配比分成大、中、小三个剂量组，给动物预防和治疗经口灌服给药。观察疗效并利用生化检测方法测定动物血清及胆汁中钙离子(Ca)、直接胆红素(DBlL)、总胆红素(TBIL)的浓度变化。治疗实验部分，采用鹅去氧胆酸作为阳性对照药，观察及检测同上。再次，采用HE染色法，观察各组动物胆囊上皮细胞形态学变化。最后，选取健康昆明种小鼠，进行急性毒性实验。 实验结果表明，盐酸洁霉素诱发动物胆红素结石模型成石率达到90％。溶排石实验结果提示大柴胡汤加减方对动物体内胆红素结石的溶解和排出具有明显促进作用，并可抑制胆石的形成。治疗实验部分与预防治疗组均以大剂量组显示最佳的治疗效果，可有效的降低胆汁和血清中Ca、DBIL、TBlL的含量。大柴胡汤加减冲剂预防治疗组效果明显优于治疗组效果。中药各组的疗效显著优于阳性对照药。 形态学观察发现，豚鼠连续皮下注射盐酸洁霉素制备胆红素结石模型取得成功。模型组胆囊壁外观粗糙，上皮细胞呈现急性炎细胞浸润，粘膜呈复层化。预防治疗各组胆囊形态学显示：粘膜上皮排列整齐，轻度分化，可见少量炎性分泌物，肌层和间质未见明显炎性浸润。治疗备组胆囊形态学显示粘膜上皮中度分化，排列不规则，有炎性分泌物。肌层和间质可见明显炎性浸润，粘膜下有炎性细胞聚集。但与模型组相比显示一定的修复作用。根据以上实验结果，今后可探索预防胆石病的最佳时机，以期找出预防胆石病的临床指征。本实验提示，胆石高危人群应包括：血糖指标较高者、血清胆固醇较高者、血脂较高者。 急性毒性实验不能测到半数致死量(LD_(50))，得出大柴胡汤加减冲剂最大耐受量为 大柒胡汤加减力防治脉鼠胆红素结石模型的实验研充 170叭g，此剂量为拟推荐临床成人用量的100倍。属于安全范畴。 总之，实验结果说明，大柴胡汤加减冲剂具有防石、溶石、排石等作用，无急性毒性反 应，充分证实了本方所体现的临床有效性和安全胜。