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红花黄酮成分抗血小板作用和作用机理研究

臧宝霞  
【摘要】: 红花(Carthamus tinctorius L.)为菊科红花属植物红花的干燥花。该药为最常用的活血化瘀中药之一,常用于治疗冠心病,心绞痛,脑血栓等心脑血管疾病。二十世纪中期以来,国内外对红花的化学成分及其作用机理进行了大量研究。研究结果表明,红花含黄酮、生物碱、脂肪酸类等化学成分,其中黄酮类成分为其主要水溶性成分,而红花在临床上主要以水煎液入药,故对其水溶性成分的研究十分重要。研究结果表明,红花提取物具抗血栓、抗心肌缺血、扩张血管及降血脂等多方面的药理作用,但由于缺乏化学与药理学研究手段的结合,以往红花药理研究所用的受试药物多为红花粗提物或杂质含量较高的红花黄色素(Safflor Yellow,SY),这些结果对说明红花有效部位药效的客观性较差,因此应以化学与药理学手段相结合进行研究,探索红花的有效部位及有效单体,并研究其作用机理。 SY是红花主要水溶性组份,为多种查尔酮苷混合物,羟基红花黄色素A(Hydroxysafflor yellow A,HSYA)为SY中含量较高的成分,本研究以HSYA做对照品,采用分光光度法对SY进行定量,对不同产地商品红花中SY含量进行了测定,选择最佳产地的红花药材制备SY ,并为红花质控提供一简便准确的方法。本研究受试药物SY为硅胶吸附法制备(简称SY),经初步研究发现其抗血小板活化因子(Platelet Activating Factor ,PAF)活性较市售食品色素SY(简称FSY)强,目前市售FSY为水提醇沉法制备,杂质含量较高,本研究在前期研究的基础上,进一步探讨SY的抗血小板与抗凝血作用,并与FSY进行药效平行比较,初步探索其作用机制。我室曾报道硅胶吸附法制备的SY可竞争性抑制氚标记的PAF与血小板受体的特异性结合,抑制PAF诱发的家兔血小板聚集、5-HT释放及血小板内游离钙浓度的升高,提示SY为红花水溶性抗PAF的有效部位。然而,SY为一混合组分,为进一步探讨红花活血化瘀的作用机理,我们观察了HSYA对[3H]PAF与家兔血小板受体特异性结合的影响,观察该药对PAF介导的家兔血小板及多型核白细胞聚集作用的影响,试图阐明该化合物为一新的PAF受体拮抗剂。 杨梅素(Myricetin, Myr),化学名称为3, 5, 7, 3’, 4’, 5’-六羟基黄酮,是黄酮醇类化合物,为我研究室首次从红花醇提物中分离鉴定,我室曾报道Myr等几种红花醇提物具抗PAF的作用,可抑制PAF介导的兔血小板聚集、5 -HT释放及血小板内钙离子浓度升高,且实验结果表明其抗PAF作用比HSYA强。本研究观察了Myr对[3H]PAF与兔血小板受体特异性结合作用的影响,观察该药对PAF介导的家兔血小板的黏附及多型核白细胞内游离Ca2+浓度升高的影响,试图阐明Myr为一红花抗PAF的有效成分。 本研究以化学与药理学手段相结合进行,以整体、细胞及分子水平的实验探索红花活血化瘀的有效部位及有效单体,并研究其作用机理,试图为红花制剂的进一步开发及临床应用提供依据。主要实验方法与结果如下:


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