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益肾达络饮治疗多发性硬化的神经免疫机制研究

尚晓玲  
【摘要】: 多发性硬化(Multiple Sclerosis,MS)是一种主要累及中枢神经系统(CNS)白质并导致多部位髓鞘脱失的自身免疫性疾病,具有易复发和致残率高的特点,属于神经系统疑难病。可在神经系统中留有病灶,形成不可逆性神经功能障碍,严重影响患者生存质量。本病在北欧及北美较常见,在非洲和东方人中发病率较低。随着诊断手段的不断改进,近年来MS的发病率在我国有明显增高的趋势。 本文以中医和西医对MS的发病机制及治疗概况为背景,通过对与该病有关的文献资料的复习,从中医理论角度探讨多发性硬化的发病机理。从本病发病学、病变定位的不同方面,阐发了肾精不足,脏腑功能失调,复受外邪,络损髓伤的基本病机特点及“益肾,解毒,通络”的治法思路;以著名古方地黄饮子的配伍和功效特点为依据,在此方的基础上创立益肾达络饮作为本病的治疗方剂,并进行初步实验研究。 本研究包括理论探讨和实验研究二部分:多发性硬化的病因病机理论探讨;多发性硬化的实验研究。 研究一多发性硬化的病因病机理论探讨 围绕多发性硬化的发病进程,从病因出发,结合疾病不同发病时期的特点深入探讨病机,阐述不同时期的病机变化。发作期内外因相合,肾精不足、毒邪外侵综合作用于人体,导致督脉、脑、肾同病。缓解期以正虚为主,督脉不充,肾阳不足,脑髓失养。复发期再感邪气或外邪引动旧邪复燃,毒侵督脉,损伤脑髓。以脏腑与经络相结合,提出本病是在肾精不足,脏腑功能失调基础上,湿浊内蕴,浊毒内生,毒损督脉,戕害脑髓,络损髓伤,败坏形体而发病的病机理论。 研究二多发性硬化的实验研究 本实验研究旨在通过制备MS动物模型,在中药干预的前提下,研究其临床症状、体征评价、病理改变观察,为中医药治疗MS提供现代生物学依据。 课题通过经典动物模型实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)小鼠,采用HE染色、免疫组化、ELISA、原位杂交等实验方法,配合光镜、图像分析等细胞定性、半定量检测手段,从神经生物学分子水平探讨EAE病变过程中关键环节细胞因子的变化,并在此基础上观察益肾达络饮对EAE的影响及对免疫功能的调节作用。以期在从基因分子水平探讨EAE发病机制的同时,从治疗和康复角度研究益肾达络饮对EAE的作用机理。 本研究选择SJL小鼠用PLP139-151诱导制备EAE复发-缓解模型。每天观察小鼠神经功能评分,并分别用醋酸泼尼松、益肾达络饮给予灌胃治疗14天,在造模后22天,即症状高峰期取材。通过ELISA、免疫组化、原位杂交等实验检测方法,探讨EAE病理机制。从中枢神经组织内T细胞亚群变化、趋化因子、黏附分子、轴索病变、p38等几方面着重观察了EAE病理改变及中药复方益肾达络饮对EAE的影响,探讨EAE发病机制,从轴索和髓鞘同时明确益肾达络饮对改善神经功能的作用机制。并进一步从神经免疫角度来揭示益肾达络饮对EAE神经细胞及轴索的保护作用,及其潜在的治疗MS的


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