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阳虚质理论及其外周血基因表达谱研究

姚实林  
【摘要】: 目的  构建阳虚质的理论体系;检测阳虚质的外周血基因表达谱,探索其分子机制。  方法  检索600余部古代文献及大量现代文献中有关阳虚质的论述,对阳虚质的概念、成因、特征、诊断、干预方法进行研究,形成阳虚质的理论基础。在临床流行病学调查的基础上,选择8例典型阳虚质和6例典型平和质受试对象,抽取空腹静脉血各10 ml,分离白细胞,提取总RNA,纯化后进行单轮扩增,生物素标记cRNA,用Affymetrix公司生产的U133+2.0芯片检测基因表达谱。以平和质作为对照,用SAM分析阳虚质的差异表达基因,对差异表达基因进行GO注释和pathway分析并进行显著性检验,并对差异表达基因的生物学功能进行评价,从基因水平阐明阳虚质成因、特征及其发病倾向性的机制。  结果  阳虚质成因与禀赋不足、胎养不当等先天因素及社会环境、饮食习惯、疾病影响、医过等后天因素密切相关;阳虚质的特征性表现为寒象(身寒、代谢物澄彻清冷、畏食生冷)、面白体胖及脉微等;在发病倾向上易患虚寒证、寒湿证、血瘀证,对痰饮、肿胀、泄泻、阳痿等具有易患性;对阳虚质的诊断应在研究文献的基础上,结合专家临床经验进行量化诊断;阳虚质的调理原则为用甘温药温补阳气,或用温阳散寒药温补命门阳气,应注意阴阳、精气的互生。  与平和质比较,当fold change2.0或fold change1/2时,阳虚质共有1 739基因位点表达上调,其中表达上调的位点785个,下调的位点957个。按q0.05进行筛选,上调基因有684个位点,下调基因有920个位点。共有267个差异表达的基因位点可进行GO注释或pathway分析且有统计学意义,其中表达上调的位点150个,下调的位点117个,涉及GO通路48个、KEGG通路3个、GenMAPP通路9个。表达上调的基因主要涉及炎症相关基因、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白基因CREB及环磷酸腺苷反应元件调节蛋白基因CREM等,表达下调的基因主要是与遗传信息传递相关的基因及亚甲基四氢叶酸还原酶基因MTHFR等。  结论  阳虚质理论体系对指导临床用药及养生保健具有重要意义。阳虚质表现为多种生理功能紊乱,其分子机制具有一定的复杂性,不宜从某几个基因及其表达产物去探索其分子机制。阳虚质主要表现为以致炎性细胞因子基因表达上调为特征的免疫功能紊乱和遗传信息传递能力下降。 


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