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甘草苷抗抑郁作用的主要药效及机制研究

李海芳  
【摘要】: 抑郁症(depression)属于情感性障碍(affective disorder)。主要临床表现为心境抑郁,丧失兴趣,不能体验生活中的乐趣,精力不足,主观能动性降低或丧失,自我评价较低,精神运动迟缓,甚至产生自杀观念或行为,常伴有某些躯体或生物学症状。抑郁症由于其高发而且难以根治,传统的针对单一环节、单一靶点的抗抑郁药物毒副作用比较大,费用比较高、易反复等特点,所以研究开发新的、安全有效的抗抑郁药物有很重要的社会及经济效益。 甘麦大枣汤是传统的有较好疗效的抗抑郁复方,经过拆方对比试验,以及单味药试验,表明甘草醇提取物有效。有效部位的分离及大孔吸附树脂分离,结合动物实验检测,发现50%乙醇洗脱物具有良好的抗抑郁活性。成分分析表明以甘草苷为主要成分。在前期的一系列预实验基础上,我们欲对甘草苷的药效学及机制进行探讨。 一甘草苷抗抑郁作用的药效学研究 1甘草苷对急性应激所致动物绝望行为的影响 采用小鼠悬尾和小鼠强迫游泳致小鼠行为绝望实验,观察甘草苷对小鼠悬尾不动时间和小鼠游泳不动时间的影响。结果显示甘草苷的40mg/kg、20mg/kg、10mg/kg单次给药能显著缩短小鼠的悬尾不动时间以及小鼠游泳不动时间(p0.05)。 2甘草苷对药物诱发的抑郁动物模型的影响 2.1甘草苷对利血平化小鼠行为变化的影响 利血平通过耗竭脑内单胺类递质诱发动物的综合症状主要包括:体温下降、眼睑下垂和活动抑制。这些症状的发生与利血平降低脑内单胺类递质,尤其是5-HT。给予甘草苷溶液1h后,再给予利血平,观察各组小鼠体温下降的情况(t检验),以及各组运动不能和睁眼不能的动物只数(X2检验)。结果表明,甘草苷各剂量组可显著对抗小鼠利血平腹腔注射所引起的体温下降、显著对抗腹腔注射利血平所引起的运动不能及眼睑下垂,说明该药具有明显的对抗利血平作用。 3甘草苷对慢性应激抑郁模型大鼠的行为的影响 本研究运用慢性不可预知的应激模型(chronic unpredictable stress,CMS)和孤养两种经典方法,利用长期不可预见性的中等强度应激,造成孤养动物抑郁状态。造模期间连续灌胃给药,观察造模后药物对模型大鼠体重、蔗糖偏嗜度及行为学的影响。实验结果显示,模型组大鼠的水平穿越格数、站立次数均减少,中央格停留时间显著延长(P0.01, P0.05);大鼠体重增长值明显减少(P0.01) 蔗糖溶液消耗量明显减少(P0.01);水迷宫实验结果显示CUMS大鼠出现学习记忆障碍。这些表现说明动物表现出抑郁状态、兴趣丧失和快感缺乏,与抑郁症临床诊断中的精神运动改变、兴趣或快感的丧失有一定程度的相似性,提示大鼠抑郁模型的复制是成功的。经过三周连续给药后,与模型组相比,甘草苷的各剂量组能显著增加大鼠体重(P0.01);蔗糖消耗量显著增多(P0.05);open-field实验中大鼠的水平穿越格数、站立次数显著增多(P0.05),中央格停留时间显著缩短(P0.05);水迷宫实验中学习记忆能力得到显著改善(P0.05)。 二甘草苷对抑郁症模型大鼠治疗作用的机理研究 1甘草苷对CUMS大鼠脑内单胺类神经递质的影响 造CUMS模型,采用高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-ECD)对大鼠脑内海马部位的单胺类神经递质及其代谢产物进行检测。结果显示模型组大鼠海马内5-HT、NE含量显著降低,甘草苷中剂量组(20mg/kg)能显著提高5-HT、NE水平(P0.05)。而对DA、DOPAC含量影响不明显。 2甘草苷对CUMS大鼠血清中CRO、IL-1β、IL-2、IL-6含量的影响 造CUMS模型,采用放免法对各组大鼠血清中皮质醇(CRO)、IL-1β、IL-2、IL-6含量进行检测。结果显示,模型组大鼠血清中皮质醇、IL-1β含量明显高于空白对照组。治疗后阳性给药组及甘草苷中剂量组能显著降低IL-1β、皮质醇水平(*P0.05),且阳性给药组能升高IL-2、IL-6水平(*P0.05),而甘草苷大剂量、小剂量与模型组比较差异不显著。


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