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缺铁胁迫下小麦根基因表达的差异及差异cDNA片段的克隆

刘维仲  
【摘要】: 利用mRNA差异显示(Differential Display Reverse Transcript PCR, 简称DDRT-PCR)技术比较了正常供铁和缺铁胁迫下铁高效型小麦(京-411)和 铁低效型小麦(三属麦-3)的基因表达差异。结果表明,缺铁胁迫既能诱导某 些基因的表达,也能抑制一些基因的表达;缺铁胁迫下铁高效型品种(京-411) 的基因表达差异比铁低效型小麦(三属麦-3)明显,说明它们的抗缺铁胁迫能 力确有差异。利用挑选出的差异显示cDNA片段为探针同从铁高效型小麦(京- 411)在正常供铁和缺铁胁迫处理的根尖中提取的总RNA进行Northern杂交, 证明差异片段cDNA2(经克隆后又分为cDNA2-1和cDNA2-2)和cDNA3的表达受 缺铁胁迫的抑制。测序和序列分析结果表明,cDNA3片段同普通小麦编码线粒 体蛋白的、与Cytc形成有关的线粒体基因rpslA有99%同源性,和拟南芥菜等 几种植物的与Cytc形成有关的线粒体基因也有92%以上的同源性;经分析后初 步确定小麦的rpslA基因在缺铁胁迫下减弱表达,Cytc的形成减少,影响呼吸 和ATP的生成。cDNA2-1片段同ATP-binding-transporters家族有强相似性, cDNA2-2片段同dDTP-4,6-葡萄糖脱水酶有一定同源性,推测这两个基因在缺 铁胁迫下有可能减弱表达。


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