收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

适于玉米DNA指纹库构建的多重PCR扩增体系的建立与研究

孙艳美  
【摘要】: 玉米品种DNA指纹数据库的构建在玉米品种纯度及真实性鉴定、品种权登记保护、区试及审定品种质量监控等方面具有重要应用价值,对理清我国玉米种质的血缘关系、杂种优势群划分、种质创新及新品种选育具有重要指导意义。本论文以SSR标记为技术手段,对新设计引物的实验室筛选,多重PCR组合建立的基本过程、普通多重PCR及荧光多重PCR组合的确定等玉米DNA指纹库构建的关键技术环节进行了研究。 本论文形成如下研究结果: (1)利用引物设计软件对入选引物位点进行重新优化设计,并对新设计的引物进行实验室筛选,216对新设计的SSR引物有76对出现扩增失败或带型较弱的现象,其余140对SSR引物扩增效果较好,可以入选为组多重的候选引物。 (2)对入选的引物进行多重PCR组合,探讨了多重PCR构建的基本过程,分析了多重PCR组合建立的主要影响因素,并提出了构建多重PCR组合应该遵循的重要原则。 (3)按照相似的过程,根据每套10个引物(每条染色体1个)的原则,以5个两重或2个三重2个两重的组合模式,将40个核心引物组成了4套普通多重PCR组合。 (4)根据普通多重PCR组合的结果,对2个三重2个两重模式的组合用软件进行引物间相互作用的评估,确定了2套荧光多重PCR组合,其中一套可以进行1次10重PCR扩增1次电泳检测,另一套可以进行4次多重PCR扩增1次电泳检测。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 于新艳;王凤格;赵久然;王玺;易红梅;王璐;郭景伦;匡猛;孙艳美;;适用于玉米DNA指纹库构建的SSR核心引物的重新设计与优化[J];分子植物育种;2007年03期
2 易红梅;王凤格;赵久然;王璐;郭景伦;原亚萍;;玉米品种SSR标记毛细管电泳荧光检测法与变性PAGE银染检测法的比较研究[J];华北农学报;2006年05期
3 盖树鹏;盖伟玲;黄进勇;;SSR与SRAP标记在玉米品种鉴定中的比较研究[J];植物遗传资源学报;2011年03期
4 邵碧英,陈文炳;玉米及其制品中转基因成分的单一PCR及多重PCR检测[J];食品科学;2005年09期
5 王凤格;赵久然;王璐;易红梅;郭景伦;戴景瑞;原亚萍;卢柏山;杨国航;;适于玉米杂交种纯度鉴定的SSR核心引物的确定[J];农业生物技术学报;2007年06期
6 艾呈祥;李国田;张力思;苑克俊;孙山;刘庆忠;;高效检测板栗群体基因频率方法的建立[J];果树学报;2011年01期
7 卢杰;吕媛媛;李杰勤;詹秋文;王敏;;高丹草SSR引物设计及分子遗传框架图谱构建[J];中国草地学报;2009年02期
8 王凤格,赵久然,佘花娣,郭景伦,陈刚,廖琴,孙世贤,陈如明;中国玉米新品种DNA指纹库建立系列研究 Ⅲ.多重PCR技术在玉米SSR引物扩增中的应用[J];玉米科学;2003年04期
9 ;我国农业专家为玉米创建“指纹”[J];吉林农业农村经济信息;2005年01期
10 ;农业专家为玉米创建“指纹”快速鉴定玉米种子[J];吉林农业农村经济信息;2005年02期
11 付玉芹;隋光磊;关淑艳;江源;孙靖然;李鲁华;王丕武;;吉林省主推中晚熟期玉米品种遗传多样性分析(摘要)(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2010年07期
12 刘公秉;季孔庶;;基于松树EST序列的马尾松SSR引物开发[J];分子植物育种;2009年04期
13 王凤格;赵久然;戴景瑞;郭景伦;原亚萍;王璐;易红梅;孙世贤;吕波;;玉米DNA指纹数据库建库标准规范的建立[J];玉米科学;2006年06期
14 朱正梅;赵军华;胡贤女;;SSR指纹图谱技术在玉米种子鉴定中的应用[J];农业科技通讯;2008年10期
15 刘志杰;李如举;曾智勇;周莉;汤德元;李谦;肖超能;;多重PCR反应的影响因素及其优化[J];黑龙江畜牧兽医;2011年13期
16 王宗礼,王栋,程金华,杨波,朱化彬,郝海生,郭燚;鉴别牛早期胚胎性别PCR方法引物的设计与筛选[J];畜牧兽医学报;2005年02期
17 张雪原;赵攀峰;王凤格;孙世贤;王守才;;玉米品种SSR分子标记与田间小区种植一致性鉴定结果的比较[J];玉米科学;2009年01期
18 于新艳;王凤格;赵久然;王玺;匡猛;;SSR标记及其在玉米研究中的应用[J];安徽农业科学;2007年07期
19 付玉芹;隋光磊;江源;王丕武;关淑艳;刘树英;胡欣;;吉林省主推中晚熟期玉米品种DNA指纹库的构建[J];吉林大学学报(理学版);2008年06期
20 王凤格;赵久然;戴景瑞;王璐;易红梅;郭景伦;孙世贤;廖琴;杨国航;;利用SSR标记进行玉米品种一致性检测研究[J];分子植物育种;2007年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈爱芹;;豫西地区玉米中后期病虫害防治技术[A];河南省植物病害研究进展——河南省植物病理学与现代农业学术讨论会论文集[C];2011年
2 叶建人;王华弟;黄贤夫;陈海波;;玉米主要品种对矮缩病抗病性的测定结果[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
3 王桂清;胡明江;;玉米灰斑病菌与不同抗性玉米品种互作后细胞壁降解酶活性的变化[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
4 夏工厂;周宏美;;夏玉米品种高产栽培试验研究[A];河南省植物生理学会三十周年庆典暨学术研讨会论文集[C];2010年
5 朱能宏;万永全;何艳琼;堵文丽;;泸西县玉米测土配方施肥“3414”试验初报[A];云南省“粮食高产创建”省农科院“八百双倍增工程”科技培训暨云南农业科技论坛论文集[C];2009年
6 刘武涛;赵宗林;韩怀奇;;玉米苗期害虫日趋严重的原因分析及控制对策[A];河南省植保学会第九次、河南省昆虫学会第八次、河南省植病学会第三次会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2009年
7 邸垫平;路银贵;苗洪芹;田兰芝;;玉米抗粗缩病遗传分析[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
8 程玉琴;张少文;;赤峰地区玉米适播期的分析及服务[A];第28届中国气象学会年会——S11气象与现代农业[C];2011年
9 孙义祥;袁嫚嫚;郭熙盛;;安徽省玉米专用肥配方设计与效果验证[A];土肥水资源高效利用与农业面源污染防控技术研讨会论文集[C];2011年
10 李红君;陈立杰;徐洪艳;金良;;“玉米香菇套种”技术要点及效益分析[A];辽宁省植物保护学会、辽宁省昆虫学会2011年学术交流研讨会(西安)论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑洪建;玉米叶片保绿性遗传分析和QTL定位[D];上海交通大学;2008年
2 于晓芳;玉米叶片水分利用效率及其相关性状的QTL定位与分析[D];内蒙古农业大学;2010年
3 张志军;玉米真空干燥特性的研究[D];东北大学;2009年
4 张仁和;玉米品种抗旱生理特性与氮素调控机制[D];西北农林科技大学;2011年
5 孙琦;我国不同年代主推玉米品种耐旱抗病性的变化趋势[D];中国农业科学院;2012年
6 于亚军;基于三维离散元法的玉米脱粒过程分析方法研究[D];吉林大学;2013年
7 刘小芳;玉米根系吸水调控机制[D];中国科学院研究生院(教育部水土保持与生态环境研究中心);2013年
8 杨艳秋;多重PCR及微卫星标记技术用于深部病原真菌感染的快速诊断[D];吉林大学;2007年
9 张利达;植物基因相关SSR序列调控及位点多态性研究[D];上海交通大学;2010年
10 Manosh Kumar Biswas;[D];华中农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙艳美;适于玉米DNA指纹库构建的多重PCR扩增体系的建立与研究[D];首都师范大学;2007年
2 佘花娣;基于SSR标记的玉米品种DNA指纹图谱的构建[D];河北农业大学;2004年
3 商伟;玉米SSR连锁图谱构建和粗缩病抗性基因的QTL初步定位[D];山东农业大学;2011年
4 孙娟;基于SSR分析技术对玉米PX群体的遗传多样性分析[D];西北农林科技大学;2010年
5 杜锦;盐胁迫下不同基因型玉米的生物学特性及其遗传规律的研究[D];天津农学院;2010年
6 阳志刚;SSR标记在亲本和孤雌生殖后代鉴定中的应用[D];中南大学;2010年
7 张春宵;玉米耐盐碱鉴定技术体系构建与耐盐碱种质筛选[D];东北农业大学;2010年
8 段鹏飞;河南夏玉米主要病害发生特征及其与气候生态因素关系[D];河南农业大学;2010年
9 颜世磊;转Bt基因玉米对土壤微生物活性和肥力的影响[D];山东师范大学;2011年
10 刘洋;基于SIMETAW模型的玉米蒸散量模拟与应用研究[D];中国农业科学院;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 郑红敏;北京市农林科学院建立玉米品种DNA指纹库[N];农民日报;2009年
2 重庆市农作物品种审定委员会;29个水稻玉米品种纳入重庆种粮直补[N];农资导报;2006年
3 农蓟弥;玉米品种高产竞赛启动[N];农资导报;2007年
4 冯国民;不同玉米品种混种能增产吗?[N];山东科技报;2006年
5 三北种业有限公司郑州分公司技术部;玉米品种蠡玉13高产栽培技术[N];河南科技报;2009年
6 靳生平;塔城市特早熟玉米试种成功[N];塔城日报;2010年
7 省农业厅种子管理站 蔡义东 供稿;介绍一个中熟玉米品种——中科10号[N];湖南科技报;2008年
8 本报记者 王立忠;田间对比选良种[N];铁岭日报;2010年
9 董志水;冀农棉花玉米品种表现不凡[N];河北农民报;2008年
10 本报记者 高永新;从几个优质玉米品种看种子市场(二)[N];经济日报.农村版;2005年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978