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党参炔苷和木犀草素对卵巢颗粒细胞激素分泌的影响及其作用机制

唐晓静  
【摘要】:目的:本课题以党参炔苷和木犀草素为研究对象,观察二者对体外培养的卵巢颗粒细胞增殖分化及分泌功能的影响,进一步探究二者对卵巢颗粒细胞分泌功能影响的作用机制。为临床使用藏党参治疗与雌激素相关的疾病提供科学的实验数据。方法:观察大鼠卵巢颗粒细胞的生长情况,通过CCK-8实验和测定细胞雌二醇分泌量来确定细胞体外培养时间以及最佳给药浓度。分别通过’CCK-8实验、3 β-羟基固醇脱氢酶含量测定和化学发光免疫法来研究党参炔苷和木犀草素对体外培养的卵巢颗粒细胞增殖、分化及分泌功能的影响。并通过阻断细胞中的cAMP信号通路、ERK 1/2信号通路、p38MAPK信号通路、钙离子通道和细胞内蛋白质的合成来探究二者对卵巢颗粒细胞功能影响的作用机制。结果:在卵巢颗粒细胞的体外培养中,确定24 h为细胞与药物的最佳共培养时间;党参炔苷浓度为3.125μg/mL时,显著增加雌二醇的分泌量(p0.01),但不影响细胞的CCK-8实验吸光度值(p0.05)及3β-羟基固醇脱氢酶含量(p0.05);木犀草素浓度为12.5 μg/mL,能显著增加雌二醇的分泌量(p0.01),不影响细胞3β-羟基固醇脱氢酶含量(p0.05),但降低细胞CCK-8实验吸光度值(p0.01)。cAMP通路抑制剂H89和p38MAPK通路抑制剂SB203580能够逆转党参炔苷对卵巢颗粒细胞雌二醇分泌的促进作用(p0.01);木犀草素能逆转依西美坦对卵巢颗粒细胞雌二醇分泌的抑制作用(p0.01), cAMP通路抑制剂H89能够逆转木犀草素对卵巢颗粒细胞雌二醇分泌的促进作用(p0.05)。结论:1、党参炔苷可以有效的促进卵巢颗粒细胞分泌雌二醇,同时不影响细胞正常的增殖分化;其可能是通过影响cAMP信号通路和p38MAPK信号通路来促进颗粒细胞雌二醇的分泌。2、木犀草素可以有效的促进卵巢颗粒细胞分泌雌二醇,不影响细胞的正常分化,但对其增殖有一定的影响;其可能是通过影响cAMP信号通路及影响细胞中与雌二醇合成有关的芳香酶来促进颗粒细胞对雌二醇的合成。藏党参可能用于治疗雌激素降低引起的疾病,如更年期综合症、骨质疏松、女性内分泌紊乱等。


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