一株解磷酵母菌的筛选及其特性研究

【摘要】： 本文从农业废弃物堆肥中筛选出7株解磷能力较强的菌株,并用磷钼蓝比色法在Pikovskaya培养基中测定其解磷量。菌株D5、FL7表现出较好的解磷效果,D5解磷量高达506.93μg/mL,FL7解磷量为436.63μg/mL。各菌株解磷过程中均伴随着发酵液pH值的降低。在形态分类的基础上结合分子鉴定手段分别对D5、FL7的16S rDNA序列和ITS区序列进行解析,初步推断D5为革兰氏阴性细菌Burkholderia fungorum,FL7为毕赤酵母Pichia farinosa。两菌株的解磷能力在此前均未见于报道。 相对于解磷细菌D5,解磷酵母菌FL7对高温、高NaCl浓度、高铵离子浓度和偏碱性环境等具有更好的耐受性能,可在45℃、23%NaCl、6mol/LNH4+、pH9的环境条件下生长。 对筛选得到的解磷酵母菌FL7进行紫外诱变以提高解磷活力,诱变后解磷量可达到478.22μg/mL,在野生型菌株的基础上提高了8.34%。解磷菌FL7能在发酵过程中产生一定量的酸性磷酸酯酶,但未在发酵液中检测到植酸酶活性。通过比较各突变株解磷能力大小与产生酸性磷酸酯酶活性的关系得知,菌株的解磷能力与其产生的磷酸酯酶间呈现较强的相关关系。 高温、碱性、高渗、高铵环境会抑制解磷菌FL7的生长,但NH4+浓度小于1mol/L,NaCl浓度低于5%的铵离子和渗透压环境对菌株FL7的生长量无显著影响。环境温度、pH值、盐浓度、钙离子浓度、铵离子浓度等也会影响FL7的解磷能力。CaCl_2的存在会使菌株解磷能力显著下降。当铵离子浓度低于1.5mol/L时,NaCl浓度低于5%时,解磷能力所受影响较小。 FL7能利用农业废弃物固体菌糠及其酸处理液发酵,生长量可达到108数量级。利用其处理液发酵时的最适氮源选定为0.5%硫酸铵。