收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

大豆子叶节再生体系的优化及转EPSPS基因的研究

王伟  
【摘要】:利用基因工程技术将抗草甘膦基因导入大豆中具有重要的经济意义,草甘磷的广泛使用使克隆草甘磷抗性基因、培育抗草甘磷转基因作物成为研究热点。大豆是公认的难转化的作物之一,其遗传转化体系还不完善,较低的转化效率限制了大豆功能基因组的研究和转基因大豆新品种研发,所以探索建立一套高效的转化途径对于大豆遗传转化有着重要的意义。 本研究在优化大豆子叶节再生体系研究中,筛选出了再生能力强的大豆基因型黑农37、黑农35、合丰35、合丰25;5d苗龄的大豆子叶节再生能力较其他苗龄好;向发芽培养基中添加1~2mg/L的6-BA,不定芽诱导效果好;不定芽诱导培养时加入1.6mg/L6-BA最有利于不定芽的诱导;生根培养中IBA的浓度为0.5~1.0mg/L时,不定根诱导效果好。通过对合丰35和黑农37的草甘膦除草剂抗性实验,确定了合丰35和黑农37筛选剂草甘膦浓度分别为5~7mg/L和7~9mg/L;抑菌剂头孢霉素的有效抑菌浓度为500mg/L。 在优化农杆菌介导的转化体系中,确定了光下共培养3d有利于抗性不定芽的形成;共培养培养基中添加抗氧化剂为400mg/L L-cys和154.2mg/L DTT;伸长培养过程中,合丰35和黑农37伸长培养基中ZT浓度分别为0.5mg/L和1.0mg/L。通过草甘膦除草剂的喷洒和涂抹实验,确定了黑农37和合丰35再生植株的抗性鉴定浓度。 最后,建立了一个稳定可行的农杆菌介导子叶节遗传转化体系,并通过此遗传转化体系将EPSPS基因导入大豆中,得到经过草甘膦抗性和PCR扩增鉴定的阳性再生植株。目前,已获得11株PCR阳性及草甘膦抗性再生植株,合丰35为6株、黑农37为5株,均已结实。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 谢一青,李志真,王志洁,潘丽娥,傅莲英;不同磷效率基因型大豆根际微生物特性研究[J];江西农业大学学报(自然科学版);2003年04期
2 丁玉川;陈明昌;程滨;李丽君;张海生;;北方春大豆磷高效基因型的筛选[J];植物营养与肥料学报;2006年04期
3 王聪;罗冬梅;徐颖利;李志刚;乌仁图雅;萨如拉;;不同磷效率基因型大豆的筛选[J];内蒙古民族大学学报(自然科学版);2007年02期
4 王萍;郭永来;高世庆;马有志;程宪国;李文滨;;基因枪法将GmDREB基因导入大豆的研究[J];大豆科学;2007年03期
5 姬月梅;张银霞;宋晓华;;农杆菌介导大豆遗传转化的研究进展[J];农业科学研究;2009年01期
6 孙文丽;刘昱辉;吴元华;;大豆再生体系的研究进展[J];安徽农业科学;2008年16期
7 童学军,严小龙,卢永根,年海,郑少玲;广东大豆地方种质磷效率特性研究 Ⅰ.大豆基因型磷效率特性差异及其与土壤有效磷含量的关系[J];土壤学报;1999年03期
8 童学军,卢永根,严小龙;广东大豆地方种质磷效率特性研究不同大豆基因型冠部、根部磷效率特性差异及其与植株磷效率特性的关系[J];中国油料作物学报;2000年04期
9 乔云发;韩晓增;苗淑杰;;大豆利用难溶磷源基因型差异(英文)[J];大豆科学;2007年04期
10 蔡妙珍;邢承华;刘鹏;徐根娣;吴韶辉;何璠;;大豆根尖边缘细胞和粘液分泌对铝胁迫解除的响应[J];植物生态学报;2008年05期
11 崔佳欣;孟军;朱荣胜;;大豆表达序列标签(ESTs)研究进展[J];东北农业大学学报;2009年02期
12 张彦丽;;不同磷效率大豆基因型根形态构型对低磷胁迫的响应[J];中国农学通报;2010年14期
13 张彦丽;贾健辉;赵月琪;谷思玉;许景钢;;大豆苗期耐低磷筛选指标的研究[J];安徽农业科学;2010年10期
14 张彦丽;贾健辉;赵月琪;谷思玉;许景钢;;不同大豆基因型苗期磷效率特性研究[J];安徽农业科学;2010年12期
15 于海秋;彭新湘;严小龙;曹敏建;;缺磷对大豆叶片显微结构及光合作用的影响[J];吉林农业大学学报;2006年02期
16 龚学臣;季静;王罡;王萍;;基因枪对大豆进行PSY基因的转化研究[J];大豆科学;2006年02期
17 张东旭;张洁;商蕾;张蕴伟;杨春燕;王冬梅;;大豆胚尖再生体系的研究[J];河北农业大学学报;2008年04期
18 常玮;赵雪;李侠;邱波;韩英鹏;縢伟丽;李文滨;;大豆EST-SSR标记开发及与Genomic-SSR的比较研究[J];中国油料作物学报;2009年02期
19 龚元亚;代其林;杨娟;鲜先毅;孙英坤;谢琳;王劲;;用根癌农杆菌介导EPSPS基因遗传转化拟南芥的研究[J];吉林农业;2011年04期
20 金剑;王光华;陈雪丽;刘晓冰;Stephen J Herbert;;Biolog-ECO解析不同大豆基因型R1期根际微生物群落功能多样性特征[J];大豆科学;2007年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王萍;王罡;季静;;不同菜用大豆基因型的组织培养与植株再生[A];中国遗传学会植物遗传与基因组学专业委员会2005年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
2 田江;廖红;严小龙;;不同大豆基因型酸性磷酸酶活性变化的研究[A];第八届全国青年土壤暨第三届全国青年植物营养与肥料科学工作者学术讨论会论文集[C];2002年
3 杨振明;尤江峰;;铝诱导耐铝大豆基因型柠檬酸分泌特性的研究[A];2005年全国植物逆境生理与分子生物学研讨会论文摘要汇编[C];2005年
4 杨中宝;杨振明;;大豆铝锰相互作用关系的初步研究[A];2006年中国植物逆境生理生态与分子生物学学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年
5 魏守辉;李香菊;张朝贤;黄红娟;崔海兰;;抗草甘膦杂草发生现状及转基因大豆田草害治理策略[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年
6 童学军;严小龙;卢永根;;大豆基因型冠部、根部磷效率特性[A];青年学者论土壤与植物营养科学——第七届全国青年土壤暨第二届全国青年植物营养科学工作者学术讨论会论文集[C];2000年
7 许鹏;易新萍;盖钧镒;喻德跃;;农杆菌介导gaga2基因转入大豆的初步研究[A];江苏省遗传学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年
8 邝瑞彬;廖红;严小龙;;施磷对不同大豆基因型磷营养和固氮特性的影响[A];第八届全国青年土壤暨第三届全国青年植物营养与肥料科学工作者学术讨论会论文集[C];2002年
9 徐芸;袁凤杰;徐惠超;关荣霞;朱文英;刘章雄;常汝镇;曲延英;邱丽娟;;浙春3号及其亲本和后代品系抗花叶病毒病基因型的分子标记辅助鉴定[A];全国作物生物技术与诱变技术学术研讨会论文摘要集[C];2005年
10 赖怀;于智卫;沈春鹏;沈宏;;不同大豆基因型对难溶性磷的吸收研究[A];土壤资源持续利用和生态环境安全——中国土壤学会第十一届二次理事扩大会议暨学术会议论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨超;大豆植株再生和遗传转化技术体系的研究[D];南京农业大学;2009年
2 马淑梅;大豆硫素代谢与蛋白质功能组分的关系[D];东北农业大学;2010年
3 张军;我国大豆育成品种的遗传多样性,农艺性状QTL关联定位及优异变异在育种系谱内的追踪[D];南京农业大学;2008年
4 赵特;一种抗草甘膦基因的发现和抗草甘膦转基因水稻的培育[D];浙江大学;2008年
5 刘明;大豆子房原位转化法的建立与应用[D];大连理工大学;2011年
6 童旭宏;抗草甘膦棉花突变体R1098的选育及其抗性机理研究[D];浙江大学;2011年
7 程浩;大豆异黄酮合酶,黄烷酮3-羟化酶基因SNPs与种子异黄酮含量及抗逆性的关联分析[D];南京农业大学;2008年
8 田芳;饲料及原料中转基因大豆检测技术的研究[D];内蒙古农业大学;2011年
9 李少骞;转基因植物外源基因的检测方法及整合位点的研究[D];湖南农业大学;2002年
10 汪自强;春大豆雄性不育系S903B的遗传特性研究[D];浙江大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王伟;大豆子叶节再生体系的优化及转EPSPS基因的研究[D];天津大学;2012年
2 王婉婉;大豆组织培养体系的优化及EPSPS遗传转化的研究[D];天津大学;2010年
3 岳岩磊;EPSPS基因直接作为大豆遗传转化筛选标记的研究[D];哈尔滨师范大学;2012年
4 李海芬;改良的大豆子叶节转基因方法[D];苏州大学;2011年
5 崔姗姗;农杆菌介导大豆子叶节转化体系优化及转植酸酶基因大豆功能鉴定[D];河北科技师范学院;2012年
6 李伟;大豆规模化转基因体系构建[D];河北科技大学;2011年
7 田巍;大豆子叶节再生体系的建立及转化GAFP基因的研究[D];扬州大学;2011年
8 张彪;大豆灰斑病抗性鉴定方法及转BnERF104大豆的灰斑病抗性研究[D];中国农业科学院;2011年
9 胡小丽;农杆菌介导GmWRKY21基因转化大豆的研究[D];浙江师范大学;2011年
10 杨海英;转录调控基因GmGT-2A转化大豆与体系优化研究[D];浙江师范大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 通讯员 钟跃;转基因食品秘而不宣进广州[N];北京科技报;2000年
2 德君;生物安全转基因带来的新疑问[N];农民日报;2000年
3 记者 章迪思;寻找中国人自己的“基因手术”方法[N];解放日报;2009年
4 武爱英;二连浩特局把关服务并举[N];中国国门时报;2009年
5 何美芸;转基因食品:工业“绿色革命”的幌子[N];中国经济导报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978