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灰树花胞外多糖预防化学性肝损伤的研究

朱慧  
【摘要】:本论文以灰树花胞外多糖(GFP)为主要研究对象,对其进行了三方面的研究。1,应用苯酚-硫酸法测定中性糖的含量,通过超滤-渗滤法除去GFP中的小分子杂质,并通过对GFP进行超滤处理,将其分为三个分子量范围,分别命名为GFP-1(MW10KD-30KD),GFP-2(MW30KD-50KD)和GFP-3(MW50KD)。2,通过对L-02肝细胞进行体外抗CCL4化学性肝损伤的研究,确定具有较好保护肝脏活性的组分,对丙氨酸氨基转移酶,天门冬氨酸氨基转移酶进行测定,检测细胞周期,测定TNF-α和CYP2E1蛋白量的表达,荧光显微镜检测ROS的荧光强度,以及HE染色等一系列的相关试验,对灰树花胞外多糖进行了初步的抗CCL4化学性肝损伤机理的研究。3,通过建立的CCL4急性肝损伤模型对GFP抗CCL4化学性肝损伤进行小鼠体内试验研究,通过对与肝损伤相关的实验指标的检测,来确定GFP抗CCL4化学性肝损伤的效果,血清中的检测指标有:丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、过氧化氢酶、一氧化氮、血脂相关指标;肝组织中的检测指标有:丙二醛、肝糖元、乳酸脱氢酶。还通过HE染色进行了组织学观察,并对肝脏脂肪酸进行了气相色谱分析。 通过GFP抗CCL4化学性肝损伤的体外和体内实验的研究,实验结果表明,GFP-2具有较好的保护肝细胞不受CCL4损伤的作用,而且GFP-2对CCL4化学性肝损伤的保护作用主要表现在防止肝细胞氧化的作用上,通过降低TNF-α和CYP2E1蛋白量的表达,ROS的荧光强度,以及在Vc之后,肝损伤指标也相应降低更加可以说明GFP-2对CCL4化学性肝损伤的保护作用是与GFP-2的抗氧化作用密切相关的。花生四烯酸,EPA等不饱和脂肪酸对人体有很重要的作用,通过对肝脏脂肪酸进行了气相色谱分析,GFP可以保护肝细胞中的不饱和脂肪酸不被氧化,而且通过相应动物试验指标的测定,也可以说明这个结论。总体结论说明,灰树花胞外多糖对CCL4所致的化学性肝损伤具有保护作用。


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