收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

中药重楼皂苷的分离、结构鉴定及生物转化的研究

刘翊  
【摘要】: 本论文研究了新月弯孢霉(Curvularia lunata 3.4381)生物转化重楼甾体皂苷单体PI的生物反应,得到的新化合物以达到减毒作用。考察了重楼皂苷提取分离纯化的最佳工艺以及重楼皂苷的体外药理活性,并讨论了重楼皂苷化合物的结构-药效关系,重点从可转化甾体化合物的菌种中筛选出新月弯孢霉,该菌可对重楼皂苷PI选择性的进行水解,从而到达减毒的目的。此外对新月弯孢霉的培养基进行优化。 首先,通过正交试验确定重楼总皂苷的提取工艺,同时对比了7种不同型号的大孔吸附树脂的静态吸附条件,确定采用树脂的型号。重楼总皂苷的提取工艺为在微沸状态下,4倍量的70%乙醇,2h/次回流提取3次。经过验证实验,皂苷提取率达到80.80%,工艺稳定,重现性好。通过静态吸附条件的考察确定选用HP-20型号树脂,并确定了该树脂的动态条件pH自然的条件下,按3:1的上样量以2 Bv/h流速进行吸附,吸附完全后先用10%-20%的乙醇先洗脱除杂,再用70%的乙醇洗脱得到重楼总皂苷。 其次,通过提取出来的6种甾体类皂苷,讨论了重楼皂苷化合物的结构-药效关系。皂苷元C-3位连接糖链时,糖的数目、连接位置及组成类型对其生物活性都起着至关重要的作用,其中化合物1-4是由葡萄糖和鼠李糖组成糖链,末端鼠李糖连接在葡萄糖的2位时,细胞毒活性明显强于连在4位上;此外,从组成皂苷的糖的类型上看,糖链数目相同的情况下,含有鼠李糖较多的皂苷细胞毒活性更强一些。 再次,重点对可转化重楼皂苷PI的菌种进行了筛选了。选用了黑根酶、赭曲霉、雷斯青霉、简单节杆菌和新月弯孢霉对重楼皂苷PI进行生物转化,通过HPLC发现新月弯孢霉可对重楼皂苷PI发生生物转化反应,转化产物经过C-NMR、H-NMR确定水解掉了C-3鼠李糖。通过药理作用证明了产物较重楼皂苷PI细胞毒活性有明显的降低。 最后,通过单因素试验对新月弯孢霉摇瓶转化培养基优化,确定了转化培养基的最适碳源为蔗糖,最适氮源为酵母膏和硫酸铵。通过响应面确定培养基优化条件,即蔗糖浓度为7.847g/L;酵母膏的浓度为1.969g/L;硫酸铵的浓度为4.824 g/L;玉米浆的浓度为11.81 g/L,拟合出最佳的转化率为77.18%。通过正交试验确定了新月弯孢霉的发酵转化条件,即在pH 6.3的状态下,按2%接种量,装液量为250 mL三角瓶装液40 mL,0.2%的底物浓度,转化温度为30℃,采用HP-β-CD的投料方式进行转化。经验证,最终的转化率可达88.13%。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 卢定强,韦萍,周华,贾红华,欧阳平凯;生物催化与生物转化的研究进展[J];化工进展;2004年06期
2 张志军,温明浩,王克文,王星,王鹏,许平;核苷酸生产技术现状及展望[J];现代化工;2004年11期
3 王净;许建和;田晶;许国旺;;生物转化对甲基苯甲酸合成对苯二甲酸的研究[J];生物加工过程;2005年04期
4 全波;马百平;冯冰;熊呈琦;王永泽;康利平;张洁;阎浩林;;米曲霉(Aspergillus oryzae)对原薯蓣皂苷的生物转化(英文)[J];中国天然药物;2006年05期
5 吴薛明;何冰芳;;耐有机溶剂极端微生物及酶类与天然产物的生物转化[J];中国天然药物;2007年04期
6 徐敬尧;张明旭;;绿色煤炭——煤炭的生物降解转化[J];中国煤炭;2009年03期
7 孙韦强,尹光琳;腈类化合物生物转化和应用的进展[J];微生物学通报;1989年03期
8 肖炘;陈洪章;李佐虎;;流程密集化纤维素制酒精过程中的影响因素分析[J];无锡轻工大学学报;1999年05期
9 张媛媛,吴汝林,刘均洪;生物转化在化学工业中的应用及前景[J];化学工业与工程技术;2002年06期
10 李福,王普,李荣贵;有机溶剂/水两液相体系中甾体激素的生物转化[J];生物技术;2004年03期
11 严春艳,于荣敏;植物生物转化技术与中药活性化合物研究[J];食品与药品;2005年10期
12 谢春锋,娄红祥;天然产物的生物转化[J];天然产物研究与开发;2005年05期
13 胡海峰;朱宝泉;;微生物在药物开发中的应用[J];中国天然药物;2006年03期
14 李厚金;蓝文健;蔡创华;周毅频;林永成;;海洋细菌对柠檬烯的生物转化及萜类产物鉴定[J];分析化学;2006年07期
15 周华;姚忠;孙广海;韦萍;;双水相体系酶法合成L-苯丙氨酸的研究[J];化学反应工程与工艺;2006年02期
16 王煜丹;程桂广;余旭亚;王亚明;;生物转化在天然产物化学中的研究进展[J];化学与生物工程;2010年02期
17 吴薛明;许婷婷;储建林;何冰芳;;黄酮类化合物酶法糖基化修饰的研究进展[J];中国天然药物;2010年05期
18 臧玉红;邵建明;;柑橘果皮生物转化的研究进展[J];承德石油高等专科学校学报;2011年01期
19 杜毅;张兆斌;曾义勇;陈洪;;发酵法制备天然香兰素的研究[J];香料香精化妆品;2011年03期
20 周晓云,张西宁,叶信晓,朱雪英;柠檬酸发酵废渣生物转化蛋白饲料的研究[J];浙江工业大学学报;1994年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱红云;李淼鑫;杨东辉;刘树林;蔡少青;库宝善;;人体肠道菌群转化亚麻子粕的生物转化研究[A];第十届全国药用植物及植物药学术研讨会论文摘要集[C];2011年
2 沈学怀;马海田;;脱氢表雄酮(DHEA)在TM-3细胞中的生物转化及其对类固醇代谢相关酶表达的影响[A];中国生理学会消化内分泌生殖代谢生理专业委员会2011年消化内分泌生殖学术会议论文摘要汇编[C];2011年
3 王龙耀;李卫星;邢卫红;;生物转化过程中的膜分离技术[A];第4届全国医药行业膜分离技术应用研讨会论文集[C];2007年
4 程庆岭;;利用生物转化工程提高乳锌含量的研究[A];中国营养学会第二届营养资源学术会议论文汇编[C];1989年
5 陈奇;胡扬;薛佳;韩雪;;肠内菌对中药有效成分生物转化的研究进展[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
6 章克昌;卜华祥;;药用真菌的生物转化[A];首届药用真菌产业发展暨学术研讨会论文集[C];2005年
7 陆丛笑;岳旺;;MAO-B抑制剂催化MPTP生物转化的体外实验及吲哚醌的干预作用研究[A];第八届全国生化药理学术讨论会暨第七届Servier奖颁奖大会会议摘要集[C];2003年
8 张莉;魏平平;袁堃;石峰;齐刚;;红景天苷的来源、提取分离与合成[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
9 尹成日;;微生物转化人参总皂苷的研究[A];第八届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2009年
10 柯家耀;;蘑菇堆料过程的生物转化及条件控制[A];全国第6届食用菌学术研讨会论文集[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 黄贤校;毛重楼、北重楼和五指莲的化学成分及其抗肿瘤活性研究[D];天津大学;2010年
2 康东周;人参皂苷微生物转化及其抗肿瘤活性研究[D];延边大学;2010年
3 李春江;重楼皂苷抗乳腺癌及免疫调节作用研究[D];东北师范大学;2011年
4 冯冰;甾体皂苷生物转化及其特异性糖苷酶的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
5 刘琳;哈茨木霉生物转化盾叶薯蓣中的皂苷及其产物提取分离[D];大连理工大学;2010年
6 刘庆超;几种天然活性皂苷及其类似物的合成及生物活性的初步评价[D];中国海洋大学;2010年
7 邬建国;槐角异黄酮生物转化及其产物抗乳腺癌细胞活性研究[D];华中科技大学;2011年
8 万海清;城市垃圾渗沥液—烟气脱硫体系中高浓度SO_4~(2-)的生物转化[D];四川大学;2004年
9 刘连碧;柔红霉素高产菌种选育及其生物转化的研究[D];上海医药工业研究院;2000年
10 袁玉兰;富铁酵母工程菌的构建及细胞中铁的生物转化、分布和结合状态的研究[D];四川大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 钮利喜;工程菌生物转化D-型氨基酸的研究[D];山西大学;2004年
2 李瑞娟;球形红细菌生物转化槲寄生指纹图谱及化学成分的研究[D];山西医科大学;2010年
3 张晓;重楼皂苷Ⅰ对肝癌细胞Bel-7402生长抑制作用的实验研究[D];福建中医药大学;2010年
4 魏超;产皂苷的重楼内生真菌的分离、鉴定及退化研究[D];四川农业大学;2011年
5 季晓杰;不同种重楼药材的品质研究[D];延边大学;2010年
6 梁艳;两种植物培养体系对4-苯基香豆素的生物转化研究[D];暨南大学;2011年
7 王亮;利用重组F26G实现呋甾皂苷向螺甾皂苷生物转化的研究[D];沈阳药科大学;2001年
8 徐海燕;重楼皂苷I抑制卵巢癌细胞增殖和转移、诱导其凋亡分子机制的初步探索[D];浙江中医药大学;2012年
9 门玉芝;重楼克感滴丸药效学效应研究[D];山东中医药大学;2012年
10 牛长满;杏鲍菇栽培料的生物转化和高产料处理因子机理的研究[D];山西农业大学;2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王松岳;重楼[N];中国花卉报;2005年
2 彭尧;药材重楼结束盘整价格将升[N];中国医药报;2008年
3 记者 李颖 通讯员 黄树艾;生物转化生产L-丝氨酸中试成果通过鉴定[N];科技日报;2004年
4 本报实习生 刘雪峰;连锁网吧推行:烟锁重楼[N];科技日报;2004年
5 马晓东;娄烦县——胡骑汉将重楼烦[N];山西日报;2003年
6 省农科院药用植物研究所 张金渝;重楼病虫害防治与加工[N];云南科技报;2006年
7 邓理有;清热解毒七叶一枝花[N];中国中医药报;2000年
8 刘 斌;皂苷--中药化学(十九)[N];中国中医药报;2004年
9 通讯员 徐寿伟;中草药种植成为云龙新兴产业[N];大理日报(汉);2008年
10 张骁;商陆属植物皂苷药理研究进展[N];中国医药报;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978