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Pim-1在雄激素非依赖性前列腺癌中的表达

李博  
【摘要】:第一部分Pim-1在雄激素非依赖性前列腺癌动物模型中的表达 目的:研究在前列腺癌动物模型由雄激素依赖到雄激素非依赖这一过程中Pim-1在基因及蛋白水平表达的变化。 方法:采用人类LNCaP前列腺癌细胞系,于BALBc裸鼠上分别建立雄激素依赖性、去势3天及雄激素非依赖性前列腺癌原位肿瘤模型,然后首先采用基因芯片技术筛选差异基因;然后采用RT-PCR、QPCR和免疫组织化学及等实验方法检验三种肿瘤组织间Pim-1在mRNA和蛋白质水平的差异。 结果: (1)基因芯片结果:Affymetrix表达谱芯片技术检测结果显示雄激素非依赖组肿瘤组织Pim-1的表达高于雄激素依赖组肿瘤组织,差异倍数为2.30771;去势3天组肿瘤组织与雄激素依赖性前列腺癌肿瘤组织之间无明显差异。 (2) RT-PCR结果:琼脂糖凝胶电泳结果显示雄激素非依赖组前列腺肿瘤组织的Pim-1表达量高于雄激素依赖组前列腺肿瘤,两者之间的差异有统计学意义(P0.01),两者约有1.93倍的差异;去势3天组肿瘤组织Pim-1的表达量与雄激素依赖组前列腺肿瘤组织之间无明显差异(P0.05);与基因芯片筛查结果相符。 (3) QPCR结果:采用2-△△Ct相对定量方法分析数据,雄激素非依赖组前列腺肿瘤组织中Pim-1的mRNA表达量明显高于雄激素依赖组肿瘤,两者约有3.01倍的变化差异(P0.01,两者之间的差异有统计学意义);去势3天组肿瘤组织Pim-1mRNA表达量亦高于雄激素依赖性前列腺肿瘤,两者约有2.05倍的变化差异(P0.05,两者之间的差异有统计学意义); (4)免疫组织化学结果:采用Image-Pro Plus (IPP)图像处理软件对免疫组化图片进行分析,雄激素非依赖组肿瘤组织Pim-1蛋白的表达量明显高于雄激素依赖组,两者之间的差异有统计学意义(P0.01);去势3天组肿瘤组织Pim-1蛋白的表达量与雄激素依赖组屋明显差异(P0.05),与前述结果大致相符。 结论:在雄激素非依赖性前列腺肿瘤中Pim-1的表达量高于雄激素依赖性前列腺肿瘤,提示Pim-1在前列腺癌由雄雄激素依赖向雄激素非依赖这一变化过程中起着一定的作用。第二部分Pim-1在人组织雄激素非依赖性前列腺癌中的表达 目的:研究在人体内前列腺癌由雄激素依赖到雄激素非依赖这一过程中Pim-1在蛋白水平的表达变化。 方法:实验标本选用天津医科大学第二医院2009年1月至2010年12月手术切除的22例前列腺癌病人(其中前列腺增生组8例,雄激素依赖性前列腺癌与雄激素非依赖性前列腺癌患者各5例,前列腺癌经去势治疗后组患者4例),所有病例经临床资料及病理证实。取实验标本组织制作石蜡切片,采用免疫组织化学染色检测雄激素非依赖性前列腺癌组织与雄激素依赖性前列腺癌组织中AR、Pim-1的表达,采用Image-Pro Plus (IPP)图像处理软件对免疫组化图片进行分析。 结果: (1)人雄激素非依赖性前列腺癌AR蛋白的表达量明显高于雄激素依赖性前列腺癌,两者之间的差异有统计学意义(P0.01)。 (2)人雄激素非依赖性前列腺癌Pim-1蛋白的表达量明显高于雄激素依赖性前列腺癌,两者之间的差异有统计学意义(P0.01);前列腺增生组织Pim-1蛋白的表达量低于雄激素依赖性前列腺癌,两者之间的差异有统计学意义(P0.01);去势治疗后早期前列腺癌组织Pim-1蛋白的表达量与雄激素依赖性前列腺癌两者之间的差异无统计学意义(P0.05),与动物模型实验结果相一致。 结论:在人体内雄激素非依赖性前列腺癌中Pim-1的表达量亦高于雄激素依赖性前列腺癌,提示Pim-1在前列腺癌由雄雄激素依赖向雄激素抵抗这一变化过程中起着一定的作用。


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