肝硬化及肝细胞癌患者肠道微生态组成和结构的初步分析

【摘要】：目的作为人类常见的消化系统疾病之一,肝硬化是一种由多种肝损害因素导致的慢性进行性肝病,目前在我国导致肝硬化的因素以病毒性肝炎最为多见,其余病因包括长期大量摄入酒精、自身免疫性肝病等。在肝硬化的后期,即失代偿性肝硬化期,可出现多种并发症,如上消化道出血、腹水、肝性脑病、感染等,严重者预后差。肝细胞癌是我国常见恶性肿瘤之一,以其高死亡率成为了我国社会及医疗的沉重负担,且多数肝细胞癌发生于肝硬化基础上。肝脏通过“肠-肝轴”与肠道紧密相连,肠道菌群的数量、组成和分布与肝脏状况相互影响,密不可分。肝病患者的肠道微生态可发生紊乱,而肠道菌群的数量和结构也可反过来作用于肝脏,进一步影响肝病的发生和转归。近年来,越来越多的研究利用分子生态学的方法探讨了肝硬化患者肠道菌群的组成结构变化特点,而对肝细胞癌患者肠道微生态特点的研究相对较少。本文采用高通量16S rDNA测序技术及生物信息分析方法,对人类肝硬化和肝硬化基础上肝细胞癌肠道菌群结构的差异和特征进行了分析。内容比较和分析肝硬化及肝硬化基础上肝细胞癌患者远端肠道菌群的差异和特点,初步探讨肝硬化患者发生肝细胞癌与肠道菌群组成和结构变化的关系。方法本研究收集2015年12月至2016年5月天津市第三中心医院肝内科住院的慢性肝病患者35例,包括20例肝硬化患者(肝硬化组)和15例肝硬化基础上肝细胞癌患者(肝细胞癌组)。收集患者粪便标本,提取其肠道细菌总DNA,采用罗氏(Roche)454测序技术对16S rDNA V3-V6可变区测序,并进行生物信息分析(物种分类、丰度分析及多样性分析),探讨肝硬化基础上肝细胞癌患者肠道菌群的变化特点。结果属种定量及组成分析发现,肝硬化和肝硬化基础上肝细胞癌患者粪便菌群的组成和结构对比有明显差异。在放线菌门的细菌中,肝硬化组肠道菌群中放线菌门和双歧杆菌属细菌所占比例较肝细胞癌组显著偏高;在拟杆菌门的细菌中,肝硬化组理研菌科细菌所占比例明显较肝细胞癌组低;在厚壁菌门的细菌中,和肝细胞癌组相比,肝硬化组梭菌属细菌所占比例明显偏高,而Christenellaceae科所占比例明显偏低。结论与单纯肝硬化患者相比,肝硬化基础上发生肝细胞癌患者肠道菌群的组成有显著差异。本研究对肝硬化及肝硬化基础上肝细胞癌患者肠道微生态的差异和特点进行了结构和组成上的初步分析,今后还需要进一步研究和探讨。