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中药神经保护作用的离体实验研究——“中药脑脊液药理学”实验方法的提出

梅建勋  
【摘要】: 目的 目前应用“血清药理学”方法对中药进行药理研究特别是药效研究倍受关 注,但考虑到血脑屏障的存在,神经胶质细胞和神经元的微观生存环境和屏障以 外的其它体细胞有很大差别,故本实验拟通过观察含有中药清脑益智方的血清和 脑脊液(以下均简称中药血清和中药脑脊液)对于血脑屏障以内的细胞-经元 和星形胶质细胞的影响,试图从中优选中药作用于中枢神经系统的最佳实验方 法。 方法 家兔在口服中药复方清脑益智方水煎液后,血清和脑脊液分别被收集,然 后按5%、10%、20%浓度加入至体外培养鼠脑皮层星形胶质细胞和神经元培养 液中,以台盼蓝染色、乳酸脱氢酶和MTT试验为指标观察正常血清、中药血清、 正常脑脊液和中药脑脊液对于上述两种细胞的死亡率和细胞活性的影响。 结果 1.星形胶质细胞:正常血清组和中药血清组与空白对照组比较,细胞死亡 率明显升高、细胞孵育液中乳酸脱氢酶含量明显升高、MTT试验OD值明显下 降,正常血清组与中药血清组之间比较没有明显差异,说明正常血清和中药血清 对星形胶质细胞产生了明显的毒害作用,似乎这种毒性与血清本身有关,与中药 的介入无关;而正常脑脊液和中药脑脊液与空白对照组比较,没有明显差异。2. 皮层神经元:实验结果同上,正常血清和中药血清都对细胞产生了毒害作用,而 正常脑脊液和中药脑脊液未见毒害作用。 结论 本实验证明正常血清和中药血清都对细胞产生了一定毒害作用,说明“血 清药理学”的方法不适合研究中药对上述两种细胞的影响,因为血清本身对于细 胞的毒害作用将掩盖中药的药理作用。而参考“血清药理学”的思路,利用含药 脑脊液来进行观察可能比较合理,姑且称这种方法为“脑脊液药理学”。


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