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中华绒螯蟹精子的生理生化研究

陈勤娜  
【摘要】:中华绒螯蟹属于我国重要经济蟹类,具有营养价值高、味道鲜美等特点。随着市场需求的不断增加,中华绒螯蟹的养殖规模也在不断扩大,但是在实际生产中存在一龄蟹性早熟的现象,性早熟的中华绒螯蟹个体较易死亡,给中华绒螯蟹的养殖带来了巨大损失。在中华绒螯蟹的繁殖过程中,雄蟹的正常发育和成熟是重要的影响因素之一,研究其生殖生理生化特征如精荚、精子、死亡率、顶体反应率及精子蛋白等,对分析精子质量、种质特征以及了解性早熟个体的生殖指标具有理论意义和实践意义。 本实验以正常成熟和性早熟的雄性中华绒螯蟹为实验材料,首先利用石蜡切片技术从光镜水平上对比中华绒螯蟹正常成熟与性早熟个体的精巢组织差异;通过统计正常蟹与早熟蟹的精荚数量、精子数量、精子直径得到精子相关的统计数据,通过伊红染色测定死亡率和通过温差诱导法测定精子顶体反应率得到正常蟹与早熟蟹精子质量的数据,从而分析正常蟹与早熟蟹之间的差异。然后利用天然聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法以LDH活性染色贮液染色,分析正常蟹与早熟蟹精子乳酸脱氢酶酶谱及酶活力差异。最后利用双向电泳技术对正常蟹和早熟蟹精子的蛋白质组进行对比研究,以找出两者之间的差异蛋白点。 研究结果显示性早熟河蟹的精巢与正常河蟹精巢相比成熟度更高,正常蟹平均每只蟹所含有的精荚数和精子数分别是早熟蟹的1.35倍和1.32倍;正常蟹和早熟蟹精子的死亡率分别为1.9%和3.42%,顶体反应率分别为93%和87%;正常蟹精子乳酸脱氢酶及精子特异的乳酸脱氢酶活力均高于早熟蟹;正常蟹与早熟蟹精子蛋白双向电泳图谱分析分别获得蛋白点281个和296个。结果表明早熟蟹在生殖性能及子代配子质量上不及正常蟹,两种蟹精子内蛋白质组存在一定的差异。


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