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固定化酶活性的表面微区分析与研究

丁良  
【摘要】: 酶的固定化及酶促反应是最具发展前景的生物技术前沿领域。固定化酶已经广泛应用于生物化学、生物技术工程、生物医学工程、化学化工等方面,将在人类社会可持续发展中发挥重要作用。因而固定化酶载体的开发和利用更显得尤为重要。合成出具有较高酶活的载体,找出酶活与载体结构的关系,是解决固定化酶活性的关键问题。针对这一问题本文提出利用X射线微区分析的方法,对固定化木瓜蛋白酶,天门冬酰胺酶,乳酸脱氢酶,脂肪酶的活性位置进行定位分析,找到了几种酶活性的捕捉剂,指出了酶活与载体结构的关系,为固定化酶载体的合成与开发提供了可靠的依据。指出仅仅根据固定化酶的形貌来确定固定化酶的固定效果是不准确的,而实验结果表明我们的酶活定位方法是真实有效的。我们通过改变合成条件,研究出了合成新型大孔树脂的新工艺,利用微区分析的手段指导合成,进而通过悬浮聚合法合成出不同结构的聚合物载体,并通过大量实验找到了合成大孔树脂的严格条件,用合成出的新型大孔吸附树脂微球对木瓜蛋白酶,天门冬酰胺酶,进行了固定化,同时对用不同固定化方法制得的固定化酶的性质进行了表征和比较。结果令人满意。用性能优良的固定化酶制得酶反应器,显示其具有广泛的应用价值,为固定化酶载体的开发利用开辟了新途径。


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