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白灵菇原生质体提纯复壮及液体发酵条件优化研究

刘海娟  
【摘要】:白灵菇栽培中存在生产周期长、生物学转化率低、较易出畸形菇等问题。液体发酵技术不仅可以缩短食用菌制种周期,而且液体菌种接种面积大、萌发点多,可大大缩短栽培过程中发菌时间。本研究以白灵菇“中农翅鲍”和“白杂65”两个品种为试验材料,通过对“中农翅鲍”原生质体提纯复壮,选育出高产、畸形菇率低的新菌株;利用响应面法对白灵菇品种“白杂65”液体发酵条件进行优化,并通过感官观察、镜检、萌发活力、发酵液中还原糖含量、漆酶活力等确定白灵菇液体菌种的培养终点,研究结果如下:1.“中农翅鲍”的原生质体提纯复壮选育试验结果表明,52个原生质体菌株经过锁状联合鉴定、菌丝长速对比、低温刺激形成原基等指标最终筛选出15个较好的原生质体菌株。15个原生质体菌株与对照组的栽培试验中,4个菌株长满菌袋时间比对照组提前15天,11个菌株出菇时间比对照组提前8~13天。5个菌株不易出畸形菇,4个菌株生物学转化率高达100%~120%,其中Pn1-10菌株中单菇鲜重最大为每朵598.04 g,生物学转化率接近120%。2.对白灵菇“白杂65”进行液体发酵优化,通过单因素试验基础筛选,结合响应面优化设计法以菌丝生物量为响应值,对碳、氮源及接种量3因素进行优化。结果表明,当葡萄糖24.590g/L、酵母膏7.433 g/L、接种量10.929%时菌丝生物量达到最大值2.145 g。3.以液体发酵优化条件最佳组合为基础,通过感官观察、镜检、萌发活力、发酵液中还原糖含量、漆酶活力等方面分别对白灵菇“白杂65”液体菌种研究分析。结果表明,发酵培养到第5天时,菌球密度适中、漆酶活力最强、菌丝迅速生长,期间菌丝锁状联合较多,回接平板萌发快,发酵液的p H值随菌丝量增多开始下降,发酵液中还原糖含量急剧下降,可溶性蛋白含量升高。


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