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氟化氨银添加谷胱甘肽的生物学性能研究

吴融慧  
【摘要】:目的将氟化氨银(Silver diamine fluoride,SDF)添加谷胱甘肽(Glutathione,GSH)后研究其对小鼠成纤维细胞(L929)增殖和毒性的影响、牙本质着色以及对树脂修复的微渗漏和粘接强度的影响,为其临床应用提供实验依据。方法1细胞增殖实验:分别配置SDF稀释液、SDF加20%GSH混合稀释液,配置RPMI1640完全培养基进行细胞培养。L929细胞传代后接种于96孔板,每板分为4组:A组(SDF)、B组(SDF加GSH)、C组(完全培养基)、D组(苯酚)。待L929细胞贴壁后加入A、B、C、D四种溶液继续培养,分别在第1、3、5、7天时用CCK?8法检测L929细胞增殖和毒性情况。2牙本质着色实验:选取离体牙45颗固定在超硬石膏模型内,暴露牙本质面依次用500~2000目碳化硅砂纸打磨平滑,随机分为3组(n=15),牙本质面分别涂SDF、SDF加GSH和去离子水(空白组)。涂药后分别于1小时、1天、1周、1个月时用Crystaleye电脑比色仪检测L*,a*,b*值,并根据色差公式计算出所有样本的牙本质色差值?E。3微渗漏实验:将36颗离体前磨牙随机分为3组(n=12),在离体牙颊面釉牙骨质界上1mm制备V类洞,窝洞内分别涂:SDF、SDF加GSH和去离子水(空白组),用可乐丽菲露SE Bond粘结剂处理后,3M Z350树脂充填窝洞。将样本浸泡于品红染液中24小时,颊舌向片切,在体视显微镜下观察牙本质与树脂界面微渗漏情况。4剪切粘接强度实验:36颗离体前磨牙暴露牙本质面随机分为3组(n=12),将牙本质面打磨平滑后分别涂:SDF、SDF加GSH和去离子水(空白组),可乐丽菲露SE Bond粘结剂处理后,粘接3M Z350树脂试件,用万能实验机依次测试其剪切粘接强度。5统计学分析。结果1细胞增殖实验:第1天倒置相差显微镜下见四组细胞形态数量正常,CCK?8检测结果显示,A、B、C、D组OD值分别为0.170±0.002、0.174±0.005、0.179±0.007、0.151±0.003,两两比较结果无显著性差异(P0.05)。第3、5、7天,倒置相差显微镜下见A、B、C组细胞形态数量正常,CCK?8检测结果显示,A组OD值为分别为0.464±0.149、0.720±0.187、1.774±0.460;B组OD值分别为0.450±0.079、0.706±0.237、1.743±0.481;C组OD值分别为0.356±0.166、0.610±0.408、1.263±0.520,两两比较结果均无显著性差异(P0.05);第3、5、7天D组细胞倒置相差显微镜下见细胞核固缩,细胞质减少,活细胞数量较少,OD值分别为0.304±0.011、0.196±0.025、0.218±0.019,D组与A、B、C组相比具有显著性差异(P0.05)。2牙本质着色实验:电脑比色仪结果显示SDF组颜色改变最明显,变为黑色,?E值显著高于其他两组(P0.05);SDF加GSH组在各时间点均可以明显降低牙本质的着色程度,牙本质仅有轻微着色,变为淡黄色,所有时间点SDF加GSH组?E值均略高于空白组(P0.05),所有时间点SDF加GSH组?E值均显著低于SDF组(P0.05)。3微渗漏实验:SDF组、SDF加GSH组和空白组三组边缘封闭情况良好,但均不能完全避免微渗漏的产生。三组间方与龈方的微渗漏数据比较均无显著性差异(P0.05)。4剪切粘接强度实验:SDF组、SDF加GSH组和空白组的平均剪切粘接强度分别为16.21±3.04Mpa、15.37±3.42Mpa和17.43±3.68Mpa,组间两两比较均无显著性差异(P0.05)。结论1 SDF添加GSH对L929细胞增殖没有明显影响。2 SDF添加GSH与SDF相比可显著降低牙本质的着色。3 SDF添加GSH不会对牙本质和树脂粘接后的微渗漏造成影响。4 SDF添加GSH不会影响牙本质和树脂的粘接强度。图13幅;表7个;参151篇。


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