收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

长穗偃麦草AP2/ERF家族转录因子的功能研究

薛美如  
【摘要】:AP2/ERF(乙烯应答元件结合蛋白)转录因子家族是植物所特有的一类转录因子,主要参与植物的细胞周期、生长发育以及生物和非生物胁迫相关基因的表达调控。根据它们含AP2/EREBP结构域的数目,AP2/ERF转录因子超家族分为AP2、RAV和ERF三个家族。ERF家族含有一个AP2/EREBP结构域,又分为CBF/DREB家族、ERF家族和其他蛋白。DREB属于CBF/DREB亚族,是干旱应答元件结合蛋白,参与植物对干旱、高盐、低温、水涝等非生物胁迫的应答,调控逆境诱导基因的表达。ERF亚族基因参与植物对激素(乙烯)的分子应答反应,在非生物胁迫中也起作用。目前AP2家族基因研究最多的是模式植物拟楠芥,在抗逆性优良的野生资源植物中还很少研究。因此,加快野生资源植物中的抗逆优异基因资源的挖掘和功能验证对农作物转基因育种具有重要应用价值和理论意义。EeAP2.2和EeAP2-1.1基因是本实验室从抗逆性优良的长穗偃麦草中克隆的2个AP2/ERF家族抗逆高丰度表达基因。本研究应用生物信息学技术对EeAP2.2和EeAP2-1.1的功能进行了预测,通过半定量RT-PCR检测了高盐和干旱胁迫下二者基因转录丰度的变化,并通过转化烟草对EeAP2.2的抗逆性功能进行了初步研究,利用NMT技术表达EeAP2.2的抗逆性机理进行了探讨。同时构建了pSB187-EeAP2.2:GFP融合表达载体,并对用于转基因烟草筛选的潮霉素最适生长浓度进行了摸索。得到如下研究结果: 1. EeAP2.2和EeAP2-1.1基因均含有一个保守的YRG和RAYD结构域,属于EREBP家族,EeAP2.2基因属于ERF家族中的DREB亚族基因, EeAP2-1.1基因属于ERF家族中的ERF亚族基因。 2.在未胁迫条件下EeAP2-1.1在根部的表达量要明显低于EeAP2.2,干旱和高盐胁迫均能诱导二者的上调表达,胁迫4小时在根部和叶部二者的表达量均有显著增加,胁迫12小时,二者在根部和叶部的表达量持续增加,但在PEG胁迫条件下的EeAP2-1.1基因基本维持在胁迫4小时时的表达水平。 3. EeAP2.2转基因烟草干旱胁迫后增加K~+内流,高盐胁迫阻止K~+和H~+大量外流,低温胁迫后H~+和K~+流速和流向出现反常,但是胁迫后恢复正常培养时野生植株全部死亡。 4.转化植株的PCR检测结果显示,EeAP2.2基因成功整合到了烟草基因组中。转基因烟草植株在正常生长条件下出现矮化,平均株高降低约44%,叶片总数减少41.4%,单叶面积减小近38%,但是在开花期绿叶数增多。 5.野生型烟草种子在含有250mM NaCl的MS培养基上与转基因烟草种子相比萌发缓慢,长势较弱,叶片生长缓慢;干旱胁迫30天后,野生型烟草植株矮小、叶片发黄,底部叶片枯萎,长势弱于转基因烟草。 6.利用潮霉素对pSB187载体转基因烟草进行筛选的最适浓度约为4mg/L左右。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 毛泽斌,张宗玉,童坦君;老年细胞原癌基因c-fos、c-myc基因可诱导性减退与特异转录因子的关系[J];中华老年医学杂志;1997年01期
2 王付龙,徐祥,梁华平,刘昕;转录因子圈套策略研究进展[J];生物化学与生物物理进展;2001年06期
3 赵洪梅;安利佳;马有会;;同源域-亮氨酸拉链蛋白ATHB6的研究进展[J];中国农学通报;2006年08期
4 张琨;李世敏;张丽君;彭光华;张声华;;脂肪细胞分化机制的研究进展[J];农产品加工(学刊);2007年02期
5 王建国;宋喜娥;李润植;;植物转录因子的胞间运动[J];细胞生物学杂志;2007年01期
6 张玉宝;谢忠奎;李同祥;王亚军;郭志鸿;王志力;;DREB1A转录因子蛋白的原核表达[J];武汉植物学研究;2007年04期
7 庄静;朱波;金晓芬;彭日荷;乔玉山;章镇;熊爱生;姚泉洪;;甘蓝型油菜‘沪油15'中两个CBF类转录因子的克隆与分析[J];植物生理学通讯;2008年06期
8 范伟;畅文军;张艳琳;张治礼;;植物NAC转录因子[J];生物技术通报;2008年S1期
9 孙丽芳;邢少辰;张君;杨建福;王兴智;董英山;;转录因子在植物进化和抗逆中的作用[J];基因组学与应用生物学;2009年03期
10 赵红英;祝建波;王爱英;沈海涛;张煜星;;HARDY转录因子原核表达的研究[J];石河子大学学报(自然科学版);2009年04期
11 翟晓霏;靳永胜;张文;朱元娣;;SUPERMAN类单锌指蛋白的研究进展[J];分子植物育种;2010年03期
12 林玲,远藤登代志,女屋敏正;RT-PCR法检测甲状腺特异性转录因子-1 mRNA[J];福建医科大学学报;1997年04期
13 刘妍;成军;;真核细胞转录因子NF-κB及其在HBV X蛋白反式激活中的作用[J];传染病信息;1998年02期
14 李扬秋暨南大学医学院血液病研究室!广东广州510632,杨力建暨南大学医学院血液病研究室!广东广州510632,陈少华暨南大学医学院血液病研究室!广东广州510632,Schmidt CA,Siegert W;ANLL中转录因子GATA-2基因点突变[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2000年02期
15 单佑安,刘小华,罗向东,杨宗城;免疫细胞化学技术在转录因子激活研究中的应用[J];第三军医大学学报;2003年04期
16 刘戈宇;胡鸢雷;祝建波;;植物WRKY蛋白家族的结构及其功能[J];生命的化学;2006年03期
17 李永青;王跃群;朱传炳;邓云;袁婺洲;吴秀山;;人类新基因ZNF418的研究初报[J];激光生物学报;2006年03期
18 陈峰;余军平;方晓红;张贵友;;鉴定水稻中一个新的专一结合GCC元件的AP2/EREBP族转录因子[J];生物化学与生物物理进展;2006年07期
19 郭风劲;宋方洲;易发平;成海恩;;转录因子X-box结合蛋白1相互作用蛋白的筛选和鉴定(英文)[J];生物化学与生物物理进展;2006年08期
20 袁庆新;刘超;;转录因子网络在内分泌胰腺形态发育及功能完善中的作用[J];国外医学(内科学分册);2006年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 姜海华;徐虎;孙静;陈建民;;油菜AP2/ERF亚族转录因子BnaERF-B3的功能分析[A];江苏省遗传学会第八届会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2010年
2 许冉冉;徐虎;孙静;陈建民;;水稻AP2/ERF转录因子OsAP21的功能分析[A];江苏省遗传学会第八届会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2010年
3 高峰;夏瑞强;熊爱生;肖宁;洪义欢;姚泉洪;陈建民;;水稻AP2/EREBP类转录因子基因的功能研究[A];江苏省遗传学会植物分子育种学术研讨会论文摘要汇编[C];2007年
4 邸鹏;陈万生;张磊;;构建“转录因子-启动子”耦联载体开展植物生物碱次生代谢工程[A];中国植物学会七十五周年年会论文摘要汇编(1933-2008)[C];2008年
5 吴艳;徐岚;周迎会;吴士良;;人类β1,3半乳糖基转移酶7(UDP-Gal:betaGlcNAc beta 1,3-galactosyltransferase polypeptide 7)催化功能的研究以及该基因表达与转录因子ets-1的相关性的探索[A];2008年全国糖生物学学术会议论文摘要[C];2008年
6 吴艳;徐岚;吴士良;;人类β3GalT7/GNT8 (UDP-Gal:betaGlcNAc beta 1,3-galactosyltransferase polypeptide 7)催化功能的研究以及该基因表达与转录因子ets-1的相关性的探索[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
7 李肖霞;宋一萌;朱振久;付成来;李承红;朱毅;;转录因子KLFs在血管内皮祖细胞增殖分化中的作用[A];第七届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2009年
8 李蕾;谢丙炎;戴小枫;杨宇红;;辣椒抗病相关WRKY转录因子基因的分离及特征分析[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
9 郭振飞;赵雅清;;黄花苜蓿EREBP基因的克隆、表达及功能鉴定[A];2007年全国植物生长物质研讨会论文摘要汇编[C];2007年
10 郑毅;陈永平;;转录因子FoxO1与肝纤维化[A];传染病诊治高峰论坛暨2007年浙江省感染病学、肝病学学术年会论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 庄静;大白菜和甘蓝型油菜AP2/ERF家族转录因子的克隆与分析[D];南京农业大学;2009年
2 白延红;烟草花青素合成相关基因及转录因子基因的克隆与功能验证研究[D];西北农林科技大学;2012年
3 孟丽;草菇形态建成中差异表达转录因子的筛选及关键基因的功能分析[D];吉林农业大学;2013年
4 朱馨蕾;小麦体细胞杂种渐渗系山融3号抗逆相关转录因子基因家族及基因功能研究[D];山东大学;2010年
5 王钱洁;AP2/ERF转录因子与水稻产量相关基因LRK6等位基因的表达差异[D];复旦大学;2011年
6 高建杰;苹果两个MYB转录因子基因的克隆与功能分析[D];南京农业大学;2011年
7 邱志刚;小麦DREB/ERF转录因子相互作用蛋白质的筛选与验证[D];中国农业科学院;2010年
8 姚春霞;GATA转录因子对心肌能量代谢及细胞增殖的调控机制研究[D];郑州大学;2012年
9 赵珏;转录因子Spr2调控中胚层形成和神经外胚层后部化[D];清华大学;2004年
10 李雪平;大豆DREB类转录因子基因的克隆及功能研究[D];中国农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 薛美如;长穗偃麦草AP2/ERF家族转录因子的功能研究[D];河北农业大学;2013年
2 姜海华;油菜AP2/ERF家族转录因子BnaERF-B3的功能分析[D];扬州大学;2010年
3 许冉冉;水稻AP2/ERF转录因子OsAP21的功能分析[D];扬州大学;2010年
4 高哲;基于PWMSA算法拟南芥协同基因调控的预测[D];吉林大学;2009年
5 杨红梅;赤霉素相关转录因子NBF的进一步功能分析[D];新疆大学;2005年
6 张传庆;T-bet/IFN-γ信号转导在重型再生障碍性贫血发病机制中的作用[D];苏州大学;2008年
7 赵学强;通心络对自发性高血压大鼠心肌重构干预的实验研究[D];山东大学;2008年
8 韩巧玲;大豆重要抗逆相关基因GmE2、GmNAC2a的特性分析及功能鉴定[D];西北农林科技大学;2010年
9 殷建文;低温胁迫条件下拟南芥全细胞蛋白质的双向电泳分析[D];吉林大学;2005年
10 黄欣琼;人类心脏发育候选基因ZNF569的研究[D];湖南师范大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王小龙;科学家提高了多功能干细胞安全性[N];科技日报;2009年
2 白毅;UXT蛋白可增强转录因子NF—κB活性[N];中国医药报;2007年
3 香港麦迪信医学出版有限公司 供稿;凋亡与肿瘤:一对矛盾的连体婴[N];医药经济报;2002年
4 本报记者 冯卫东;向左分裂向右分化[N];科技日报;2009年
5 陈勇;专家有突破 借助基因杀死癌细胞[N];人民日报;2005年
6 记者 陈勇;美专家绘出大脑关键区域基因“分布图”[N];新华每日电讯;2004年
7 记者胡德荣;我国科学家培育出猪“万能”干细胞[N];健康报;2009年
8 胡德荣;我国揭示NF—κB细胞核内调控新机制[N];中国医药报;2007年
9 杨茜;美建立造血干细胞分化调控模型[N];中国医药报;2006年
10 黄苏榕;中科院上海神经所发现中、小脑发育不全分子机制[N];中国医药报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978