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鸭细小病毒病灭活疫苗的研制

李晓轩  
【摘要】:2014年11月以来,我国部分地区所饲养的肉鸭发生了以雏鸭发育迟缓、上下喙萎缩、舌头外伸为特征的疾病。根据其发病临床特征命名为鸭短喙-侏儒综合征(duck short beak and dwarfism syndrome,SBDS)。本实验室通过病原分离以及动物回归实验,确定了引起SBDS的病原为鸭细小病毒(Duck Parvovirus)。目前,防控该病尚无商业化的疫苗,给我国养鸭业造成了较大经济损失。鉴于此,作者选取鸭细小病毒流行株制备了鸭细小病毒病灭活疫苗,围绕新制品的研制对其实验室试验进行了一些有益的探索。将15只1日龄的樱桃谷雏鸭随机分成三组:第1组(口服组),每只口服1 mL病毒尿囊液:第2组(肌肉注射组),每只肌肉注射病毒尿囊液1 mL(EID_(50)为10~(-4.5)/0.2mL),第3组(对照组),每只雏鸭口服1 mL生理盐水。在感染鸭细小病毒后7、14、21 d分别对三组动物称重、测量喙长,口服组雏鸭体重极显著低于对照组,肌注组低于对照组,因此确定最佳感染途径为口服途径。为探明该病毒的生物学特性,将SD株鸭细小病毒用鸭胚传至40代,分别用10、20、30、40代病毒对动物进行攻毒实验。结果表明,F10代鸭细小病毒组雏鸭体重和喙长和对照组差异极显著,感染F20?F30代病毒组雏鸭体重和喙长与对照组对比差异显著,感染病毒F40代病毒组雏鸭和对照组差异不显著,感染后,21 d均可以检测到排毒。综上所述,该病毒传至40代,病毒对动物的致病力降低。将保存的鸭细小病毒分离株经鸭胚传代五次,收获病毒尿囊液。9000 r/min离心10 min。取上清,加双抗。将提前处理好的尿囊液和吐温-80按比例制作水相,按照油相和水相2:1比例将二者混匀,制备油乳剂灭活疫苗。并对种毒纯净性和疫苗的外观、粘度、稳定型、安全性和保存期的质量检验。为评价制备的灭活疫苗的免疫效力,将50只1日龄的雏鸭随机分为5组,每组10只,1?4组为免疫组,免疫剂量分别为100μL、250μL、500μL、1000μL,第5组为对照组。免疫后7 d进行免疫保护实验,观察实验鸭的临床症状和排毒情况。结果表明疫苗外观为乳白色、油包水型、无外源病毒污染、粘度符合标准、稳定性良好、对动物无不良影响、4℃可保存1年以上;对疫苗安全性检验用20只1日龄雏鸭,随机分为两组,每组10只。一组注射成品疫苗为疫苗组,二组注射白油佐剂为对照组。疫苗组和对照组对比后精神状态正常、注射部位没有发生炎症,证明安全性检验合格;免疫保护实验中,对照组在攻毒后3d泄殖腔肛拭子检测到部分阳性,100μl?1000μL四组免疫组检测结果全部阴性。攻毒后5 d对照组全部阳性,而1?4组免疫组检测结果全部阴性。直到攻毒21 d后,对照组检测仍然全部呈阳性,四组免疫组检测全部阴性。上述结果表明制备的鸭细小病毒灭活疫苗安全、稳定、易于储存运输,雏鸭免疫后可以获得坚强保护。本研究通过不同代次病毒接种动物,探明该病毒的生物学特性。为了有效预防本病的蔓延,用该毒株制备鸭细小病毒灭活疫苗,疫苗安全有效,能在雏鸭易感日龄提供保护,为鸭细小病毒疫苗的研制提供了依据。


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9 保映祥;犬、猫细小病毒的诊治[J];云南畜牧兽医;2001年01期
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14 J.B.McFerran;张立波;;细小病毒研究的新进展[J];国外畜牧科技;1991年02期
15 卢建国;J.B.McFerran;S.McNulty;;雏鸡贫血因子和细小病毒[J];国外畜牧学(猪与禽);1991年02期
16 Rommelaere J ,庄昀红;细小病毒的抗肿瘤活性[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1992年06期
17 苏兆众;罗祖玉;;哺乳动物及人自主性细小病毒研究概况[J];国外医学(微生物学分册);1987年03期
18 苏兆众,罗祖玉,郭兰萍;细小病毒和肿瘤[J];肿瘤;1987年06期
19 L. E. Carmicheal;洪雷译;;犬类新的肠道病毒(续一)[J];上海实验动物科学;1987年02期
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