收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

大鼠颅脑手术止血材料的应用及其转归

孙铄  
【摘要】:目的:制作大鼠外伤后脑出血模型,在颅内出血灶应用止血材料(可吸收明胶海绵、Surgicel)进行止血,观察止血材料在光镜下、电镜下的变化,以及应用止血材料后出血部位脑组织的病理改变,脑细胞的凋亡情况。 方法: 1大鼠外伤性脑出血模型的制作 Wistar大鼠72只,雌雄不限,体重300-350克,随机分为:①对照组24只,手术后不应用止血材料仅应用棉片压迫止血,②止血材料组48只,术后应用止血材料止血,根据手术后应用可吸收明胶海绵或Surgicel分为两个小组,每组24只。对照组、明胶海绵组、Surgicel组根据处死时间(5天、10天、15天、20天、25天、30天)各分为六个亚组。每个亚组4只。 将大鼠用10%水合氯醛腹腔麻醉后,纵行切开颅顶皮肤,在右侧顶骨(距矢状缝,冠状缝各5mm)处用牙科磨钻仔细打磨出一直径5mm的骨窗,保持硬膜的完整不受损。应用外科3-0带线缝合针划开硬膜,不触及皮层,暴露脑组织,硬膜出血采用沾水棉片压迫止血。应用显微取瘤镊夹取大脑皮层范围:2mm×2mm×1mm,造成外伤出血模型,按照分组应用棉片压迫、可吸收明胶海绵、Surgicel进行有效止血。完全止血后缝合伤口。术后大鼠正常进食,不能进食者给糖水灌胃。于5天,10天,15天,20天,25天,30天时分别处死各组4只大鼠。 2光镜下观察应用吸收性明胶海绵、Surgicel及对照组的大鼠脑组织H-E染色组织切片 于5天,10天,15天,20天,25天,30天时分别处死各组2只大鼠,经左心室-升主动脉插管,快速灌注生理盐水150ml、4%多聚甲醛300ml(4℃,0.1M的PBS配制,PH7.4)先快后慢灌注2h,待大鼠四肢僵直后断头取脑。用4%多聚甲醛固定24小时以上。切取应用止血材料部位的脑组织,常规酒精梯度脱水、透明、石蜡包埋,连续切片5μm。做苏木精-伊红(H-E)染色。采集图像。 3透射电镜及扫描电镜下观察应用吸收性明胶海绵、Surgicel及对照组的大鼠颅脑损伤切片 于5天,10天,15天,20天,25天,30天时分别处死各组2只大鼠,经左心室-升主动脉插管,快速灌注生理盐水150ml、4%多聚甲醛300ml(4℃,0.1M的PBS配制,PH7.4)先快后慢灌注2h,断头取脑,切取应用止血材料部位的大鼠脑组织,4%戊二醛固定24h,扫描电镜标本制备为:3mm×3mm×1mm,1%锇酸固定1h,经酒精梯度脱水,真空干燥,喷金镀膜后采集图像。透射电镜标本制备为1mm×1mm×1mm,1%锇酸固定1h,经硬化标本制备,超薄切片,溶液成膜,复型成膜后采集图像。 4观察应用吸收性明胶海绵、Surgicel及空白组的脑组织细胞凋亡改变 每组随机选取蜡块固定的一个标本,经过切片,脱水、水合,细胞通透,TUNEL反应液作用,converter-POD作用,与底物DBA反应显色后在高倍镜下随机选取三个视野计数并拍照。 结果: 1光镜下创伤脑组织的病理改变与止血材料的吸收与转归 在5d、10d、15d的脑组织切片H-E染色切片显示:三个实验组的出血灶炎症反应均明显,周围存在坏死破碎脑组织。单核细胞浸润,红细胞弥漫性存在于破碎的脑组织、止血材料间隙中。随着时间的迁移,炎症反应逐渐减轻,单核细胞与红细胞的数量减少。对照组可见神经细胞水肿,大量单核细胞浸润,局部可见红细胞变形破碎。红细胞破碎,释放的血红蛋白被氧化变成黄色。吸收性明胶海绵与脑组织的贴附性较Surgicel差,炎症反应较重,并且占位空间也较大。实验证实:Surgicel在与脑组织的组织相容性方面优于可吸收明胶海绵。 2电镜下创伤脑组织的病理改变与止血材料的吸收与转归 2.1扫描电镜下创伤脑组织的病理改变与止血材料的吸收与转归 出血部位脑组织可见明显的脑水肿、软化灶。水肿灶、软化灶与正常部位脑组织界限较为明显。空白组与Surgicel组在25天的标本可见水肿程度较之前的标本减轻,而吸收性明胶海绵在25天的标本仍存在明显的水肿。对照组可见脑组织破碎,出血灶脑组织参差不齐,脑水肿。少数出血灶仍可见未变形的红细胞。在同一时间点可吸收明胶海绵仍可见明显的颅内占位效应。Surgicel与脑组织的贴附性优于比吸收性明胶海绵。随着时间的进展脑水肿逐渐减轻。 2.2透射电镜下创伤脑组织的病理改变与止血材料的吸收与转归 术后5d脑组织的吞噬细胞吞噬大量变性坏死的神经纤维。术后15d与25d的神经元在不同组别有所不同。对照组以神经元细胞固缩、线粒体肿胀、高尔基体扩张、神经纤维水肿为主。吸收性明胶海绵组中神经元细胞肿胀较轻,部分线粒体空泡化、线粒体肿胀、高尔基体扩张。Surgicel组神经元细胞胞浆水肿、神经元突起水肿、线粒体肿胀、高尔基体扩张。 3应用吸收性明胶海绵、Surgicel以及对照组实验的脑组织凋亡改变 阳性凋亡细胞在细胞膜上和胞质中均出现棕黄色颗粒,结构清晰,着色明显高于背景,阴性对照无棕色反应,正常细胞或繁殖细胞核为蓝色。测定凋亡的神经细胞阳性细胞数分级和阳性细胞显色强度分级,计算凋亡细胞的免疫组化评分(IHS值)进行统计分析,实验数据表明:①止血方式不同时,各组IHS值存在明显差异(P0.05),具有统计学意义,且任两组相互比较均存在差异(P0.05)。②当时间作为实验的影响因素,各时间点的IHS值存在差异(P0.05),任两组进行比较时,除20d与25d标本的IHS值无差异外,其余各时间点的IHS值均存在差异(P0.05)。③当时间跟处理因素综合考虑时,Surgicel止血后10d凋亡指数最高,空白组25天凋亡指数最低。④并且时间与止血方式存在交互作用(P0.05)。 结论: 1作为神经外科止血材料,Surgicel的组织相容性优于吸收性明胶海绵。 2应用止血材料会对细胞凋亡产生不同程度的影响。 3在保证止血效果的前提下,应尽量减少止血材料的应用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 黄少波,杨小敏,李秀红;不同止血材料在鼻内镜手术后填塞应用的疗效观察[J];海南医学;2004年12期
2 陶世明;;可吸收外科止血材料的比较[J];国际外科学杂志;1989年03期
3 马茂;范代娣;;壳聚糖-类人胶原蛋白对兔肝创面的止血效果及组织相容性观察[J];第四军医大学学报;2007年12期
4 余雪松;黄赤兵;张银甫;冯嘉瑜;;多孔止血淀粉的制备及其生物相容性[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年32期
5 佟威;;鼻内镜术后填塞止血材料的应用[J];华夏医学;2008年05期
6 陈杰;膨胀止血材料在鼻科中的应用[J];山东大学基础医学院学报;2002年06期
7 熊琼娟,许凤山,王荣华,张静;鼻腔内窥镜鼻窦术后运用2种止血材料的护理观察[J];海军医学杂志;2005年03期
8 黄宇勇;黄晓华;;不同鼻腔填塞物对鼻内镜术后伤口疼痛和止血效果的临床观察[J];中国耳鼻咽喉颅底外科杂志;2006年04期
9 布荣霞;崔江;沈康;陈特锐;陈金中;何甫成;;四种止血材料对鼻内镜术后鼻腔填塞的疗效观察[J];河北医学;2007年12期
10 方瑜;李勇;;鼻内镜下生物胶粘贴治疗鼻出血[J];中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志;2005年06期
11 李保强;韦其全;刘坤;潘峰;方一帆;;壳聚糖快速止血材料的研究进展[J];实验技术与管理;2009年03期
12 赵士海;胡庆柳;钟志勇;饶子亮;王刚;陈系古;;胶原/纤维蛋白止血效果观察[J];中国比较医学杂志;2010年05期
13 巴根;赵贵成;傅强;;可吸收止血材料的安全性与临床应用[J];第二军医大学学报;2011年08期
14 朱立新;;鼻腔鼻窦手术后两种填塞材料止血方法效果观察[J];吉林医学;2011年25期
15 谭家万;;Merocel高膨胀止血材料在鼻内镜外科的临床应用[J];现代医药卫生;2006年10期
16 严永明;杨晓华;李珂;;不同止血材料在鼻窦炎术后鼻腔填塞的疗效观察[J];基层医学论坛;2008年32期
17 赵峰;;经皮注射止血材料治疗严重闭合性肝损伤:实验研究[J];国际医学放射学杂志;2009年01期
18 罗利民,楼正才;Merocel高膨胀止血材料用于鼻窦术后鼻腔填塞[J];现代中西医结合杂志;2005年10期
19 金燕;张庆丰;林翠玉;刘德龙;孙健钧;李大伟;于淑晶;;治疗鼻出血鼻腔填塞物的选择[J];辽宁医学杂志;2006年03期
20 尹承江;;鼻腔填塞物的选择及疗效比较[J];实用医技杂志;2006年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 曾超;周尔园;孙凡;王富江;刘吉吉;徐守宇;;电针调节PPARγ对大鼠脑缺血再灌注后炎性反应的影响[A];2011年浙江省物理医学与康复学学术年会暨康复新进展学习班论文汇编[C];2011年
2 于建云;姚凤升;缪华英;李树华;韩晓华;;大鼠脑震荡脑组织病理学研究[A];第五次全国法医学术交流会论文集[C];1996年
3 付守芝;李孝全;田林;刘勇;王家良;王家宁;张友恩;;还原型谷胱甘肽对毒鼠强中毒大鼠心脑的保护作用[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年
4 石向群;杨金升;;水通道蛋白4 M23型基因克隆及载体构建[A];第三届全国少数民族地区神经病学会论文汇编[C];2005年
5 秦秀燕;匡良洪;;氯沙坦对大鼠脑出血灶周围组织ICAM-1MMP-9表达的影响[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
6 艾厚喜;李蕾;王文;王培昌;张丽;李林;;莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮层总抗氧化能力影响[A];中国成人医药教育论坛[2010(3)][C];2010年
7 周友龙;李建生;高剑峰;;老龄大鼠脑缺血再灌注微血管再生的变化意义[A];中国中西医结合学会第五届基础理论研究专业委员会学术研讨会论文集[C];2006年
8 张红菊;赵忠新;夏斌;;大鼠脑梗死后的内质网应激相关的凋亡及糖调控蛋白的保护作用[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
9 闫秀梅;李光乾;;高热惊厥大鼠体内BDNF/NF-κB信号通路的变化[A];2007年浙江省儿科学、小儿外科学学术年会论文汇编[C];2007年
10 曲银娥;唐红梅;高俊玲;;美络宁对大鼠弥漫性脑损伤后海马CA1区神经元的作用[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 卢奕;人羊膜细胞在创伤性脑损伤中应用的实验研究[D];苏州大学;2005年
2 武继彪;丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对NMDA受体的影响[D];中国海洋大学;2007年
3 郑建明;通过抗氧化作用抑制NF-κB活化可能是赤芍801减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的分子机制[D];福建医科大学;2008年
4 安丽娜;手术创伤致大鼠认知功能障碍的铁代谢相关机制研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2013年
5 姜永军;经鼻给予脑源性神经营养因子治疗大鼠缺血性脑卒中[D];南京大学;2012年
6 杨建新;腹部术后疲劳综合征模型及抗术后疲劳方作用的研究[D];湖北中医学院;2004年
7 杨丹榕;大鼠IgEFcCH2-3受体阻断与IgEFcCH2-3-FasL诱导肥大细胞凋亡的研究[D];第二军医大学;2004年
8 李玉茹;神经营养素及其受体在老年性大鼠耳蜗及下丘中表达规律的研究[D];吉林大学;2005年
9 陈党红;舒筋颗粒对卒中后肌张力增高的影响及可能作用机制探讨[D];广州中医药大学;2005年
10 潘静薇;NOGO-B在动脉粥样硬化病变中差异表达的研究[D];第二军医大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙铄;大鼠颅脑手术止血材料的应用及其转归[D];河北医科大学;2013年
2 钟丽敏;中枢M受体参与毒血症大鼠星形胶质细胞激活及细胞因子分泌的研究[D];苏州大学;2011年
3 彭晶;乳化异氟醚对成年大鼠学习记忆功能的影响[D];遵义医学院;2011年
4 孙丕健;维生素C对大鼠酒精性脑和肝损伤的保护作用研究[D];苏州大学;2011年
5 冷婧;限食下活性维生素D对大鼠寿命的影响[D];山西医科大学;2013年
6 孙超;硫化氢对烧伤大鼠肠道组织干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α水平的影响研究[D];青海大学;2013年
7 张晓敏;肢体反复短暂缺血预处理在大鼠脑缺血再灌注损伤中保护作用的研究[D];山西医科大学;2013年
8 向芳;围产期大鼠血脂组成与乳腺炎症相关基因的表达变化研究[D];四川农业大学;2011年
9 芮君;电针对脑缺血大鼠神经干细胞分化的影响[D];青岛大学;2011年
10 吴芳庚;环境温度变化致大鼠小肠黏膜免疫屏障损伤的研究[D];南昌大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;关木通对大鼠致癌性的实验研究[N];中国医药报;2003年
2 刘霞;诱导多功能干细胞让小鼠长出大鼠胰腺[N];科技日报;2011年
3 ;丹参能加快放创复合伤大鼠创面愈合[N];中国中医药报;2005年
4 郑健刚;杜元灏;石学敏;针刺能增加脑缺血大鼠脑血流量[N];中国医药报;2005年
5 ;新抗病毒抗生素17997在大鼠体内药代动力学和组织分布研究[N];中国医药报;2003年
6 ;刺五加皂甙对大鼠血管性痴呆有防治作用[N];中国中医药报;2005年
7 ;中药复方能逆转腹主动脉缩窄大鼠心肌肥大[N];中国中医药报;2005年
8 孙忻;人类首次获得克隆大鼠[N];科技日报;2003年
9 阿胜;死亡阴影下孕育生机无限[N];医药经济报;2002年
10 程源;父母吸烟会导致婴儿厌食[N];大众卫生报;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978