槲皮素对过氧化氢诱导的小鼠B16黑素瘤细胞氧化损伤干预作用

【摘要】：目的:白癜风是一种顽固性的色素脱失性皮肤病,可发生于任何性别、年龄及身体任何部位。该病在临床上易诊难治,且发病率高,本病虽无明显的自觉症状,但却影响患者的容貌,尤其是发生在颜面部的皮损,给患者精神上带来巨大的压力,影响其工作、学习和生活。目前白癜风治疗方式主要包括:外用糖皮质激素、免疫调节剂,自体表皮或黑色细胞移植,局部光疗或光化学疗法,中医中药等。但各种治疗方式治疗效果欠佳,起效较慢,还需要患者较好的依从性。此外,长期外用激素类药物有引起皮肤变薄、毛细血管扩张,甚至萎缩,以及停药易反复等副作用。而应用局部光疗亦可导致皮肤灼伤、老化,甚至诱发皮肤癌。因此,对于白癜风治疗的研究有很大的临床价值。白癜风的发病机制至今没有一致的观点,国内外的研究证明本病与遗传、自身免疫、氧化应激、神经等机制有关。近年来氧化应激更是白癜风发病机制的研究热点,不断有研究证实表皮黑素细胞存在氧化应激水平不断增高的现象,这可能是导致黑素细胞功能障碍,引起白癜风发生的重要病因[2]。研究发现白癜风进展期患者表皮中聚积大量过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)[3-5]。氧化应激可引起黑素合成的减少及黑素细胞的凋亡,促进了白癜风的发生、发展。随着对白癜风发病机制研究的深入,针对氧化应激的中药在白癜风治疗中显示了巨大潜力。槲皮素(3,3',4',5,7-五羟基黄酮)是多种中药的有效成分,广泛分布于多种植物的花、果实、叶中,如中药槐米、银杏叶、菟丝子、刺五加、满山红等,是一种具有多种生物活性的黄酮类化合物,具有很高药用价值。研究表明槲皮素具有抗氧化、清除体内自由基、抗炎、抗菌、抗病毒、抗过敏、抗肿瘤及抗突变等多方面药理作用,是近年来国内外学者研究的热门课题。本研究从氧化应激损伤的角度,以H2O2诱导小鼠B16黑素瘤细胞氧化损伤为研究对象,通过观察槲皮素对体外培养的B16细胞过氧化损伤状态的影响,探讨槲皮素对黑素细胞损伤的保护作用,为其防治白癜风的临床应用提供实验和理论依据。方法:1采用MTS法检测经不同浓度H2O2处理后小鼠B16黑素瘤细胞的增殖率,根据上述结果体外构建B16黑素瘤细胞氧化应激模型。2采用MTS法检测经不同浓度槲皮素处理后小鼠B16黑素瘤细胞的增殖率。3采用相关氧化应激指标测试试剂盒检测细胞内SOD、MDA水平。结果:1小鼠B16黑素瘤细胞经浓度为1mmol/l H2O2,处理0.5h后,黑素瘤细胞增殖率出现显著下降(P0.01)。2实验1、2、3组分别经25μmol/l、50μmol/l、100μmol/l槲皮素1640培养基处理24h后,再经1mmol/l H2O2处理0.5h,发现与对照组相比实验1、2、3组黑素瘤细胞增殖率降低(P0.05),但均高于过氧化氢组(P0.05)。3实验1、2、3组与对照组相比,黑素瘤细胞内SOD活性显著升高(P0.05);但MDA活性显著下降(P0.05)。结论:1小鼠B16黑素瘤细胞增殖率随H2O2浓度增加而下降。2槲皮素可提高黑素瘤细胞增殖率,且在一定范围内呈浓度依赖性。3槲皮素可提高H2O2诱导氧化应激下B16细胞增殖率。4槲皮素可通过升高SOD活性,降低MDA水平,调节氧化应激。