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肺炎克雷伯菌铁载体产量与毒力和碳青霉烯类耐药的关系

马玉兰  
【摘要】:目的:肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN)是医院和社区感染常见的条件致病菌,可引起呼吸道、尿道和血液等多部位感染。铁载体系统是肺炎克雷伯菌获取铁元素的重要途径。目前有关铁载体与细菌毒力和耐药关系的研究较少,并且存在争议。本研究将以124例肺炎克雷伯菌为研究对象,探讨其毒力特征和碳青霉烯类耐药分子流行情况,阐明肺炎克雷伯菌铁载体产量分别与毒力和碳青霉烯类耐药之间的关系。方法:1.收集河北医科大学第二医院肺炎克雷伯菌临床分离株124例,采用PCR法特异性检测受试菌6个常见的荚膜血清型K1(magA)、K2、K5、K20、K54和K57,9个常见毒力基因rmpA、rmpA2、wcaG、wabG、uge、mrkD、kfu、fimH和Alls,4个铁载体相关基因ironB、ybtS、entB和aero和5个碳青霉烯类耐药基因bla_(KPC-2)、bla_(NDM-1)、bla_(IMP-4)、bla_(VIM-1)和bla_(OXA-48);2.采用拉丝试验和血清杀伤试验对受试菌毒力特性进行检测;3.采用改良碳青霉烯类失活法和EDTA碳青霉烯类失活法对受试菌进行碳青霉烯酶表型筛选;4.采用铬天青S通用平板法和紫外分光光度法分别对细菌产铁载体能力进行定性和定量检测。结果:1.肺炎克雷伯菌毒力相关基因K1、K2、rmpA2、rmpA、wcaG、kfu、Alls、ironB、和aerobactin,铁载体高产组检出阳性率显著高于低产组,差异有统计学意义(P0.05)。2.除entB+ybtS组外,entB+ybtS+aero组、entB+ybtS+ironB组和entB+ybtS+aero+ironB组产铁载体量均明显高于entB组。3.铁载体高产组抗血清杀伤能力也显著高于低产组(P0.001)。4.通过将rmpA/rmpA2基因与拉丝试验阳性同时作为高毒力分组依据,可将124例肺炎克雷伯菌分为高毒力阳性组43例和阴性组81例,将这两组细菌产铁载体能力进行比较,发现高毒力阳性组产铁载体能力明显高于阴性组(P0.001)。5.PCR法共检出86株碳青霉烯耐药基因阳性菌,包括A类碳青霉烯酶76株(bla_(KPC-2) 76株)、B类碳青霉烯酶基因9株(bla _(NDM-1) 8株、bla_(IMP-4)1株)以及同时携带bla_(KPC-2)和bla_(NDM-1)基因1株。表型结果显示,mCIM试验敏感度为94.2%,特异度为94.7%。6.肺炎克雷伯菌高产铁载体组碳青霉烯类耐药率显著低于低产铁载体组(P0.001)。结论:肺炎克雷伯菌铁载体产量与毒力呈正相关,与碳青霉烯类耐药率呈负相关。此外,本研究发现了高毒力碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的存在,提示临床要做好细菌耐药监管防控工作,合理使用抗生素,避免出现超级细菌的暴发流行。


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