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耐低温防控蔬菜根结线虫优势菌株链霉菌S205的筛选及鉴定

何欢  
【摘要】:根结线虫病害是蔬菜生产疑难病害之一,生物防治是目前的研究与开发热点。多年的研究与实践证明,具备综合特性特别是耐低温根际优势菌株的获得是研制高效稳定生防制剂的重要前提。 本试验从发病黄瓜、番茄根际和根围土壤中分离得到不同形态菌株297株,其中细菌207株,放线菌90株。另对本研究室积累的对根结线虫有一定抗性的1株链霉菌S506菌株和3株芽孢杆菌进行了驯化和筛选研究。 室内初筛结果表明,发酵液5倍稀释液,对南方根结线虫二龄幼虫作用24h,校正击倒率大于70%的菌株共有9株,分别为S511、B167、S205、B244、STU101、S252、LK101、S251和S206。其中校正击倒率在90%以上的有4株,细菌B167和放线菌S511的校正击倒率最高,均为98.22%。对校正击倒率在70%以上的9株菌进行了不同浓度发酵稀释液(2倍、5倍和10倍)和不同作用时间(4h、8h、12h和24h)的击倒试验,结果表明,在2倍稀释液条件下,各菌株的校正击倒率均可达到87.39%以上,B167和B244的校正击倒率最高,均为99.16%。10倍稀释液,菌株S511的校正击倒率最高。对线虫作用较快的菌株有B167、B244、S511、S205和LK101。通过室内击倒试验筛选出7株优良菌株,分别为B167、B244、S511、STU1、S205和LK101。 采用室内耐低温、拮抗测试和盆栽生测(防线虫、促生、抗逆)方法进行了系统复筛。结果表明,各处理菌株对番茄植株都具有一定的促生作用,其中菌株S205的促生效果最好,与对照比较达显著水平(p0.05)。S205、STU101和B244的相对电导率均低于对照,其中S205的相对电导率最低,为10.14%。除S511外,其它菌株对不同土传病原菌均有抑制作用,其中对丝核菌抑制性最强的是菌株B244,抑制率为55.44%;对镰刀菌抑制性最强的是菌株S205,抑制率为51.11%;对疫霉菌抑制性最强的是菌株STU101,抑制率为51.67%。经室内耐低温测试,S205可在4℃下生长,具有很强的耐低温性。在15℃~18℃温室环境下进行了盆栽生测试验,结果表明,经S205处理的病情指数最低,防治效果最好。 综合比较防线虫、促生、提高植物抗性、抑菌谱广和耐低温等特性,确定链霉菌S205为最优菌株。 对菌株S205进行了分类鉴定。16S rDNA测序结果表明,S205与模式菌株Streptomyces antibioticus(AY999776)、Streptomyces antibioticus(AB184184)聚于同一分支,其相似性达到了100%。结合菌株S205的表型性状和生理生化特征,鉴定S205菌株为抗生素链霉菌(Streptomyces antibioticus)。


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