收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

小麦(Triticum aestivum L.)苗期水分胁迫诱导表达差异cDNA的研究

郭宾会  
【摘要】: 干旱是导致植物发生水分胁迫的一种最重要的环境因子,极大限度地制约着作物的生长和产量。因此,研究作物的抗旱机制、培育抗旱新品种已成为当前许多科研工作者的迫切需要。 差异显示反转录聚合酶链式反应,简称DDRT-PCR。因其操作简单、快速、灵敏性高、易重复等优点,自1992年由Liang Peng和Dr.Pardee发明以来,已成为分子生物学领域一种强有力的工具,被广泛地用来分离差异表达的基因。 本研究以小麦旱选10号为材料,用16%(ψ=-0.5MPa)PEG-6000溶液处理其幼苗,采用mRNA差异显示技术和银染技术,对经过不同胁迫时间诱导表达的小麦基因进行分离,共得到差异表达的cDNA片段52条。方法是:用16%(ψ=-0.5MPa)PEG-6000溶液处理小麦幼苗,用去离子水培育幼苗做对照;分别提取处理和对照幼苗的总RNA,反转录后进行PCR扩增,PCR产物经6%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染显色后可观察到清晰的条带。差异显示的PCR产物长度绝大部分在150bp到750bp之间。所回收的52条筹异带,经Reverse Northern.验证后,得到阳性表达的cDNA片段15个,其中包括4个“上调”基因和11个“下调”基因。用单个随机引物对上述15个片段进行再次扩增,全部表现为阴性。对15个阳性cDNA片段克隆并测序,通过与GenBank中的EST数据库比对,结果发现——11个cDNA片段与已知序列有较高的同源性,4个为未知基因序列。其中,受水分胁迫处理诱导表达信号增强的cDNA片段WSI732与高粱苗期病菌感染诱导的cDNA clone同源性为86%,WSI483与小麦休眠期胚乳、ABA处理的小麦胚cDNA clone、小麦苗期干旱胁迫处理的cDNA clone同源性为100%,与盐胁迫处理的大麦根cDNA clone同源性为99%,WSI153与小麦20天的穗、 郭宾会:小麦(Trltl。。,aestl。用L)苗期水分胁迫诱导表达差异cDNA的研究兰 开花后30一45大的种子CDNA clone同源性为100%。另外8个受水分胁迫处 理诱导表达信号减弱的cDNA片段序列分别与冷胁迫处理诱导的小麦幼苗、 小麦胚乳、人麦苗期根芽、小麦自化苗、镰刀菌感染的小麦穗、高粱苗期叶 及水稻芽期等植物组织CDNA clone同源性高达85%以上。另外4个差异片 段同源性非常低(小于30cy0),可能为新的基因序列,其功能有待于进一步 研究、鉴定。其中,盯八了夕夕在受到水分胁迫处理48h后强烈表达,Reverse Northern验证也得到同样结果,该基因片段在GenBank查询与已知序列儿 乎无任何同源性,断定为新的基因序列,其基因全长及其功能鉴定有待于进 一步的研究。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 赵洁岚;闵东红;张小红;薛飞洋;周永斌;;转GhDREB小麦株系‘G鲁麦23’抗旱性分析[J];西北植物学报;2011年07期
2 代彦满;吉仙枝;;水分胁迫对燕麦各生育时期保护酶活性的影响[J];安徽农业科学;2011年23期
3 汪云;陈胜勇;李观康;何霭如;余小丽;;甘薯抗旱性研究进展[J];广东农业科学;2011年11期
4 刘子凡;黄洁;胡体嵘;杨重法;;中度水分胁迫对木薯叶片光合特性影响[J];西南农业学报;2011年04期
5 ;全省夏粮有望边续七年增产[J];河北农业;2010年07期
6 鲁绍伟;陈吉虎;高旭彪;聂森;;水分胁迫下3椴树树种的光合作用特征研究[J];灌溉排水学报;2007年S1期
7 范苏鲁;苑兆和;冯立娟;王晓慧;丁雪梅;甄红丽;;水分胁迫下大丽花光合及叶绿素荧光的日变化特性[J];西北植物学报;2011年06期
8 ;新小麦三种贮存好方法[J];农村.农业.农民(B版);2011年07期
9 段仁燕;吴甘霖;王志高;吴礼凤;;不同水分处理下草莓叶绿素荧光参数的变化[J];光谱实验室;2011年04期
10 苏农;;新小麦贮存三种好方法[J];农家参谋;2011年08期
11 吕凤华;谭国波;;玉米不同时期水分胁迫对产量和光合生理的影响[J];吉林农业科学;2011年03期
12 ;2011/12年度世界小麦供需(美国农业部月度预测)[J];农业展望;2011年06期
13 万小荣;莫爱琼;余土元;;植物响应水分胁迫的分子机制研究进展[J];广东农业科学;2011年07期
14 时丽冉;;水分胁迫对小黑麦光合性能及水分利用率的影响[J];衡水学院学报;2011年04期
15 孟凡超;刘明;于吉琳;吴亚男;贾倩;齐华;;水分胁迫对玉米产量及干物质分配的影响[J];江苏农业科学;2011年03期
16 ;2011/12年度世界小麦供需(美国农业部月度预测)[J];农业展望;2011年07期
17 孙守文;李宏;丛者福;邓江宇;;水分胁迫对天山圆柏光合响应特性的影响[J];石河子大学学报(自然科学版);2011年03期
18 ;2011/12年度世界小麦供需(美国农业部月度预测)[J];农业展望;2011年08期
19 范海兰;洪伟;吴承祯;李键;林晗;侯智勇;;土壤水分胁迫对短葶山麦冬光响应特性的影响[J];福建林学院学报;2011年03期
20 孙歆;曾富春;胡攀;;水分胁迫下水杨酸对大麦幼苗抗氧化能力的影响[J];四川农业大学学报;2011年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 商鸿生;李玥仁;;水分胁迫诱导的小麦对条锈病的抗病性[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
2 谢惠民;张晓科;张燕春;付晓洁;;PEG诱导小麦幼苗株高和蛋白质差异的初步研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
3 郑军;王国英;;玉米幼苗水分胁迫相关基因的克隆和功能分析[A];中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第六次学术交流会论文集[C];2004年
4 王罗霞;王锁民;赵志光;;对水分胁迫条件下一氧化氮(NO)影响乙烯释放机制的探讨[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
5 沈漫;高遐虹;沈红香;董清华;王志忠;;三种景天科植物水分胁迫下的耐旱适应性研究[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
6 贾慧君;洪剑明;;不同营养状况的泡桐幼苗对水分胁迫的反应[A];中国植物学会七十周年年会论文摘要汇编(1933—2003)[C];2003年
7 刘艳;陈贵林;;乌拉尔甘草内源茉莉酸含量与亚细胞分布对水分胁迫的响应特征[A];第八届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2009年
8 贾慧君;郑槐明;洪剑明;;泡桐幼苗对水分胁迫响应的生理机制的研究[A];2004中国植物生理生态学学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年
9 贾慧君;郑槐明;洪剑明;;泡桐幼苗对水分胁迫响应的生理机制的研究[A];中国植物生理学会第九次全国会议论文摘要汇编[C];2004年
10 邵艳军;;水分胁迫对棉花愈伤组织胚状体形成的影响[A];中国棉花学会2007年年会论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 邱宗波;激光对干旱胁迫小麦幼苗的防护和修复效应及机理研究[D];西北大学;2008年
2 谢深喜;水分胁迫下柑橘超微结构及生理特性研究[D];湖南农业大学;2006年
3 彭立新;水分胁迫下苹果MAPK基因的克隆、表达特性与信号转导作用[D];山东农业大学;2003年
4 韦小丽;喀斯特地区3个榆科树种整体抗旱性研究[D];南京林业大学;2005年
5 沈景林;野大麦抗性品种选育及转基因育种研究[D];吉林大学;2006年
6 吕金印;小麦生育后期限量供水的生理生化基础[D];西北农林科技大学;2003年
7 景茂;银杏对土壤水分胁迫的响应[D];南京林业大学;2005年
8 杨淑慎;抗旱小麦品种长武134耐旱的生理与分子机制研究[D];西北农林科技大学;2005年
9 覃川杰;瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)脂肪代谢相关基因cDNA的克隆及表达分析[D];华东师范大学;2010年
10 曹慧;水分胁迫诱导苹果属植物叶片衰老机理的研究[D];中国农业大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郭志爱;小麦抗旱相关基因TaRab2和TaFer的克隆及分析[D];山西农业大学;2005年
2 史磊;水分胁迫下不同基因型小麦光合特性的比较研究[D];西北农林科技大学;2006年
3 周莉娜;水分胁迫下硫对作物苗期根系导水率的影响[D];西北农林科技大学;2005年
4 高双成;小麦种子萌发期水分胁迫差异表达cDNA的研究[D];山西农业大学;2003年
5 郭宾会;小麦(Triticum aestivum L.)苗期水分胁迫诱导表达差异cDNA的研究[D];河北师范大学;2003年
6 臧庆伟;小麦抗旱相关基因TaCP和TaLTP1的克隆及功能分析[D];中国农业科学院;2005年
7 张宏一;高粱幼苗水分胁迫诱导表达差异cDNA的研究[D];中国农业科学院;2005年
8 刘春光;水分胁迫及复水对作物生长及养分吸收补偿效应的研究[D];西北农林科技大学;2001年
9 郝言明;柔嫩艾美耳球虫两个抗药株消减cDNA文库的序列分析[D];福建农林大学;2010年
10 王锦玲;龙眼叶片黄酮类化合物合成关键酶基因和DHAR基因cDNA全长的克隆[D];福建农林大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 省植保总站 刘光涛;当心条沙叶蝉危害小麦[N];河北科技报;2005年
2 安建功;双季速生小麦选育成功[N];河南科技报;2000年
3 巧贞;新小麦贮藏有技巧[N];河南科技报;2005年
4 吴鲁智 牛河钧 吴伟凡;种植小麦技术要点歌[N];中华合作时报;2005年
5 ;小麦基肥施后即深耕巧施追肥可高产[N];科学导报;2005年
6 武云飞 乔存金;兖州优质小麦引来众多商家[N];农资导报;2005年
7 本报记者 赵永平;夏收小麦咋管理[N];人民日报;2005年
8 李国忠 董建设;储藏小麦新法[N];周口日报;2005年
9 黄守锋;小麦 调整延续[N];证券日报;2003年
10 李海波;五类小麦走俏国内市场[N];中国特产报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978